Behandlung einer leichten bis mittelschweren Clostridium-difficile-Infektion (CDI) (IM-01)

EINFÜHRUNG: HINTERGRUNDINFORMATIONEN UND WISSENSCHAFTLICHE BEGRÜNDUNG Das zunehmende Auftreten antibiotikaresistenter „Superbugs“ hat den Einsatz von Breitbandantibiotika weltweit verstärkt. Eine unbeabsichtigte Folge der antimikrobiellen Behandlung ist die Störung der gastrointestinalen Mikrobiota, was zu einer Anfälligkeit für opportunistische Pathogene wie Clostridium difficile (C. schwierig).

C. difficile ist ein grampositives, sporenbildendes, anaerobes Bakterium, das im Krankenhaus und ambulant erworbene Darminfektionen verursacht, die zu C. difficile-assoziierter Diarrhoe, pseudomembranöser Kolitis, Kolitis und Tod führen.

Die Clostridium-difficile-Infektion (CDI) bleibt die vorherrschende Ursache für mit dem Gesundheitswesen verbundene infektiöse Diarrhoe, die hauptsächlich in Krankenhäusern, aber auch in der Gemeinde mit einer Rate von etwa 100/100.000 Einwohnern auftritt und ältere Menschen überproportional betrifft. Die antimikrobielle Schädigung des Darmmikrobioms in Kombination mit der Aufnahme von Sporen von C. difficile ist die Hauptursache der Pathogenese. CDI ist in Krankenhäusern endemisch, und obwohl Maßnahmen zur Infektionskontrolle die nosokomialen Raten von CDI in Kanada in den letzten 5 Jahren reduziert haben, scheinen Fälle in der Gemeinschaft jetzt offensichtlicher zu sein. Die Behandlung von CDI verwendet alternative antimikrobielle Mittel, die auf den Erreger gerichtet sind, hauptsächlich Metronidazol, Vancomycin, oder Fidaxomicin für empfohlene 10-14 Tage. Während die Mehrheit auf eine Antibiotikabehandlung anspricht, werden spätere Rezidive von CDI bei 25-40 % der Patienten beobachtet. Rezidive von CDI werden mit den gleichen Antibiotika behandelt, und aufgrund des nicht selektiven Wirkungsspektrums von Metronidazol und Vancomycin steigt die Wahrscheinlichkeit von Rezidiven für nachfolgende Rezidive. Fidaxomicin ist relativ selektiver und seine Verwendung ist mit weniger Rezidiven verbunden, aber die hohen Kosten von Fidaxomicin haben die Verwendung eingeschränkt.

C. difficile-Infektion ist eine schwere Durchfallerkrankung, die mit erheblicher Morbidität und Mortalität einhergeht und für im Krankenhaus und ambulant erworbene Diarrhoe, pseudomembranöse Kolitis, Kolitis und Tod verantwortlich ist.

ImmuniMed Inc. hat eine orale Immuntherapie unter Verwendung von polyklonalen Anti-C.-difficile-Antikörpern (IM-01) aus Eiern entwickelt, die direkt auf die Virulenzfaktoren von C. difficile abzielt. IM-01 wird aus Hühnereiern nach der Immunisierung von Legehennen mit virulenten Antigenen von C. difficile, Toxin A von C. difficile, Toxin B, ganzen Zellen von C. difficile und Sporen von C. difficile hergestellt. IM-01 liegt in Form von sprühgetrocknetem Volleipulver (Eigelb plus Eiweiß mit Ovalbumin) vor und ist für funktionelle Aktivitäten sehr stabil. Nach der Rekonstitution wird IM-01 oral verabreicht, wodurch es das Darmlumen erreichen kann, wo C. difficile-Toxine ihre toxischen Wirkungen entfalten. Darüber hinaus binden IM-01-Antikörper an C. difficile-Toxine und -Sporen und neutralisieren deren biologische Aktivitäten in vitro.

Die Verwendung von polyklonalen Antikörpern aus Hühnereiern (IgY) zur Verleihung einer passiven Immunität hat als neuartige Strategie für die orale Immuntherapie als Alternative zu Antibiotika zur Behandlung von Darmpathogenen, die bei Tieren und Menschen Durchfall verursachen, einschließlich enterotoxigener E. coli, Aufmerksamkeit erregt. Salmonella spp. und sowohl Rinder- als auch menschliche Rotaviren. Im Vergleich zu Säugetier-Antikörpern (IgG) haben aus Hühnerei gewonnene Antikörper (IgY) eine hohe Antigen-Spezifität und Avidität, reagieren schneller auf die gleichen Antigene und unterscheiden sich von Säugetier-Antikörpern (IgG) sowohl in strukturellen als auch in immunologischen Eigenschaften. Im Vergleich zu IgG , IgY ist im Darm bei pH 3,5–11 stabiler und toleriert den enzymatischen Abbau durch Trypsin und Chymotrypsin besser; die Stabilität von IgY gegenüber Pepsin ist pH-abhängig.

Immunimed hat festgestellt, dass polyklonale IgY-Antikörper, die spezifisch für E. coli in albuminhaltigem Eipulver sind, funktionell stabil sind, wenn sie über 10 Jahre bei 2-8 °C gelagert werden.

Dies macht IM-01-Antikörper attraktiv für die orale Immuntherapie, da Eier normale Nahrungsbestandteile ohne bekannte toxische Nebenwirkungen sind. Es wurde gezeigt, dass die IM-01-Antikörper an C. difficile-Toxine und -Sporen binden und deren biologische Aktivitäten in vitro neutralisieren.

Verglichen mit der aktiven Impfung ist die passive Immuntherapie mit IM-01-Ei-abgeleitetem polyklonalem Anti-C. difficile-Antikörper hat Vorteile einschließlich: (i) schneller und lokaler Wirkungseintritt, (ii) hochspezifische Aktivität, (iii) Anwendbarkeit auf ein breiteres Spektrum von Patienten von Kindern bis zu Erwachsenen, einschließlich immungeschwächter Patienten, (iv) kann strategisch angewendet werden für a spezifisches Ereignis, wenn es auftritt, im Gegensatz zu einem Impfmodell, bei dem große Populationen im Voraus behandelt werden müssen und aktive Antikörper für lange Zeit aufrechterhalten müssen, und (v) ein normaler Bestandteil der menschlichen Ernährung ist.

In einer veröffentlichten Literatur wurden Hamster, die oral mit C. difficile Anti-Toxin A und Anti-Toxin B behandelt wurden, die aus Eiern stammende polyklonale Antikörper neutralisieren, nach C. difficile-Challenge geschützt. Außerdem entwickelten Hamster, die mit aus Eiern stammenden Antikörpern behandelt wurden, Monate nach der Behandlung mit Antikörpern keine rezidivierende Krankheit. .

Darüber hinaus haben aus Eiern stammende polyklonale Antikörper mehrere Vorteile gegenüber den monoklonalen Antikörpern (MAbs), da MAbs im Allgemeinen spezifisch für einzelne Epitope sind, wenn polyklonale Antikörper eine neue Klasse von Biopharmazeutika sind, die höhere Affinitäten für mehrere Zielantigene haben und mehrere Epitope erkennen können was zu einer überlegenen Potenz führt; da sie mehrere Toxin-Epitope erkennen können, da dies für den Polymorphismus der Toxin-A- und Toxin-B-Gene in C. difficile relevant ist.

Eine Ferkelstudie wurde durchgeführt, um die Sicherheit und therapeutische Wirkung von aus Eiern stammenden polyklonalen Antikörpern – spezifisch für E. coli K-88 – bei Nutztieren zu demonstrieren. Es wurde festgestellt, dass E. coli K88, die bei Ferkeln Durchfall verursachen, indem sie sich im unteren Magen-Darm-Trakt von Ferkeln ansiedeln, ihre Wachstumsleistung nach oraler Behandlung mit E. coli K-88-spezifischen Antikörpern verbessern. Außerdem wurde die höchste Körpergewichtszunahme erzielt bei Schweinen, die mit der höchsten Dosis an E. coli K-88-Antikörpern (4 kg/1000 kg Aufzuchtfutter) im Vergleich zur niedrigsten Antikörperdosis (1 kg/1000 kg Aufzuchtfutter) gefüttert wurden.

Es wurde der Schluss gezogen, dass die Fütterung von Ferkeln mit aus Eiern stammenden polyklonalen Antikörpern, die spezifisch für E. coli K-88 sind, zu einer signifikant verbesserten Wachstumsleistung in Abhängigkeit von der Antikörperdosis führt. Das Herstellungsverfahren für aus Ei gewonnene polyklonale Antikörper, die gegen enterotoxigene E. coli gerichtet sind, wurde vom Canadian Centre for Veterinary Biologics zugelassen und validiert.

Zusammenfassend wird davon ausgegangen, dass die orale Immuntherapie mit polyklonalen Antikörpern ein hohes Sicherheitsprofil mit einer geringen Wahrscheinlichkeit von Nebenwirkungen aufweist. Wenn es sich als wirksamer antiinfektiöser Ansatz erweist, könnte der Selektionsdruck auf Antibiotika reduziert werden, eine Schlüsselstrategie zur Begrenzung der Antibiotikaresistenz bei C.-difficile-Infektionen.

IM-01 ist ein sprühgetrocknetes Eipulverprodukt, das polyklonale Antikörper enthält, die spezifisch für C. difficile-Toxin A und Toxin B sind, sowie Antikörper gegen C. difficile-Sporen. Eine Dosierung von 20 g/Tag von IM-01 wurde basierend auf den Daten einer vorklinischen Tierstudie ausgewählt, bei der Ferkel zur Behandlung der C.-difficile-Enteritis-Krankheit verwendet wurden mit 0,6 g IM-01 oral täglich für 4 Tage.

Aus Härtegründen wurden 106 Patienten (Alter: 11–93 Jahre) für Patienten mit bestätigter klinischer CDI-Diagnose mit ungeformten Durchfallstühlen, Bauchkrämpfen und einem positiven Stuhltest auf das Vorhandensein von Toxinen und/oder C. difficile in der Kultur aufgenommen klinische Studie. Alle Patienten unterzeichneten Einverständniserklärungen zur Teilnahme an der Studie. Die Menge des IM-01-Antikörper-Pulverprodukts (10 g oder 20 g), die von jedem Patienten täglich oral mit 150 ml Milch verabreicht und für einen Zeitraum von bis zu 6 Wochen nach der IM-01-Immuntherapie beobachtet wird. 76 Patienten erhielten eine orale Dosis von 20 g IM-01 und 30 Patienten erhielten 10 g IM-01-Pulver täglich an 10 aufeinanderfolgenden Tagen als trinkbare Therapie mit Milch oder Schokoladenmilch. Der primäre Endpunkt der Studie war die Eradikation von C. difficile in Stuhlproben.

Von den 106 Patienten, die mit der IM-01-Therapie behandelt wurden, zeigten 101 Patienten eine signifikante Verbesserung der klinischen Symptome mit negativen Stuhltestergebnissen für CDI. Fünf Patienten zeigten während der Behandlung mit IM-01 eine Verringerung der klinischen Symptome. Während der Nachbeobachtungszeit wurde unter der IM-01-Therapie kein Wiederauftreten beobachtet. Es wurden keine Sicherheitsbedenken gemeldet.

Standard-of-Care (SOC)-Antibiotika zur Behandlung von CDI haben bei 72–88 % der Patienten ein Ansprechen auf die Behandlung beobachtet, d. ein Wiederauftreten von CDI innerhalb einer 8-wöchigen Nachsorge erleiden. Non-Responder werden mit höheren Dosen von Vancomycin behandelt. Tagesintervall. In jüngsten RCTs zu antimikrobiellen Mitteln wurde eine minimale Nachbeobachtungszeit von 30 Tagen nach der Behandlung verwendet. Andere Studien haben mehrere Zeitpunkte verwendet, d. h. 8 Wochen oder 12 Wochen nach der Behandlung. Daher werden in Ermangelung eines Behandlungsstandard-Kontrollarms die vorstehenden Ansprechraten für die Auflösung von CDI-Symptomen (~80 %) und eine Rezidivrate von 20 % als Ansprechvorlage für diese Studie verwendet. In Ermangelung einer Randomisierung von Probanden zu einer Kontrollgruppe mit Antibiotikabehandlung,