Rastreamento de células mononucleares do sangue periférico com ressonância magnética com flúor (TRACK)

Antecedentes: Nenhum dos agentes de rotulagem de células de ressonância magnética de grau de Boas Práticas de Fabricação (GMP) atualmente disponíveis é aprovado para uso no Canadá. Existe uma preparação de nanopartículas de óxido de ferro de grau GMP que está disponível comercialmente, mas não é adequada para rotular as populações de células imunológicas que os investigadores estão interessados ​​em rastrear in vivo. Os investigadores, em vez disso, optaram por desenvolver o perfluorocarbono à base de 19F de grau GMP, disponível comercialmente, conhecido como Cell Sense, com o propósito de rastrear terapias de vacinas baseadas em células imunológicas in vivo. Este agente foi usado com sucesso em um ensaio clínico de fase I nos Estados Unidos e foi aprovado para um segundo ensaio de recrutamento atual, sob a supervisão do FDA.

O agente traçador celular Cell Sense (CS-1000) é um traçador inerte e não metabolizável. Como o CS-1000 é absorvido e incorporado na célula, as análises farmacodinâmicas e farmacocinéticas tradicionais em animais e humanos não são apropriadas, uma vez que a adsorção e a biodistribuição variam com o tipo de célula e, portanto, não foram realizadas. Estudos in vitro de toxicidade para vários tipos de células não produziram evidências de efeitos adversos em várias funções celulares. O Cell Sense também demonstrou ser não mutagênico usando os ensaios de timidina quinase (TK) de Ames e Forward. Foi observada alguma irritação cutânea limitada quando >2.500 vezes mais Cell Sense do que o esperado para ser injetado ao máximo em humanos foi injetado por via intradérmica em ratos.

Exemplos de rótulos de rastreamento de células de ressonância magnética incluem nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro e compostos contendo 19F, como perfluorocarbonos. A vantagem de usar ressonância magnética celular para rastrear células é que é utilizado um traçador não radioativo adequado para estudos longitudinais. A ressonância magnética oferece imagens 3D com excelente contraste de tecidos moles. A vantagem adicional de usar 19F em relação aos agentes à base de ferro é que o 19F é um agente de marcação celular com contraste positivo e facilmente quantificável. Além disso, não há sinal de ressonância magnética de fundo 19F em humanos, enquanto a ressonância magnética envolvendo ferro pode ser confundida por diferentes artefatos de imagem e é um agente de contraste negativo que é difícil de quantificar com precisão. Os investigadores estão particularmente interessados ​​​​em saber se as células imunológicas chegam aos órgãos linfóides secundários, como os gânglios linfáticos.

Design de estudo:

Estudo aberto, escalonamento de dose, centro único, estudo de fase I que acumulará (a) 6 adultos saudáveis ​​e (b) 6 pacientes com câncer de próstata.

Três adultos saudáveis ​​e três pacientes com câncer de próstata serão inscritos na primeira coorte. Sangue total (150 ml) será obtido por punção venosa. Após o processamento do sangue para obtenção de células mononucleares do sangue periférico (PBMC), metade das PBMC será tratada com Cell Sense por 8-24 horas. Dada a robustez de nossos dados usando 5 doadores durante simulações, os investigadores não propõem comparar células marcadas com células não marcadas como critérios de liberação. No entanto, os investigadores coletarão esses dados para fins de informação e pesquisa. Três milhões (3 x 106) de PBMC autólogos marcados com Cell Sense serão administrados por via intradérmica aos indivíduos da coorte 1. Os três adultos saudáveis ​​e os 3 indivíduos com câncer de próstata serão testados simultaneamente.

Se nenhum evento adverso de grau 2 ou superior for observado na 1ª coorte, a inscrição simultânea prosseguirá para recrutar um segundo conjunto de 3 indivíduos adultos saudáveis ​​e o segundo conjunto de 3 pacientes com câncer de próstata. A segunda coorte de indivíduos será submetida ao mesmo projeto, mas com um aumento da dose para 2-3 x 107 PBMC autólogos marcados com Cell Sense administrados por via intradérmica.

Pontos finais:

Pontos finais primários:

Determinar a viabilidade do uso do Cell Sense para detectar e monitorar a migração de PBMC em humanos

Pontos finais secundários:

• Confirme e otimize ainda mais a detecção do 19F Cell Sense e os parâmetros de imagem anatômica do Hidrogênio-1 (1H) para geração de imagens usando a bobina dupla 19F/1H.
• Determine se a migração de PBMC marcada com Cell Sense para o linfonodo de drenagem pode ser detectada.
• Determine se os gânglios linfáticos na área de interesse fotografada mudam de tamanho no lado injetado em comparação com o lado contralateral.
• Quantifique o número de PBMC marcados com Cell Sense detectados.
• Avalie os parâmetros de segurança (toxicidade) conforme definidos por:
• eventos adversos.
• eventos adversos graves.
• alterações na determinação laboratorial e parâmetros de sinais vitais avaliados pelo histórico médico, exame físico e testes laboratoriais clínicos.

As seguintes categorias serão usadas para classificar quaisquer eventos adversos:

• Grau 1: não interfere nas atividades diárias,
• Grau 2: interfere nas atividades diárias, não é necessário tratamento, exceto paracetamol,
• Grau 3: impede atividades diárias ou requer tratamento.
• Grau 4: risco de vida

As diretrizes do NIH e da FDA (ou CTCAE v 4.0) serão usadas para determinar a gravidade dos eventos adversos