Отслеживание мононуклеарных клеток периферической крови с помощью МРТ с фтором (TRACK)

Справочная информация: Ни один из доступных в настоящее время агентов для маркировки клеток МРТ, соответствующих требованиям надлежащей производственной практики (GMP), не одобрен для использования в Канаде. Существует один препарат наночастиц оксида железа, соответствующий требованиям GMP, который коммерчески доступен, но он не подходит для мечения популяций иммунных клеток, которые исследователи заинтересованы в отслеживании in vivo. Вместо этого исследователи решили разработать коммерчески доступный перфторуглерод на основе 19F GMP-класса, известный как Cell Sense, с целью отслеживания вакцинной терапии на основе иммунных клеток in vivo. Этот агент был успешно использован в первой фазе клинических испытаний в США и одобрен для участия во втором испытании, проводимом в настоящее время под надзором FDA.

Агент для отслеживания клеток Cell Sense (CS-1000) представляет собой инертный, неметаболизируемый индикатор. Поскольку CS-1000 поглощается и включается в клетку, традиционные фармакодинамические и фармакокинетические анализы на животных и людях не подходят, поскольку адсорбция и биораспределение будут варьироваться в зависимости от типа клеток, и поэтому они не проводились. Исследования токсичности in vitro в отношении различных типов клеток не выявили неблагоприятного воздействия на различные функции клеток. Также было показано, что Cell Sense не является мутагенным с помощью анализов Эймса и Форвард-тимидинкиназы (ТК). Некоторое ограниченное раздражение кожи наблюдалось, когда крысам внутрикожно вводили в 2500 раз больше Cell Sense, чем ожидалось в максимально возможной дозе для человека.

Примеры меток для отслеживания клеток с помощью МРТ включают суперпарамагнитные наночастицы оксида железа и 19F-содержащие соединения, такие как перфторуглероды. Преимущество использования клеточной МРТ для отслеживания клеток заключается в том, что используется нерадиоактивный индикатор, подходящий для продольных исследований. МРТ позволяет получить 3D-изображения с превосходным контрастом мягких тканей. Дополнительным преимуществом использования 19F по сравнению с агентами на основе железа является то, что 19F является положительным, легко поддающимся количественной оценке агентом контрастного мечения клеток. Кроме того, у людей нет сигнала МРТ на фоне 19F, тогда как МРТ с участием железа может искажаться различными артефактами визуализации, и это отрицательный контрастный агент, который трудно точно определить количественно. Исследователей особенно интересует, попадают ли иммунные клетки во вторичные лимфоидные органы, такие как лимфатические узлы.

Дизайн исследования:

Открытое исследование фазы I с увеличением дозы в одном центре, в котором примут участие (а) 6 здоровых взрослых и (б) 6 пациентов с раком простаты.

В первую группу войдут трое здоровых взрослых и трое больных раком простаты. Цельную кровь (150 мл) получают путем венепункции. После обработки крови для получения мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) половина РВМС будет обработана Cell Sense в течение 8-24 часов. Учитывая надежность наших данных с использованием 5 доноров во время пробных прогонов, исследователи не предлагают сравнивать меченые и немеченые клетки в качестве критериев высвобождения. Однако следователи будут собирать эти данные в информационных и исследовательских целях. Три миллиона (3 x 106) аутологичных PBMC, меченных Cell Sense, будут введены внутрикожно субъектам когорты 1. Трое здоровых взрослых и трое пациентов с раком простаты будут проверены одновременно.

Если в 1-й группе не наблюдаются нежелательные явления 2-й степени или выше, в параллельный набор будет включен второй набор из 3 здоровых взрослых субъектов и второй набор из 3 пациентов с раком простаты. Вторая группа субъектов будет подвергнута той же схеме, но с увеличением дозы до 2-3 x 107 аутологичных РВМС, меченных Cell Sense, вводимых внутрикожно.

Конечные точки:

Первичные конечные точки:

Определить возможность использования Cell Sense для обнаружения и мониторинга миграции РВМС у людей.

Вторичные конечные точки:

• Подтвердите и дополнительно оптимизируйте параметры обнаружения 19F Cell Sense и анатомической визуализации водорода-1 (1H) для визуализации с использованием двойной катушки 19F/1H.
• Определите, можно ли обнаружить миграцию РВМС, меченных Cell Sense, в дренирующий лимфатический узел.
• Определите, изменяются ли размеры лимфатических узлов в интересующей области на стороне инъекции по сравнению с контралатеральной стороной.
• Определите количество обнаруженных PBMC, меченных Cell Sense.
• Оценить параметры безопасности (токсичность), определенные следующим образом:
• неблагоприятные события.
• серьезные нежелательные явления.
• изменения лабораторных показателей и параметров жизненно важных функций по данным истории болезни, физического осмотра и клинических лабораторных тестов.

Для оценки любых нежелательных явлений будут использоваться следующие категории:

• 1 степень: не мешает повседневной деятельности,
• Степень 2: мешает повседневной деятельности, лечения не требуется, кроме парацетамола.
• Степень 3: предотвращает повседневную активность или требует лечения.
• Степень 4: опасная для жизни

Рекомендации NIH и FDA (или CTCAE v 4.0) будут использоваться для определения тяжести нежелательных явлений.