Lievän tai keskivaikean Clostridium Difficile -infektion (CDI) hoito (IM-01)

JOHDANTO: TAUSTATIEDOT JA TIETEELLISET PERUSTELUT Antibioottiresistenttien "superbakteerien" lisääntynyt ilmaantuvuus on lisännyt laajakirjoisten antibioottien käyttöä maailmanlaajuisesti. Antimikrobisen hoidon ei-toivottu seuraus on ruoansulatuskanavan mikrobiotan hajoaminen, mikä johtaa alttiuteen opportunistisille patogeeneille, kuten Clostridium difficile (C. difficile).

C. difficile on grampositiivinen, itiöitä muodostava, anaerobinen bakteeri, joka aiheuttaa sairaalassa ja yhteisössä hankittuja suolistoinfektioita, jotka johtavat C. difficileen liittyvään ripuliin, pseudokalvontulehdukseen, paksusuolitulehdukseen ja kuolemaan.

Clostridium difficile -infektio (CDI) on edelleen yleisin terveydenhuoltoon liittyvän tarttuvan ripulin aiheuttaja, joka keskittyy pääasiassa sairaaloihin, mutta myös yhteisöön, noin 100/100 000 väestöstä ja vaikuttaa suhteettoman paljon vanhuksiin. Antimikrobinen vaurio suoliston mikrobiomissa yhdistettynä C. difficilen itiöiden hankkimiseen on patogeneesin pääasiallinen syy. CDI on endeeminen sairaaloissa, ja vaikka infektioiden hallintatoimenpiteet ovat vähentäneet CDI:n sairaalahoitoa Kanadassa viimeisen viiden vuoden aikana, yhteisötapaukset näyttävät nyt olevan ilmeisempiä. CDI:n hoidossa käytetään vaihtoehtoisia patogeeniin suunnattuja mikrobilääkkeitä, pääasiassa metronidatsolia, vankomysiiniä, tai fidaksomisiinia suositellaan 10-14 päivän ajan. Suurin osa potilaista reagoi antibioottihoitoon, mutta myöhempiä CDI:n uusiutumista havaitaan 25–40 %:lla potilaista. CDI-taudin uusiutumista hoidetaan samoilla antibiooteilla, ja metronidatsolin ja vankomysiinin ei-selektiivisen aktiivisuusspektrin vuoksi uusiutumisen todennäköisyys lisääntyy myöhempien uusiutumisen todennäköisyydessä. Fidaksomisiini on suhteellisen selektiivisempi ja sen käyttöön liittyy vähemmän uusiutumista, mutta fidaksomisiinin korkea hinta on rajoittanut käyttöä.

C. difficile -infektio on vakava ripulisairaus, johon liittyy huomattavaa sairastuvuutta ja kuolleisuutta ja joka on vastuussa sairaalassa ja yhteisössä hankitusta ripulista, pseudomembranoottisesta paksusuolitulehduksesta ja kuolemasta.

ImmuniMed Inc. on kehittänyt suun kautta annettavan immunoterapian, jossa käytetään munaperäisiä polyklonaalisia C. difficile -vasta-aineita (IM-01), joka kohdistuu suoraan C. difficilen virulenssitekijöihin. IM-01 tuotetaan kananmunista sen jälkeen, kun munivia kanoja on immunisoitu C. difficilen virulenttisilla antigeeneillä, C. difficile -toksiini A:lla, toksiini B:llä, C. difficilen kokonaissoluilla ja C. difficilen itiöillä. IM-01 on sumutuskuivatun kokomunajauheen muodossa (keltuainen ja munanvalkuainen, joka sisältää ovalbumiinia) ja on erittäin stabiili toiminnallisen toiminnan kannalta. Käyttövalmiiksi saattamisen jälkeen IM-01:tä annetaan suun kautta, jolloin se pääsee suolen luumeniin, jossa C. difficile -toksiinit aiheuttavat myrkyllisiä vaikutuksiaan. Lisäksi IM-01-vasta-aineet sitoutuvat C. difficile -toksiineihin ja -itiöihin ja neutraloivat niiden biologiset aktiivisuudet in vitro.

Kananmunista peräisin olevien polyklonaalisten vasta-aineiden (IgY) käyttö passiivisen immuniteetin aikaansaamiseksi on saanut huomiota uutena strategiana suun kautta annettavassa immunoterapiassa vaihtoehtona antibiooteille suoliston patogeenien hoidossa, jotka aiheuttavat ripulia eläimillä ja ihmisillä, mukaan lukien enterotoksigeeninen E. coli, Salmonella spp ja sekä naudan että ihmisen rotavirukset. Nisäkkään vasta-aineisiin (IgG) verrattuna kananmunaperäisillä vasta-aineilla (IgY) on korkea antigeenispesifisyys ja aviditeetti, ne reagoivat nopeammin samoihin antigeeneihin ja eroavat nisäkkään vasta-aineista (IgG) sekä rakenteellisten että immunologisten ominaisuuksien osalta. Verrattuna IgG:hen , IgY on stabiilimpi suolessa pH:ssa 3,5-11 ja sietää paremmin trypsiinin ja kymotrypsiinin aiheuttamaa entsymaattista hajoamista; IgY:n stabiilisuus pepsiiniä vastaan ​​on pH-riippuvainen.

Immunimed on todennut, että E. colille spesifiset IgY-polyklonaaliset vasta-aineet albumiinia sisältävässä munajauheessa ovat toiminnallisesti stabiileja, kun niitä säilytetään 2-8°C:ssa yli 10 vuoden ajan.

Tämä tekee IM-01-vasta-aineista houkuttelevia oraaliseen immunoterapiaan, koska munat ovat normaaleja ruokavalion komponentteja, joilla ei ole tunnettuja myrkyllisiä sivuvaikutuksia. IM-01-vasta-aineiden on osoitettu sitoutuvan C. difficile -toksiineihin ja -itiöihin sekä neutraloivan niiden biologisia aktiivisuuksia in vitro.

Verrattuna aktiiviseen rokotukseen, passiivinen immunoterapia käyttäen IM-01 munaperäistä polyklonaalista anti-C. difficile-vasta-aineilla on etuja, mukaan lukien: (i) nopea ja paikallinen vaikutuksen alkaminen, (ii) erittäin spesifinen aktiivisuus, (iii) soveltuvuus laajempaan potilaiden joukkoon lapsista aikuisiin, mukaan lukien immuunipuutteiset potilaat, (iv) niitä voidaan soveltaa strategisesti spesifinen tapahtuma, kun se tapahtuu, toisin kuin rokotusmallissa, jossa suuria populaatioita on hoidettava etukäteen ja niillä on säilytettävä aktiivisia vasta-aineita pitkään, ja (v) on normaali osa ihmisen ruokavaliota.

Julkaistussa kirjallisuudessa C. difficile anti-toksiini A:lla ja anti-toksiini B:tä neutraloivilla munaperäisillä polyklonaalisilla vasta-aineilla oraalisesti käsitellyt hamsterit suojattiin C. difficile -altistuksen jälkeen. Myöskään munaperäisillä vasta-aineilla hoidetuille hamstereille ei kehittynyt uusiutuvaa sairautta kuukausien vasta-ainehoidon jälkeen. .

Lisäksi munaperäisillä polyklonaalisilla vasta-aineilla on useita etuja monoklonaalisiin vasta-aineisiin (MAb:ihin) verrattuna, koska monoklonaaliset vasta-aineet ovat yleensä spesifisiä yhdelle epitoopille, kun polyklonaaliset vasta-aineet - uusi biofarmaseuttisten aineiden luokka, joilla on korkeampi affiniteetti useisiin kohdeantigeeneihin ja jotka voivat tunnistaa useita epitooppeja. tuloksena ylivoimainen teho; koska ne voivat tunnistaa useita toksiiniepitooppeja, koska se on relevanttia toksiini A- ja toksiini B -geenien polymorfismille C. difficilessä.

Porsastutkimus tehtiin E. coli K-88:lle spesifisten munaperäisten polyklonaalisten vasta-aineiden turvallisuuden ja terapeuttisen vaikutuksen osoittamiseksi tuotantoeläimillä. On todettu, että E. coli K88, joka aiheuttaa ripulia porsaille kolonisoitumalla porsaiden alempaan ruoansulatuskanavaan, parantaa niiden kasvukykyä E. coli K-88 -spesifisten vasta-aineiden suun kautta tapahtuvan käsittelyn jälkeen. Lisäksi saavutettiin suurin painonnousu. sioilla, joita ruokittiin suurimmalla annoksella E. coli K-88 -vasta-aineita (4 kg/1000 kg lastentarharuokavaliota) verrattuna pienimpään vasta-aineannokseen (1 kg / 1000 kg lastentarhan ruokavaliota).

Pääteltiin, että porsaiden ruokinta munaperäisillä polyklonaalisilla vasta-aineilla, jotka ovat spesifisiä E. coli K-88:lle, johtaa merkittävästi parantuneeseen kasvukykyyn vasta-aineannoksesta riippuvalla tavalla. Canadian Center for Veterinary Biologics on hyväksynyt ja validoinut enterotoksigeeniseen E. coliin kohdistettujen munaperäisten polyklonaalisten vasta-aineiden valmistusprosessin.

Yhteenvetona voidaan todeta, että polyklonaalisia vasta-aineita käyttävällä oraalisella immunoterapialla on korkea turvallisuusprofiili ja pieni haittavaikutusten todennäköisyys. Jos se osoittautuu tehokkaaksi infektioiden vastaisena lähestymistapana, antibioottien valintapainetta voitaisiin vähentää, mikä on keskeinen strategia antibioottiresistenssin rajoittamiseksi C. difficile -infektioissa.

IM-01 on sumutuskuivattu munajauhetuote, joka sisältää polyklonaalisia vasta-aineita -spesifisiä C. difficile -toksiineille A ja toksiini B sekä vasta-aineita C, difficile -itiöille. IM-01:n annos 20 g/vrk valittiin prekliinisen eläintutkimuksen tulosten perusteella, joissa käytettiin porsaita C. difficile enteritis -taudin hoitoon. 0,6 g IM-01:tä suun kautta päivittäin 4 päivän ajan.

Potilaat, joilla oli varmistettu kliininen CDI-diagnoosi, joilla oli muotoutumaton ripuli uloste, vatsakramppeja ja positiivinen ulostetesti toksiinien ja/tai C. difficilen esiintymisen suhteen viljelmässä, otettiin myötätuntoisesti mukaan 106 potilasta (ikä: 11-93 vuotta). kliininen tutkimus. Kaikki potilaat allekirjoittivat tietoisen suostumuslomakkeen osallistuakseen tutkimukseen. IM-01-vasta-ainejauhetuotteen määrä (10 g tai 20 g), jonka jokainen potilas antaa suun kautta päivittäin 150 ml:n kanssa maitoa ja jota seurattiin enintään 6 viikon ajan IM-01-immunoterapian jälkeen. Seitsemänkymmentäkuusi potilasta sai suun kautta annoksen 20 g IM-01:tä ja 30 potilasta sai 10 g IM-01-jauhetta päivittäin 10 peräkkäisenä päivänä juomakelpoisena hoitona maidon tai suklaamaidon kanssa. Tutkimuksen ensisijainen päätetapahtuma oli C. difficilen hävittäminen ulostenäytteistä.

IM-01-hoidolla hoidetuista 106 potilaasta 101 potilaalla havaittiin merkittävää kliinisten oireiden paranemista negatiivisilla CDI-ulostetesteillä. Viidellä potilaalla kliiniset oireet vähenivät IM-01-hoitojakson aikana. IM-01-hoidolla ei havaittu uusiutumista seurantajakson aikana. Turvallisuushuolia ei raportoitu.

Standard of care (SOC) -antibiootit CDI:n hoidossa ovat havainneet hoitovasteita eli ripulin ja oheisoireiden/oireiden häviämistä 72–88 %:lla potilaista, ja niillä potilailla, jotka saavuttavat CDI:n paranemisen, ~16-24 %. kokea CDI:n uusiutumisen 8 viikon seurannassa. Reagoimattomia hoidetaan suuremmilla vankomysiiniannoksilla. päivän väli. Viimeaikaisissa mikrobilääkkeiden RCT-tutkimuksissa on käytetty hoidon jälkeistä vähimmäisseurantajaksoa, joka on 30 päivää. Muissa kokeissa on käytetty useita aikapisteitä eli 8 viikkoa tai 12 viikkoa hoidon jälkeen. Siksi, jos standardinmukaista hoitokontrolliryhmää ei ole, tämän tutkimuksen vastemallina käytetään edellä esitettyjä vastemääriä CDI-oireiden ratkaisemiseksi (~80 %) ja 20 %:n uusiutumisprosenttia. Jos koehenkilöitä ei ole satunnaistettu antibioottihoidon kontrolliryhmään,