Perifeerisen veren mononukleaaristen solujen seuranta fluori-MRI:llä (TRACK)

Taustaa: Mitään tällä hetkellä saatavilla olevista Good Manufacturing Practices (GMP) -luokan MRI-soluleimausaineista ei ole hyväksytty käytettäväksi Kanadassa. Yksi rautaoksidinanohiukkasten GMP-laatuinen valmiste on kaupallisesti saatavilla, mutta se ei sovellu niiden immuunisolupopulaatioiden leimaamiseen, joita tutkijat ovat kiinnostuneita seuraamaan in vivo. Sen sijaan tutkijat ovat päättäneet kehittää kaupallisesti saatavilla olevaa, GMP-laatuista 19F-pohjaista perfluorihiilivetyä, joka tunnetaan nimellä Cell Sense, immuunisolupohjaisten rokotehoitojen seuraamiseksi in vivo. Tätä ainetta on käytetty menestyksekkäästi vaiheen I kliinisessä tutkimuksessa Yhdysvalloissa, ja se on hyväksytty toiseen kokeeseen, joka on käynnissä FDA:n valvonnassa.

Solujäljitysaine Cell Sense (CS-1000) on inertti, ei-metaboloituva merkkiaine. Koska CS-1000 otetaan talteen ja liitetään soluun, perinteiset farmakodynaamiset ja farmakokineettiset analyysit eläimillä ja ihmisillä eivät ole sopivia, koska adsorptio ja biologinen jakautuminen vaihtelevat solutyypin mukaan, joten niitä ei ole tehty. In vitro -tutkimukset toksisuudesta eri solutyypeille eivät tuottaneet näyttöä haitallisista vaikutuksista eri solutoimintoihin. Cell Sensen osoitettiin myös olevan ei-mutageeninen käyttämällä Amesin ja Forwardin tymidiinikinaasi (TK) -määrityksiä. Jonkin verran rajoitettua ihoärsytystä havaittiin, kun >2 500 kertaa enemmän Cell Senseä kuin odotettiin maksimaalisesti ihmisiin injektoitua ihonsisäisesti rotille.

Esimerkkejä MRI-soluseurantaleimoista ovat superparamagneettiset rautaoksidinanohiukkaset ja 19F:tä sisältävät yhdisteet, kuten perfluorihiilivedyt. Solujen MRI:n käytön etuna solujen seurantaan on, että käytetään ei-radioaktiivista merkkiainetta, joka soveltuu pitkittäistutkimuksiin. MRI tarjoaa 3D-kuvan, jossa on hieno pehmytkudoskontrasti. 19F:n käytön lisäetu rautapohjaisiin aineisiin verrattuna on, että 19F on positiivinen, helposti mitattavissa oleva varjoainesolujen leimausaine. Lisäksi ihmisillä ei ole 19F-tausta MRI-signaalia, kun taas rautaa käyttävät magneettikuvaukset voivat olla hämmentyneitä erilaisista kuvantamisartefakteista ja se on negatiivinen varjoaine, jota on vaikea määrittää tarkasti. Tutkijat ovat erityisen kiinnostuneita siitä, saapuvatko immuunisolut sekundaarisiin imusolmukkeisiin, kuten imusolmukkeisiin.

Opintosuunnitelma:

Avoin, annosta nostava, yksikeskus, vaiheen I tutkimus, johon osallistuu (a) 6 tervettä aikuista ja (b) 6 eturauhassyöpäpotilasta.

Ensimmäiseen kohorttiin otetaan kolme tervettä aikuista ja kolme eturauhassyöpäpotilasta. Kokoveri (150 ml) otetaan laskimopunktiolla. Sen jälkeen, kun verta on käsitelty perifeerisen veren mononukleaarisolujen (PBMC) saamiseksi, puolta PBMC:stä käsitellään Cell Sensellä 8–24 tunnin ajan. Ottaen huomioon tietojemme vankuuden käyttämällä viittä luovuttajaa kuiva-ajon aikana, tutkijat eivät ehdota leimattujen ja leimaamattomien solujen vertaamista vapautumiskriteereinä. Tutkijat kuitenkin keräävät näitä tietoja tiedoksi ja tutkimustarkoituksiin. Kolme miljoonaa (3 x 106) Cell Sense -leimattua autologista PBMC:tä annetaan intradermaalisesti kohortin 1 koehenkilöille. Kolme tervettä aikuista ja kolme eturauhassyöpäpotilasta testataan samanaikaisesti.

Jos 1. kohortissa ei havaita 2. asteen tai korkeamman asteen haittatapahtumia, samanaikainen rekisteröinti etenee ja värvätään toinen ryhmä, jossa on 3 tervettä aikuista henkilöä ja toinen ryhmä, jossa on 3 eturauhassyöpäpotilasta. Toiselle kohorttiryhmälle tehdään sama malli, mutta annosta korotetaan 2-3 x 107 Cell Sense -leimattua autologista PBMC:tä, joka annetaan intradermaalisesti.

Päätepisteet:

Ensisijaiset päätepisteet:

Selvitä Cell Sensen käyttökelpoisuus PBMC:n kulkeutumisen havaitsemiseen ja seurantaan ihmisissä

Toissijaiset päätepisteet:

• Vahvista ja optimoi 19F Cell Sense -tunnistus- ja Hydrogen-1 (1H) -anatomiset kuvantamisparametrit 19F/1H-kaksoiskelaa käyttävää kuvantamista varten.
• Selvitä, voidaanko Cell Sense -leimatun PBMC:n migraatio tyhjentävään imusolmukkeeseen havaita.
• Selvitä, muuttuuko kuvatulla alueella olevien imusolmukkeiden koko injektiopuolella verrattuna kontralateraaliseen puoleen.
• Määritä havaittujen Cell Sense -leimattujen PBMC:iden määrä.
• Arvioi turvallisuusparametrit (toksisuus), jotka on määritelty:
• vastoinkäymiset.
• vakavia haittatapahtumia.
• muutokset laboratoriomäärityksissä ja elintoimintoparametreissa, jotka on arvioitu sairaushistorian, fyysisen tutkimuksen ja kliinisen laboratoriotestin perusteella.

Seuraavia luokkia käytetään mahdollisten haittatapahtumien luokitteluun:

• luokka 1: ei häiritse päivittäistä toimintaa,
• Aste 2: häiritsee päivittäistä toimintaa, ei vaadi hoitoa, paitsi parasetamoli,
• Aste 3: estää päivittäistä toimintaa tai vaatii hoitoa.
• Luokka 4: Henkeä uhkaava

NIH:n ja FDA:n (tai CTCAE v 4.0) -ohjeita käytetään haittatapahtumien vakavuuden määrittämiseen