Léčba mírné až středně těžké infekce Clostridium Difficile (CDI) (IM-01)

ÚVOD: ZÁKLADNÍ INFORMACE A VĚDECKÉ ODŮVODNĚNÍ Zvýšený výskyt „superbakterií“ odolných vůči antibiotikům celosvětově zesílil používání širokospektrých antibiotik. Nezamýšleným důsledkem antimikrobiální léčby je narušení gastrointestinální mikroflóry, což má za následek náchylnost k oportunním patogenům, jako je Clostridium difficile (C. obtížné).

C. difficile je grampozitivní, sporotvorná, anaerobní bakterie, která způsobuje nemocniční a komunitní střevní infekce, které mají za následek průjem související s C. difficile, pseudomembranózní kolitidu, kolitidu a smrt.

Infekce Clostridium difficile (CDI) zůstává hlavní příčinou infekčního průjmu souvisejícího se zdravotní péčí, který se soustřeďuje především v nemocnicích, ale také v komunitě v míře ~100/100 000 obyvatel a postihuje neúměrně starší osoby. Antimikrobiální poškození střevního mikrobiomu spojené se získáním spor C. difficile je hlavní příčinou patogeneze. CDI je endemický v nemocnicích, a přestože opatření pro kontrolu infekcí snížila v Kanadě za posledních 5 let nozokomiální míru CDI, komunitní případy se nyní zdají být zjevnější. Léčba CDI využívá alternativní antimikrobiální látky zaměřené na patogen, zejména metronidazol, vankomycin, nebo fidaxomicin podávaný doporučeně 10-14 dní. Zatímco většina reaguje na léčbu antibiotiky, následné recidivy CDI jsou pozorovány u 25–40 % pacientů. Recidivy CDI jsou přeléčeny stejnými antibiotiky a vzhledem k neselektivnímu spektru aktivity metronidazolu a vankomycinu se zvyšuje pravděpodobnost recidiv následných recidiv. Fidaxomicin je relativně selektivnější a jeho použití je spojeno se sníženou recidivou, ale vysoká cena fidaxomicinu omezuje použití.

Infekce C. difficile je závažné průjmové onemocnění spojené se značnou morbiditou a mortalitou a je odpovědné za nemocniční a komunitní průjmy, pseudomembranózní kolitidu a smrt.

Společnost ImmuniMed Inc. vyvinula orální imunoterapii pomocí polyklonálních protilátek anti-C. difficile odvozených z vajec (IM-01), která přímo cílí na faktory virulence C. difficile. IM-01 se vyrábí z kuřecích vajec po imunizaci nosnic virulentními antigeny C. difficile, toxinem A, toxinem B, celými buňkami C. difficile a sporami C. difficile. IM-01 je ve formě sprejově sušeného prášku z celých vajec (žloutek a vaječný bílek obsahující ovalbumin) a je velmi stabilní pro funkční aktivitu. Po rekonstituci se IM-01 podává perorálně, což mu umožňuje dostat se do střevního lumen, kde toxiny C. difficile uplatňují své toxické účinky. Kromě toho se protilátky IM-01 vážou na toxiny a spory C. difficile a neutralizují jejich biologické aktivity in vitro.

Použití polyklonálních protilátek pocházejících z kuřecích vajec (IgY) k poskytnutí pasivní imunity si získalo pozornost jako nová strategie pro perorální imunoterapii jako alternativa k antibiotikům pro léčbu střevních patogenů, které způsobují průjem u zvířat a lidí, včetně enterotoxigenních E. coli, Salmonella spp, a bovinní i lidské rotaviry. Ve srovnání se savčími protilátkami (IgG) mají protilátky pocházející z kuřecích vajec (IgY) vysokou antigenní specificitu a aviditu, reagují rychleji na stejné antigeny a liší se od savčích protilátek (IgG) jak ve strukturálních, tak imunologických vlastnostech. Ve srovnání s IgG IgY je stabilnější ve střevě při pH 3,5 -11 a lépe snáší enzymatickou degradaci trypsinem a chymotrypsinem; stabilita IgY proti pepsinu je závislá na pH.

Immunimed zjistil, že IgY polyklonální protilátky specifické pro E. coli ve vaječném prášku obsahujícím albumin jsou funkčně stabilní, pokud jsou skladovány při teplotě 2-8 °C po dobu více než 10 let.

Díky tomu jsou protilátky IM-01 atraktivní pro orální imunoterapii, protože vejce jsou normálními složkami potravy bez známých toxických vedlejších účinků. Ukázalo se, že protilátky IM-01 se vážou s toxiny a sporami C. difficile a také neutralizují jejich biologické aktivity in vitro.

Ve srovnání s aktivní vakcinací, pasivní imunoterapií s použitím IM-01 polyklonální anti-C odvozené od vajíčka. difficile protilátky mají výhody včetně: (i) rychlého a lokálního nástupu účinku, (ii) vysoce specifické aktivity, (iii) použitelnosti na širší spektrum pacientů od dětí po dospělé včetně imunokompromitovaných pacientů, (iv) strategicky lze aplikovat specifická událost, když k ní dojde, na rozdíl od vakcinačního modelu, kde je třeba velké populace léčit předem a udržovat aktivní protilátky po dlouhou dobu, a (v) je normální součástí lidské stravy.

V publikované literatuře byli křečci ošetřeni orálně polyklonálními protilátkami proti toxinu A a antitoxinu B neutralizujícími vejce po expozici C. difficile. Také u křečků léčených protilátkami získanými z vajec se měsíce po léčbě protilátkami nevyvinulo relapsující onemocnění. .

Kromě toho mají polyklonální protilátky pocházející z vajec několik výhod oproti monoklonálním protilátkám (MAbs), protože MAb jsou obecně specifické pro jeden epitop, zatímco polyklonální protilátky - nová třída biofarmaceutik, které mají vyšší afinitu k více cílovým antigenům a dokážou rozpoznat více epitopů což vede k vynikající potenci; protože mohou rozpoznat více toxinových epitopů, protože je to relevantní pro polymorfismus genů toxinu A a toxinu B v C. difficile.

Byla provedena studie selat, aby se prokázala bezpečnost a terapeutický účinek polyklonálních protilátek pocházejících z vajec - specifických pro E. coli K-88 u hospodářských zvířat. Bylo zjištěno, že E. coli K88, která způsobuje průjem u selat kolonizací v dolním GI traktu selat, zlepšuje jejich růstovou výkonnost po léčbě protilátkami specifickými pro E. coli K-88 orálně. Kromě toho bylo dosaženo nejvyššího přírůstku tělesné hmotnosti u prasat, která byla krmena nejvyšší dávkou protilátek E. coli K-88 (4 kg/1000 kg krmiva pro školky) ve srovnání s nejnižší dávkou protilátek (1 kg/1000 kg krmiva pro školky).

Dospělo se k závěru, že krmení selat polyklonálními protilátkami získanými z vajec, specifickými pro E. coli K-88, vede k významně zlepšenému růstu v závislosti na dávce protilátky. Výrobní proces polyklonálních protilátek pocházejících z vajec zaměřených na enterotoxigenní E. coli byl schválen a ověřen Kanadským centrem pro veterinární biologickou léčbu.

Závěrem lze říci, že perorální imunoterapie s použitím polyklonálních protilátek má vysoký bezpečnostní profil s nízkou pravděpodobností nežádoucích účinků. Pokud se prokáže, že je účinný jako antiinfekční přístup, mohl by být snížen selekční tlak antibiotik, což je klíčová strategie pro omezení antibiotické rezistence u infekcí C. difficile.

IM-01 je sprejově sušený vaječný prášek obsahující polyklonální protilátky - specifické k toxinům A a toxinu B C. difficile plus protilátky proti sporám C, difficile. Dávka 20 g/den IM-01 byla vybrána na základě údajů z preklinické studie na zvířatech s použitím selat k léčbě enteritis C. difficile. s 0,6 g IM-01 perorálně denně po dobu 4 dnů.

Ze soucitu byli do studie zařazeni pacienti s potvrzenou klinickou diagnózou CDI s neformovanou průjmovou stolicí, křečemi v břiše a pozitivním testem stolice na přítomnost toxinů a/nebo C. difficile v kultivaci, 106 pacientů (věk: 11-93 let). klinická studie. Všichni pacienti podepsali informovaný souhlas s účastí ve studii. Množství práškového produktu protilátky IM-01 (10 g nebo 20 g) perorálně podávané denně každým pacientem se 150 ml mléka a sledované po dobu až 6 týdnů po imunoterapii IM-01. 76 pacientů dostávalo perorální dávku 20 g IM-01 a 30 pacientů dostávalo 10 g prášku IM-01 denně po dobu 10 po sobě jdoucích dnů jako pitnou terapii mlékem nebo čokoládovým mlékem. Primárním cílovým parametrem studie byla eradikace C. difficile ve vzorcích stolice.

Ze 106 pacientů léčených terapií IM-01 vykazovalo 101 pacientů významné zlepšení klinických příznaků s negativními výsledky testu stolice na CDI. Pět pacientů vykazovalo snížené klinické příznaky během období léčby IM-01. Během sledovaného období nebyla při léčbě IM-01 pozorována žádná recidiva. Nebyly hlášeny žádné bezpečnostní obavy.

Antibiotika standardní péče (SOC) pro léčbu CDI pozorovala odezvu na léčbu, tj. ústup průjmu a vedlejších symptomů/znaků u 72–88 % subjektů a u subjektů, které dosáhnou vymizení CDI, ~16-24 % zaznamenají recidivu CDI během 8 týdnů sledování. Nereagující pacienti jsou léčeni vyššími dávkami vankomycinu. denní interval. V nedávných RCT antimikrobiálních látek byla použita minimální doba sledování po léčbě 30 dní. Jiné studie používaly několik časových bodů, tj. 8 týdnů nebo 12 týdnů po léčbě. Proto při absenci standardního kontrolního ramene péče budou jako vzor odpovědi pro tuto studii použity výše uvedené míry odpovědi pro vyřešení symptomů CDI (~80 %) a míra recidivy 20 %. Při absenci randomizace subjektů do kontrolní skupiny antibiotické léčby,