Behandeling van milde tot matige Clostridium Difficile-infectie (CDI) (IM-01)

INLEIDING: ACHTERGRONDINFORMATIE EN WETENSCHAPPELIJKE RATIONALE De toegenomen incidentie van antibioticaresistente 'superbugs' heeft het gebruik van breedspectrumantibiotica wereldwijd versterkt. Een onbedoeld gevolg van antimicrobiële behandeling is verstoring van de gastro-intestinale microbiota, wat resulteert in gevoeligheid voor opportunistische pathogenen, zoals Clostridium difficile (C. moeilijk).

C. difficile is een grampositieve, sporenvormende, anaerobe bacterie die ziekenhuis- en gemeenschapsinfecties veroorzaakt, resulterend in C. difficile-geassocieerde diarree, pseudomembraneuze colitis, colitis en overlijden.

Clostridium difficile-infectie (CDI) blijft de belangrijkste oorzaak van aan de gezondheidszorg gerelateerde infectieuze diarree, voornamelijk gecentreerd in ziekenhuizen maar ook in de gemeenschap met een snelheid van ~ 100/100.000 inwoners en treft ouderen onevenredig. Antimicrobiële schade aan het darmmicrobioom in combinatie met de verwerving van sporen van C. difficile is de belangrijkste oorzaak van pathogenese. CDI is endemisch in ziekenhuizen, en hoewel maatregelen voor infectiebeheersing de afgelopen 5 jaar de nosocomiale aantallen CDI in Canada hebben verlaagd, lijken er nu meer gevallen in de gemeenschap te zijn. of fidaxomicine gedurende een aanbevolen periode van 10-14 dagen. Hoewel de meerderheid reageert op behandeling met antibiotica, worden latere recidieven van CDI waargenomen bij 25-40% van de patiënten. Recidieven van CDI worden behandeld met dezelfde antibiotica en vanwege het niet-selectieve werkingsspectrum van metronidazol en vancomycine neemt de kans op recidieven toe. Fidaxomicine is relatief selectiever en het gebruik ervan gaat gepaard met minder recidieven, maar de hoge kosten van fidaxomicine hebben het gebruik beperkt.

C. difficile-infectie is een ernstige diarreeziekte die gepaard gaat met aanzienlijke morbiditeit en mortaliteit en is verantwoordelijk voor ziekenhuis- en buiten het ziekenhuis opgelopen diarree, pseudomembraneuze colitis, colitis en overlijden.

ImmuniMed Inc. heeft een orale immunotherapie ontwikkeld met behulp van van eieren afgeleide anti-C. difficile polyklonale antilichamen (IM-01), die zich rechtstreeks richten op de virulentiefactoren van C. difficile. IM-01 wordt geproduceerd uit kippeneieren na de immunisatie van leghennen met C. difficile virulente antigenen, C. difficile toxine A, toxine B, C. difficile hele cellen en C. difficile sporen. IM-01 is in de vorm van gesproeidroogd heeleipoeder (dooier plus eiwit dat ovalbumine bevat) en is zeer stabiel voor functionele activiteit. Na reconstitutie wordt IM-01 oraal toegediend, waardoor het het darmlumen kan bereiken, waar C. difficile-toxinen hun toxische effecten uitoefenen. Bovendien binden IM-01-antilichamen zich aan C. difficile-toxinen en -sporen en neutraliseren hun biologische activiteiten in vitro.

Het gebruik van polyklonale antilichamen die zijn afgeleid van kippeneieren (IgY) om passieve immuniteit te verlenen, heeft aandacht gekregen als een nieuwe strategie voor orale immunotherapie als alternatief voor antibiotica voor de behandeling van darmpathogenen die diarree veroorzaken bij dieren en mensen, waaronder enterotoxigene E. coli, Salmonella spp, en rotavirussen van zowel runderen als mensen. Vergeleken met zoogdierantilichamen (IgG) hebben van kippenei afgeleide antilichamen (IgY) een hoge antigeenspecificiteit en aviditeit, reageren sneller op dezelfde antigenen en verschillen van zoogdierantilichamen (IgG) in zowel structurele als immunologische eigenschappen. Vergeleken met IgG , IgY is stabieler in de darm bij pH 3,5 -11 en verdraagt ​​beter enzymatische afbraak door trypsine en chymotrypsine; de stabiliteit van IgY tegen pepsine is pH-afhankelijk.

Immunimed heeft vastgesteld dat IgY-polyklonale antilichamen die specifiek zijn voor E. coli in eipoeder dat albumine bevat, functioneel stabiel zijn wanneer ze meer dan 10 jaar bij 2-8 °C worden bewaard.

Dit maakt IM-01-antilichamen aantrekkelijk voor orale immunotherapie, aangezien eieren normale voedingscomponenten zijn, zonder bekende toxische bijwerkingen. Van de IM-01-antilichamen is aangetoond dat ze zich binden met C. difficile-toxinen en -sporen en hun biologische activiteiten in vitro neutraliseren.

Vergeleken met actieve vaccinatie, passieve immunotherapie met behulp van IM-01 ei-afgeleide polyklonale anti-C. difficile-antilichamen hebben voordelen, waaronder: (i) snelle en lokale werking, (ii) zeer specifieke activiteit, (iii) toepasbaarheid op een breder scala van patiënten, van kinderen tot volwassenen, inclusief immuungecompromitteerde patiënten, (iv) kunnen strategisch worden toegepast voor een specifieke gebeurtenis wanneer het zich voordoet, in tegenstelling tot een vaccinatiemodel waarbij grote populaties vooraf moeten worden behandeld en gedurende lange tijd actieve antilichamen moeten aanhouden, en (v) een normaal onderdeel is van het menselijke dieet.

In een gepubliceerde literatuur werden hamsters die oraal werden behandeld met C. difficile anti-toxine A en anti-toxine B neutraliserende, van eieren afkomstige polyklonale antilichamen beschermd na C. difficile provocatie. Ook ontwikkelden hamsters die werden behandeld met van eieren afkomstige antilichamen maanden na de behandeling met antilichamen geen recidiverende ziekte. .

Bovendien hebben van eieren afgeleide polyklonale antilichamen verschillende voordelen ten opzichte van de monoklonale antilichamen (MAb's), aangezien MAb's over het algemeen specifiek zijn voor een enkel epitoop, wanneer polyklonale antilichamen - een nieuwe klasse van biofarmaceutica, die hogere affiniteiten hebben voor meerdere doelantigenen en meerdere epitopen kunnen herkennen. resulterend in superieure potentie; omdat ze meerdere toxine-epitopen kunnen herkennen, aangezien dit relevant is voor polymorfisme van de toxine A- en toxine B-genen in C. difficile.

Er werd een biggenstudie uitgevoerd om de veiligheid en het therapeutische effect van van eieren afgeleide polyklonale antilichamen - specifiek voor E. coli K-88, bij landbouwhuisdieren aan te tonen. Er is vastgesteld dat E. coli K88, die diarree bij biggen veroorzaakt door kolonisatie in het onderste deel van het maagdarmkanaal van biggen, hun groeiprestaties verbetert na orale behandeling met E. coli K-88-specifieke antilichamen. Bovendien werd de grootste toename van het lichaamsgewicht bereikt bij varkens die werden gevoerd met de hoogste dosering E. coli K-88-antilichamen (4 kg/1000 kg kweekvoer) in vergelijking met de laagste dosering antilichamen (1 kg/1000 kg kweekvoer).

Er werd geconcludeerd dat het voeren van biggen met van eieren afkomstige polyklonale antilichamen die specifiek zijn voor E. coli K-88, resulteert in significant verbeterde groeiprestaties op een antilichaamdosisafhankelijke manier. Het fabricageproces voor van eieren afgeleide polyklonale antilichamen gericht tegen enterotoxigene E. coli is goedgekeurd en gevalideerd door het Canadian Centre for Veterinary Biologics.

Concluderend wordt aangenomen dat orale immunotherapie met behulp van polyklonale antilichamen een hoog veiligheidsprofiel heeft met een lage kans op bijwerkingen. Indien bewezen effectief is als anti-infectieuze benadering, kan de antibioticaselectiedruk worden verminderd, een belangrijke strategie om antibioticaresistentie bij C. difficile-infecties te beperken.

IM-01 is een gesproeidroogd eipoederproduct dat polyklonale antilichamen bevat die specifiek zijn voor C. difficile-toxinen A en toxine B, plus antilichamen tegen C, difficile-sporen. Een dosering van 20 g/dag IM-01 werd geselecteerd op basis van preklinische dierstudiegegevens, waarbij biggen werden gebruikt voor de behandeling van C. difficile enteritis.disease met 0,6 g IM-01 oraal dagelijks gedurende 4 dagen.

Op medelevende gronden werden patiënten met een bevestigde klinische diagnose van CDI met ongevormde diarree-ontlasting, buikkrampen en een positieve ontlastingstest voor de aanwezigheid van toxines en/of C. difficile in kweek, 106 patiënten (leeftijd: 11-93 jaar) ingeschreven voor de klinische studie. Alle patiënten ondertekenden geïnformeerde toestemmingsformulieren om aan het onderzoek deel te nemen. De hoeveelheid IM-01-antilichaampoederproduct (10 g of 20 g) oraal dagelijks toegediend door elke patiënt met 150 ml melk en gevolgd gedurende een periode van maximaal 6 weken na IM-01-immunotherapie. Zesenzeventig patiënten kregen een orale dosis van 20 g IM-01 en 30 patiënten kregen dagelijks 10 g IM-01-poeder gedurende 10 opeenvolgende dagen, als drinkbare therapie met melk of chocolademelk. Het primaire eindpunt van de studie was het uitroeien van C. difficile in ontlastingsmonsters.

Van de 106 patiënten die met IM-01-therapie werden behandeld, vertoonden 101 patiënten een significante verbetering van de klinische symptomen met negatieve ontlastingstestresultaten voor CDI. Vijf patiënten vertoonden verminderde klinische symptomen tijdens de IM-01-behandelingsperiode. Er werd geen recidief waargenomen met IM-01-therapie tijdens de follow-upperiode. Er werden geen veiligheidsproblemen gemeld.

Standard of care (SOC)-antibiotica voor de behandeling van CDI hebben reacties op de behandeling waargenomen, d.w.z. verdwijnen van diarree en bijkomende symptomen/tekenen bij 72-88% van de proefpersonen, en voor die proefpersonen die wel een herstel van CDI bereiken, ~16-24% een herhaling van CDI ervaren binnen een follow-up van 8 weken. Non-responders worden behandeld met hogere doseringen vancomycine. dag interval. In recente RCT's van antimicrobiële stoffen is een minimale follow-upperiode van 30 dagen na de behandeling gehanteerd. Andere onderzoeken hebben verschillende tijdstippen gebruikt, d.w.z. 8 weken of 12 weken na de behandeling. Daarom zullen, bij het ontbreken van een standaard zorgcontrole-arm, de voorgaande responspercentages voor het oplossen van CDI-symptomen (~80%) en een recidiefpercentage van 20% worden gebruikt als responstemplate voor dit onderzoek. Bij afwezigheid van randomisatie van proefpersonen naar een controlegroep voor de behandeling met antibiotica,