Behandling af mild-moderat Clostridium Difficile-infektion (CDI) (IM-01)

INTRODUKTION: BAGGRUNDSINFORMATION OG VIDENSKABELIGE RATIONALE Den øgede forekomst af antibiotikaresistente 'superbugs' har forstærket brugen af ​​bredspektrede antibiotika på verdensplan. En utilsigtet konsekvens af antimikrobiel behandling er forstyrrelse af gastrointestinal mikrobiota, hvilket resulterer i modtagelighed for opportunistiske patogener, såsom Clostridium difficile (C. difficile).

C. difficile er en gram-positiv, sporedannende, anaerob bakterie, der forårsager hospitals- og samfundserhvervede enteriske infektioner, hvilket resulterer i C. difficile-associeret diarré, pseudomembranøs colitis, colitis og død.

Clostridium difficile-infektion (CDI) er fortsat den dominerende årsag til sundhedspleje-associeret infektiøs diarré, hovedsageligt centreret på hospitaler, men også i samfundet med en hastighed på ~100/100.000 indbyggere og påvirker ældre uforholdsmæssigt. Antimikrobiel skade på tarmmikrobiomet kombineret med erhvervelse af sporer af C. difficile er hovedårsagen til patogenese. CDI er endemisk på hospitaler, og selv om infektionskontrolforanstaltninger har reduceret nosokomielle rater af CDI i Canada i løbet af de sidste 5 år, synes samfundstilfælde nu at være mere tydelige. Behandling af CDI anvender alternative antimikrobielle midler rettet mod patogenet, hovedsageligt metronidazol, vancomycin, eller fidaxomicin givet i anbefalet 10-14 dage. Mens flertallet reagerer på antibiotikabehandling, observeres efterfølgende tilbagefald af CDI hos 25-40 % af patienterne. Gentagelser af CDI behandles igen med de samme antibiotika, og på grund af det ikke-selektive aktivitetsspektrum af metronidazol og vancomycin, øges gentagelser i sandsynlighed for efterfølgende gentagelser. Fidaxomicin er relativt mere selektivt, og dets anvendelse er forbundet med reducerede gentagelser, men de høje omkostninger ved fidaxomicin har begrænset brugen.

C. difficile-infektion er en alvorlig diarrésygdom forbundet med betydelig sygelighed og dødelighed og er ansvarlig for hospitals- og samfundserhvervet diarré, pseudo-membranøs colitis colitis og død.

ImmuniMed Inc. har udviklet en oral immunterapi, der anvender æg-afledte polyklonale anti-C. difficile antistoffer (IM-01), som direkte retter sig mod virulensfaktorerne af C. difficile. IM-01 er fremstillet af hønseæg efter immunisering af æglæggende høner med C. difficile virulente antigener, C. difficile toksin A, toksin B, C. difficile hele celler og C. difficile sporer. IM-01 er i form af spraytørret hele æggepulver (blomme plus æggehvide indeholdende ovalbumin) og er meget stabil for funktionel aktivitet. Efter rekonstitution administreres IM-01 oralt, hvilket gør det muligt at nå til tarmens lumen, hvor C. difficile-toksiner udøver deres toksiske virkning. Derudover binder IM-01-antistoffer til C. difficile-toksiner og sporer og neutraliserer deres biologiske aktiviteter in vitro.

Brugen af ​​polyklonale antistoffer afledt af kyllingeæg (IgY) til at give passiv immunitet har fået opmærksomhed som en ny strategi for oral immunterapi som et alternativ til antibiotika til behandling af tarmpatogener, som forårsager diarré hos dyr og mennesker, herunder enterotoksigen E. coli, Salmonella spp, og både bovine og humane rotavirus. Sammenlignet med pattedyrsantistoffer (IgG) har kyllingeæg-afledte antistoffer (IgY) høj antigenspecificitet og aviditet, reagerer hurtigere på de samme antigener og adskiller sig fra pattedyrsantistoffer (IgG) i både strukturelle og immunologiske egenskaber. Sammenlignet med IgG , IgY er mere stabilt i tarmen ved pH 3,5 -11 og tolererer bedre enzymatisk nedbrydning af trypsin og chymotrypsin; stabiliteten af ​​IgY mod pepsin er pH-afhængig.

Immunimed har fastslået, at IgY polyklonale antistoffer, der er specifikke for E. coli i æggepulver indeholdende albumin, er funktionelt stabile, når de opbevares ved 2-8°C i over 10 år.

Dette gør IM-01-antistoffer attraktive til oral immunterapi, da æg er normale kostkomponenter uden kendte toksiske bivirkninger. IM-01 antistofferne er vist at binde til C. difficile toksiner og sporer samt at neutralisere deres biologiske aktiviteter in vitro.

Sammenlignet med aktiv vaccination, passiv immunterapi ved hjælp af IM-01 æg-afledt polyklonal anti-C. difficile antistoffer har fordele, herunder: (i) hurtig og lokal indtræden af ​​virkning, (ii) meget specifik aktivitet, (iii) anvendelighed til en bredere vifte af patienter fra børn til voksne, herunder immunkompromitterede patienter, (iv) strategisk kan anvendes til en specifik hændelse, når den opstår, i modsætning til en vaccinationsmodel, hvor store populationer skal behandles på forhånd og opretholde aktive antistoffer i lang tid, og (v) er en normal del af menneskets kost.

I en publiceret litteratur blev hamstere behandlet oralt med C. difficile anti-toksin A og anti-toksin B neutraliserende æg-afledte polyklonale antistoffer beskyttet efter C. difficile challenge. Hamstere behandlet med ægafledte antistoffer udviklede heller ikke tilbagefaldssygdom måneder efter behandlingen med antistoffer. .

Ydermere har æg-afledte polyklonale antistoffer adskillige fordele i forhold til de monoklonale antistoffer (MAb'er), da MAb'er generelt er specifikke for en enkelt epitop, når polyklonale antistoffer - en ny klasse af biofarmaceutiske midler, som har højere affiniteter for flere målantigener og kan genkende flere epitoper resulterer i overlegen styrke; da de kan genkende flere toksin-epitoper, da det er relevant for polymorfi af toksin A- og toksin B-generne i C. difficile.

En pattegriseundersøgelse blev udført for at demonstrere sikkerheden og den terapeutiske effekt af æg-afledte polyklonale antistoffer - specifikke for E. coli K-88, i husdyr. Det er blevet fastslået, at E. coli K88, der forårsager diarré hos smågrise ved at kolonisere i den nedre mave-tarmkanal hos pattegrise, forbedrer deres vækstpræstation efter behandling med E. coli K-88-specifikke antistoffer oralt. Ydermere blev den højeste vægtøgning opnået hos grise, der blev fodret med den højeste dosis af E. coli K-88-antistoffer (4 kg/1000 kg planteskolefoder) sammenlignet med den laveste antistofdosis (1 kg/1000 kg planteskolediæt).

Det blev konkluderet, at fodring af smågrise med æg-afledte polyklonale antistoffer, der er specifikke for E. coli K-88, resulterer i signifikant forbedret vækstpræstation på en antistofdosisafhængig måde. Fremstillingsprocessen for æg-afledte polyklonale antistoffer målrettet mod enterotoksigen E. coli er blevet godkendt og valideret af Canadian Center for Veterinary Biologics.

Som konklusion anses oral immunterapi med polyklonale antistoffer for at have en høj sikkerhedsprofil med lav sandsynlighed for bivirkninger. Hvis det viser sig at være effektivt som en anti-infektiøs tilgang, kan antibiotikaudvælgelsestrykket reduceres, en nøglestrategi til at begrænse antibiotikaresistens ved C. difficile-infektioner.

IM-01 er spraytørret æggepulverprodukt indeholdende polyklonale antistoffer -specifikke for C. difficile toksiner A og toksin B, plus antistoffer mod C, difficile sporer. En dosis på 20 g/dag af IM-01 blev udvalgt baseret på data fra et præklinisk dyreforsøg med brug af smågrise til at behandle med C. difficile enteritis. med 0,6 g IM-01 oralt dagligt i 4 dage.

På medfølende grunde, patienter med bekræftet CDI klinisk diagnose med uformet diarré afføring, mavekramper og en positiv afføringstest for tilstedeværelsen af ​​toksiner og/eller C. difficile i kultur, blev 106 patienter (alder: 11-93 år) indskrevet til klinisk undersøgelse. Alle patienter underskrev informeret samtykkeformularer for at deltage i undersøgelsen. Mængden af ​​IM-01 antistofpulverprodukt (10 g eller 20 g) administreret oralt dagligt af hver patient med 150 ml mælk og fulgt i op til 6 ugers periode efter IM-01 immunterapi. 76 patienter modtog en oral dosis på 20 g IM-01, og 30 patienter modtog 10 g IM-01 pulver dagligt i 10 på hinanden følgende dage, som drikkelig terapi med mælk eller chokolademælk. Studiets primære endepunkt var at udrydde C. difficile i afføringsprøver.

Ud af de 106 patienter, der blev behandlet med IM-01-terapi, viste 101 patienter signifikant forbedring af kliniske symptomer med negative afføringstestresultater for CDI. Fem patienter viste reducerede kliniske symptomer under IM-01-behandlingsperioden. Der blev ikke observeret noget tilbagefald med IM-01-behandling i opfølgningsperioden. Ingen sikkerhedsproblemer blev rapporteret.

Standard of care (SOC) antibiotika til behandling af CDI har observeret reaktioner på behandlingen, dvs. opløsning af diarré og tilhørende symptomer/tegn hos 72-88 % af forsøgspersonerne, og for de forsøgspersoner, der opnår opløsning af CDI, ~16-24 % opleve en gentagelse af CDI inden for en 8 ugers opfølgning. Ikke-respondere behandles med højere doser vancomycin. dag interval. En minimal opfølgningsperiode på 30 dage efter behandlingen er blevet brugt i de seneste RCT'er af antimikrobielle stoffer. Andre forsøg har brugt flere tidspunkter, dvs. 8 uger eller 12 uger efter behandling. Derfor, i mangel af en standardkontrolarm, vil ovenstående responsrater for opløsning af CDI-symptomer (~80%) og en gentagelsesrate på 20% blive brugt som svarskabelon for denne undersøgelse. I mangel af randomisering af forsøgspersoner til en kontrolgruppe for antibiotikabehandling,