Behandling av mild-moderat Clostridium Difficile-infeksjon (CDI) (IM-01)

INNLEDNING: BAKGRUNNSINFORMASJON OG VITENSKAPLIG RASIONAL Den økte forekomsten av antibiotikaresistente 'superbugs' har forsterket bruken av bredspektrede antibiotika over hele verden. En utilsiktet konsekvens av antimikrobiell behandling er forstyrrelse av gastrointestinal mikrobiota, noe som resulterer i mottakelighet for opportunistiske patogener, som Clostridium difficile (C. vanskelig).

C. difficile er en gram-positiv, sporedannende, anaerob bakterie som forårsaker enteriske infeksjoner som er ervervet på sykehus og i lokalsamfunn, som resulterer i C. difficile-assosiert diaré, pseudomembranøs kolitt, kolitt og død.

Clostridium difficile-infeksjon (CDI) er fortsatt den dominerende årsaken til helsehjelp-assosiert infeksiøs diaré, sentrert hovedsakelig på sykehus, men også i samfunnet med en hastighet på ~100/100 000 innbyggere og påvirker eldre uforholdsmessig. Antimikrobiell skade på tarmmikrobiomet kombinert med oppkjøp av sporer av C. difficile er hovedårsaken til patogenesen. CDI er endemisk på sykehus, og selv om infeksjonskontrolltiltak har redusert nosokomiale rater av CDI i Canada i løpet av de siste 5 årene, ser det nå ut til at fellesskapstilfeller er mer tydelige. Behandling av CDI bruker alternative antimikrobielle midler rettet mot patogenet, hovedsakelig metronidazol, vankomycin, eller fidaxomicin gitt i anbefalte 10-14 dager. Mens flertallet reagerer på antibiotikabehandling, observeres påfølgende tilbakefall av CDI hos 25-40 % av pasientene. Residiv av CDI behandles tilbake med de samme antibiotika, og på grunn av det ikke-selektive aktivitetsspekteret til metronidazol og vankomycin, øker sannsynligheten for tilbakefall for påfølgende tilbakefall. Fidaxomicin er relativt mer selektivt og bruken er assosiert med reduserte tilbakefall, men de høye kostnadene for fidaxomicin har begrenset bruken.

C. difficile-infeksjon er en alvorlig diarésykdom assosiert med betydelig sykelighet og dødelighet og er ansvarlig for sykehus- og lokalsamfunnservervet diaré, pseudomembranøs kolitt kolitt og død.

ImmuniMed Inc. har utviklet en oral immunterapi som bruker egg-avledede polyklonale anti-C. difficile antistoffer (IM-01), som direkte retter seg mot virulensfaktorene til C. difficile. IM-01 er produsert fra kyllingegg etter immunisering av verpehøner med C. difficile virulente antigener, C. difficile toksin A, toksin B, C. difficile hele celler og C. difficile sporer. IM-01 er i form av spraytørket hele eggepulver (plomme pluss eggehvite som inneholder ovalbumin) og er meget stabil for funksjonell aktivitet. Ved rekonstituering administreres IM-01 oralt, noe som gjør at det kan nå til tarmlumen, hvor C. difficile-toksiner utøver sine toksiske effekter. I tillegg binder IM-01-antistoffer seg til C. difficile-toksiner og sporer og nøytraliserer deres biologiske aktiviteter in vitro.

Bruken av polyklonale antistoffer avledet fra kyllingegg (IgY) for å gi passiv immunitet har fått oppmerksomhet som en ny strategi for oral immunterapi som et alternativ til antibiotika for behandling av tarmpatogener som forårsaker diaré hos dyr og mennesker, inkludert enterotoksigen E. coli, Salmonella spp, og både bovine og humane rotavirus. Sammenlignet med pattedyrantistoffer (IgG), har kyllingegg-avledede antistoffer (IgY) høy antigen-spesifisitet og aviditet, reagerer raskere på de samme antigener og skiller seg fra pattedyrantistoffer (IgG) i både strukturelle og immunologiske egenskaper.. Sammenlignet med IgG , IgY er mer stabil i tarmen ved pH 3,5 -11 og tolererer bedre enzymatisk nedbrytning av trypsin og chymotrypsin; stabiliteten til IgY mot pepsin er pH-avhengig.

Immunimed har bestemt at IgY polyklonale antistoffer spesifikke for E. coli i eggpulver som inneholder albumin, er funksjonelt stabile når de lagres ved 2-8°C i over 10 år.

Dette gjør IM-01-antistoffer attraktive for oral immunterapi siden egg er normale kostholdskomponenter, uten kjente toksiske bivirkninger. IM-01-antistoffene er vist å binde seg til C. difficile-toksiner og sporer, samt å nøytralisere deres biologiske aktiviteter in vitro.

Sammenlignet med aktiv vaksinasjon, passiv immunterapi ved bruk av IM-01 egg-avledet polyklonal anti-C. difficile antistoffer har fordeler inkludert: (i) rask og lokal virkningsstart, (ii) svært spesifikk aktivitet, (iii) anvendbarhet på et bredere spekter av pasienter fra barn til voksne inkludert immunkompromitterte pasienter, (iv) strategisk kan brukes for en spesifikk hendelse når den inntreffer, i motsetning til en vaksinasjonsmodell der store populasjoner må behandles på forhånd og opprettholde aktive antistoffer i lang tid, og (v) er en normal del av menneskelig kosthold.

I en publisert litteratur ble hamstere behandlet oralt med C. difficile anti-toksin A og anti-toksin B nøytraliserende egg-avledede polyklonale antistoffer beskyttet etter C. difficile utfordring. Hamstere behandlet med egg-avledede antistoffer utviklet heller ikke tilbakefallssykdom måneder etter behandlingen med antistoffer. .

Videre har egg-avledede polyklonale antistoffer flere fordeler fremfor de monoklonale antistoffene (MAbs), siden MAbs generelt er spesifikke for enkelt epitop, når polyklonale antistoffer - en ny klasse av biofarmasøytiske midler, som har høyere affinitet for flere målantigener og kan gjenkjenne flere epitoper resulterer i overlegen styrke; siden de kan gjenkjenne flere toksin-epitoper da det er relevant for polymorfisme av toksin A- og toksin B-genene i C. difficile.

En smågrisstudie ble utført for å demonstrere sikkerheten og den terapeutiske effekten av egg-avledede polyklonale antistoffer - spesifikke for E. coli K-88, hos husdyr. Det er fastslått at E. coli K88 som forårsaker diaré hos smågris ved å kolonisere i den nedre GI-kanalen til smågriser forbedrer deres vekstevne etter behandling med E. coli K-88-spesifikke antistoffer oralt. Videre ble den høyeste kroppsvektøkningen oppnådd hos griser som ble fôret med den høyeste dosen av E. coli K-88-antistoffer (4 kg/1000 kg barnehagefôr) sammenlignet med den laveste antistoffdosen (1 kg/1000 kg barnehagefôr).

Det ble konkludert med at fôring av smågriser med egg-avledede polyklonale antistoffer spesifikke for E. coli K-88 resulterer i signifikant forbedret vekstevne på en antistoffdoseavhengig måte. Produksjonsprosessen for egg-avledede polyklonale antistoffer rettet mot enterotoksigen E. coli er godkjent og validert av Canadian Center for Veterinary Biologics.

Avslutningsvis anses oral immunterapi med polyklonale antistoffer å ha en høy sikkerhetsprofil med lav sannsynlighet for bivirkninger. Hvis det viser seg å være effektivt som en anti-infeksjonsmetode, kan antibiotikaseleksjonstrykket reduseres, en nøkkelstrategi for å begrense antibiotikaresistens ved C. difficile-infeksjoner.

IM-01 er spraytørket eggepulverprodukt som inneholder polyklonale antistoffer -spesifikke for C. difficile-toksiner A og toksin B, pluss antistoffer mot C, difficile-sporer. En dose på 20 g/dag av IM-01 ble valgt basert på data fra en preklinisk dyrestudie, med bruk av smågriser for å behandle med C. difficile enteritis. med 0,6 g IM-01 oralt daglig i 4 dager.

På medfølende grunnlag, pasienter med bekreftet CDI klinisk diagnose med uformet diaré avføring, magekramper og en positiv avføringstest for tilstedeværelse av toksiner og/eller C. difficile i kultur, ble 106 pasienter (alder: 11-93 år) registrert for klinisk studie. Alle pasienter signerte skjemaer for informert samtykke for å delta i studien. Mengden av IM-01 antistoffpulverprodukt (10g eller 20g) administrert oralt daglig av hver pasient med 150 ml melk og fulgt i opptil 6 uker etter IM-01 immunterapi. Syttiseks pasienter fikk en oral dose på 20 g IM-01 og 30 pasienter fikk 10 g IM-01 pulver daglig i 10 påfølgende dager, som drikkbar terapi med melk eller sjokolademelk. Det primære endepunktet for studien var å utrydde C. difficile i avføringsprøver.

Av de 106 pasientene som ble behandlet med IM-01-behandling, viste 101 pasienter signifikant forbedring av kliniske symptomer med negative avføringstestresultater for CDI. Fem pasienter viste reduserte kliniske symptomer i løpet av IM-01-behandlingsperioden. Ingen tilbakefall ble observert med IM-01-behandling under oppfølgingsperioden. Ingen sikkerhetsproblemer ble rapportert.

Standard of care (SOC) antibiotika for behandling av CDI har observert respons på behandling, dvs. oppløsning av diaré og hjelpesymptomer/tegn hos 72-88 % av pasientene, og for de forsøkspersonene som oppnår oppløsning av CDI, ~16-24 % oppleve en gjentakelse av CDI innen en 8 ukers oppfølging. Ikke-responderere behandles med høyere doser vankomycin. dagsintervall. En minimal oppfølgingsperiode på 30 dager etter behandling har blitt brukt i nyere RCT-er av antimikrobielle midler. Andre forsøk har brukt flere tidspunkter, dvs. 8 uker eller 12 uker etter behandling. Derfor, i fravær av en standard for omsorgskontrollarm, vil de foregående responsratene for oppløsning av CDI-symptomer (~80%) og en tilbakefallsrate på 20% bli brukt som svarmal for denne studien. I fravær av randomisering av forsøkspersoner til en kontrollgruppe for antibiotikabehandling,