Trattamento dell'infezione da Clostridium Difficile lieve-moderata (CDI) (IM-01)

INTRODUZIONE: INFORMAZIONI DI BASE E RAZIONALE SCIENTIFICO L'aumento dell'incidenza di "superbatteri" resistenti agli antibiotici ha amplificato l'uso di antibiotici ad ampio spettro in tutto il mondo. Una conseguenza non intenzionale del trattamento antimicrobico è l'interruzione del microbiota gastrointestinale, con conseguente suscettibilità ai patogeni opportunisti, come il Clostridium difficile (C. difficile).

C. difficile è un batterio gram-positivo, sporigeno, anaerobico che provoca infezioni enteriche acquisite in ospedale e in comunità, con conseguente diarrea, colite pseudo membranosa, colite e morte associate a C. difficile.

L'infezione da Clostridium difficile (CDI) rimane la causa predominante di diarrea infettiva associata all'assistenza sanitaria, concentrata principalmente negli ospedali ma anche nella comunità con un tasso di ~ 100/100.000 abitanti e che colpisce in modo sproporzionato gli anziani. Il danno antimicrobico al microbioma intestinale combinato con l'acquisizione di spore di C. difficile è la principale causa di patogenesi. La CDI è endemica negli ospedali e, sebbene le misure di controllo delle infezioni abbiano ridotto i tassi nosocomiali di CDI in Canada negli ultimi 5 anni, i casi di comunità ora sembrano essere più evidenti. Il trattamento della CDI utilizza antimicrobici alternativi diretti contro l'agente patogeno, principalmente metronidazolo, vancomicina, o fidaxomicina somministrata per un periodo consigliato di 10-14 giorni. Mentre la maggior parte risponde al trattamento antibiotico, si osservano successive recidive di CDI nel 25-40% dei pazienti. Le recidive di CDI vengono ritrattate con gli stessi antibiotici e, a causa dello spettro di attività non selettivo del metronidazolo e della vancomicina, le probabilità di recidiva sono in aumento per successive recidive. La fidaxomicina è relativamente più selettiva e il suo uso è associato a recidive ridotte, ma l'alto costo della fidaxomicina ne ha limitato l'uso.

L'infezione da C. difficile è una grave malattia diarroica associata a sostanziale morbilità e mortalità ed è responsabile di diarrea acquisita in ospedale e in comunità, colite pseudo membranosa e morte.

ImmuniMed Inc. ha sviluppato un'immunoterapia orale utilizzando anticorpi policlonali anti-C. difficile derivati ​​dalle uova (IM-01), che agiscono direttamente sui fattori di virulenza di C. difficile. IM-01 è prodotto da uova di gallina in seguito all'immunizzazione di galline ovaiole con antigeni virulenti di C. difficile, tossina A di C. difficile, tossina B, cellule intere di C. difficile e spore di C. difficile. IM-01 è sotto forma di uovo intero in polvere essiccato a spruzzo (tuorlo più albume contenente ovoalbumina) ed è molto stabile per l'attività funzionale. Dopo la ricostituzione, IM-01 viene somministrato per via orale, il che gli consente di raggiungere il lume intestinale, dove le tossine di C. difficile esercitano i loro effetti tossici. Inoltre, gli anticorpi IM-01 si legano alle tossine e alle spore di C. difficile e neutralizzano le loro attività biologiche in vitro.

L'uso di anticorpi policlonali derivati ​​da uova di gallina (IgY) per conferire immunità passiva ha attirato l'attenzione come nuova strategia per l'immunoterapia orale come alternativa agli antibiotici per il trattamento di agenti patogeni intestinali che causano diarrea negli animali e nell'uomo, tra cui E. coli enterotossico, Salmonella spp e rotavirus sia bovini che umani. Rispetto agli anticorpi dei mammiferi (IgG), gli anticorpi derivati ​​dalle uova di gallina (IgY) hanno un'elevata specificità e avidità antigenica, reagiscono più rapidamente agli stessi antigeni e differiscono dagli anticorpi dei mammiferi (IgG) sia per le proprietà strutturali che immunologiche. Rispetto alle IgG , IgY è più stabile nell'intestino a pH 3,5 -11 e tollera meglio la degradazione enzimatica da parte di tripsina e chimotripsina; la stabilità delle IgY contro la pepsina dipende dal pH.

Immunimed ha determinato che gli anticorpi policlonali IgY specifici per E. coli nell'uovo in polvere contenente albumina sono funzionalmente stabili se conservati a 2-8°C per oltre 10 anni.

Ciò rende gli anticorpi IM-01 attraenti per l'immunoterapia orale poiché le uova sono normali componenti della dieta, senza effetti collaterali tossici noti. È stato dimostrato che gli anticorpi IM-01 si legano alle tossine e alle spore di C. difficile e neutralizzano le loro attività biologiche in vitro.

Rispetto alla vaccinazione attiva, l'immunoterapia passiva utilizzando l'anti-C policlonale IM-01 derivato dall'uovo. difficile presenta vantaggi tra cui: (i) insorgenza d'azione rapida e locale, (ii) attività altamente specifica, (iii) applicabilità a una gamma più ampia di pazienti, dai bambini agli adulti, compresi i pazienti immunocompromessi, (iv) strategicamente può essere applicato per un evento specifico quando si verifica, in contrasto con un modello di vaccinazione in cui grandi popolazioni devono essere trattate in anticipo e mantenere anticorpi attivi per lunghe durate, e (v) è una parte normale della dieta umana.

In una letteratura pubblicata, i criceti trattati per via orale con anticorpi policlonali derivati ​​dall'uovo neutralizzanti anti-tossina A e anti-tossina B di C. difficile sono stati protetti dopo la sfida con C. difficile. Inoltre, i criceti trattati con anticorpi derivati ​​dalle uova non hanno sviluppato una malattia recidivante mesi dopo il trattamento con anticorpi. .

Inoltre, gli anticorpi policlonali derivati ​​dall'uovo presentano numerosi vantaggi rispetto agli anticorpi monoclonali (MAb), poiché i MAb sono generalmente specifici per un singolo epitopo, quando gli anticorpi policlonali - una nuova classe di biofarmaci, che hanno affinità più elevate per più antigeni bersaglio e possono riconoscere più epitopi con conseguente potenza superiore; poiché possono riconoscere più epitopi di tossine in quanto è rilevante per il polimorfismo dei geni della tossina A e della tossina B in C. difficile.

È stato eseguito uno studio sui suinetti per dimostrare la sicurezza e l'effetto terapeutico degli anticorpi policlonali derivati ​​dalle uova, specifici per E. coli K-88, negli animali da allevamento. È stato stabilito che E. coli K88, che causa la diarrea nei suinetti colonizzando il tratto gastrointestinale inferiore dei suinetti, migliora le loro prestazioni di crescita dopo il trattamento con anticorpi specifici per E. coli K-88 per via orale. Inoltre, è stato raggiunto il più alto aumento di peso corporeo nei suini alimentati con il più alto dosaggio di anticorpi E. coli K-88 (4 kg/1000 kg di alimentazione in svezzamento) rispetto al dosaggio più basso di anticorpi (1 kg/1000 kg di alimentazione in svezzamento).

Si è concluso che l'alimentazione dei suinetti con anticorpi policlonali derivati ​​dall'uovo specifici per E. coli K-88 comporta un miglioramento significativo delle prestazioni di crescita in modo dipendente dalla dose di anticorpi. Il processo di produzione degli anticorpi policlonali derivati ​​dalle uova mirati all'E. coli enterotossigeno è stato approvato e convalidato dal Canadian Centre for Veterinary Biologics.

In conclusione, si ritiene che l'immunoterapia orale con anticorpi policlonali abbia un elevato profilo di sicurezza con una bassa probabilità di effetti avversi. Se dimostrato di essere efficace come approccio anti-infettivo, la pressione selettiva degli antibiotici potrebbe essere ridotta, una strategia chiave per limitare la resistenza agli antibiotici nelle infezioni da C. difficile.

IM-01 è un prodotto in polvere d'uovo essiccato a spruzzo contenente anticorpi policlonali specifici per le tossine A e la tossina B di C. difficile, più anticorpi per le spore di C. difficile. È stato selezionato un dosaggio di 20 g/giorno di IM-01 sulla base di dati di uno studio preclinico su animali, utilizzando suinetti per il trattamento dell'enterite da C. difficile. con 0,6 g di IM-01 per via orale al giorno per 4 giorni.

Per motivi compassionevoli, i pazienti con diagnosi clinica confermata di CDI con feci diarroiche non formate, crampi addominali e un test delle feci positivo per la presenza di tossine e/o C. difficile in coltura, 106 pazienti (età: 11-93 anni) sono stati arruolati per il studio clinico. Tutti i pazienti hanno firmato moduli di consenso informato per partecipare allo studio. La quantità di anticorpo in polvere IM-01 (10 g o 20 g) somministrata per via orale giornalmente da ciascun paziente con 150 mL di latte e seguita per un periodo massimo di 6 settimane dopo l'immunoterapia IM-01. Settantasei pazienti hanno ricevuto una dose orale di 20 g di IM-01 e 30 pazienti hanno ricevuto 10 g di IM-01 in polvere al giorno per 10 giorni consecutivi, come terapia bevibile con latte o latte al cioccolato. L'endpoint primario dello studio era l'eradicazione di C. difficile nei campioni di feci.

Dei 106 pazienti trattati con la terapia IM-01, 101 pazienti hanno mostrato un miglioramento significativo dei sintomi clinici con risultati negativi al test delle feci per CDI. Cinque pazienti hanno mostrato una riduzione dei sintomi clinici durante il periodo di trattamento con IM-01. Nessuna recidiva è stata osservata con la terapia IM-01 durante il periodo di follow-up. Non sono stati segnalati problemi di sicurezza.

Gli antibiotici standard di cura (SOC) per il trattamento della CDI hanno osservato risposte al trattamento, vale a dire la risoluzione della diarrea e dei sintomi/segni accessori nel 72-88% dei soggetti e per quei soggetti che raggiungono la risoluzione della CDI, ~ 16-24% sperimentare una recidiva di CDI entro un follow-up di 8 settimane. I non-responder sono trattati con dosaggi più elevati di vancomicina. intervallo di giorni. In recenti RCT sugli antimicrobici è stato utilizzato un periodo minimo di follow-up post-trattamento di 30 giorni. Altri studi hanno utilizzato diversi punti temporali, ad esempio 8 settimane o 12 settimane dopo il trattamento. Pertanto, in assenza di un braccio di controllo standard di cura, i precedenti tassi di risposta per la risoluzione dei sintomi CDI (~ 80%) e un tasso di recidiva del 20% verranno utilizzati come modello di risposta per questo studio. In assenza di randomizzazione dei soggetti a un gruppo di controllo del trattamento antibiotico,