Tratamento da Infecção Leve a Moderada por Clostridium Difficile (CDI) (IM-01)

INTRODUÇÃO: INFORMAÇÕES DE FUNDO E FUNDAMENTOS CIENTÍFICOS O aumento da incidência de 'superbactérias' resistentes a antibióticos ampliou o uso de antibióticos de amplo espectro em todo o mundo. Uma consequência não intencional do tratamento antimicrobiano é a interrupção da microbiota gastrointestinal, resultando em suscetibilidade a patógenos oportunistas, como Clostridium difficile (C. difícil).

C. difficile é uma bactéria gram-positiva, formadora de esporos, anaeróbia que causa infecções entéricas hospitalares e adquiridas na comunidade, resultando em diarreia associada a C. difficile, colite pseudomembranosa, colite e morte.

A infecção por Clostridium difficile (CDI) continua a ser a causa predominante de diarreia infecciosa associada aos cuidados de saúde, centrada principalmente em hospitais, mas também na comunidade a uma taxa de ~ 100/100.000 habitantes e afetando os idosos de forma desproporcional. O dano antimicrobiano ao microbioma intestinal combinado com a aquisição de esporos de C. difficile é a principal causa da patogênese. A CDI é endêmica em hospitais e, embora as medidas de controle de infecção tenham reduzido as taxas nosocomiais de CDI no Canadá nos últimos 5 anos, os casos comunitários agora parecem ser mais aparentes. O tratamento da CDI utiliza antimicrobianos alternativos direcionados ao patógeno, principalmente metronidazol, vancomicina, ou fidaxomicina administrada por 10-14 dias recomendados. Enquanto a maioria responde ao tratamento com antibióticos, recorrências subsequentes de CDI são observadas em 25-40% dos pacientes. As recorrências de CDI são tratadas com os mesmos antibióticos e, devido ao espectro não seletivo de atividade do metronidazol e da vancomicina, as recorrências estão aumentando em probabilidade de recorrências subsequentes. A fidaxomicina é relativamente mais seletiva e seu uso está associado à redução das recorrências, mas o alto custo da fidaxomicina tem restringido seu uso.

A infecção por C. difficile é uma doença diarreica grave associada a morbidade e mortalidade substanciais e é responsável por diarreia adquirida no hospital e na comunidade, colite pseudomembranosa e morte.

A ImmuniMed Inc. desenvolveu uma imunoterapia oral usando anticorpos policlonais anti-C. difficile derivados do ovo (IM-01), que atingem diretamente os fatores de virulência do C. difficile. IM-01 é produzido a partir de ovos de galinha após a imunização de galinhas poedeiras com antígenos virulentos de C. difficile, toxina A de C. difficile, toxina B, células inteiras de C. difficile e esporos de C. difficile. IM-01 está na forma de pó de ovo inteiro seco por pulverização (gema mais clara de ovo contendo ovoalbumina) e é muito estável para atividade funcional. Após a reconstituição, o IM-01 é administrado por via oral, o que permite que ele atinja o lúmen intestinal, onde as toxinas do C. difficile exercem seus efeitos tóxicos. Além disso, os anticorpos IM-01 se ligam às toxinas e esporos de C. difficile e neutralizam suas atividades biológicas in vitro.

O uso de anticorpos policlonais derivados de ovos de galinha (IgY) para conferir imunidade passiva tem ganhado atenção como uma nova estratégia para imunoterapia oral como alternativa aos antibióticos para o tratamento de patógenos intestinais que causam diarreia em animais e humanos, incluindo E. coli enterotoxigênica, Salmonella spp e rotavírus bovino e humano. Em comparação com os anticorpos de mamíferos (IgG), os anticorpos derivados de ovo de galinha (IgY) têm alta especificidade e avidez para o antígeno, reagem mais rapidamente aos mesmos antígenos e diferem dos anticorpos de mamíferos (IgG) em propriedades estruturais e imunológicas. , IgY é mais estável no intestino em pH 3,5 -11 e tolera melhor a degradação enzimática por tripsina e quimiotripsina; a estabilidade da IgY contra a pepsina é dependente do pH.

A Immunimed determinou que os anticorpos policlonais IgY específicos para E. coli em pó de ovo contendo albumina são funcionalmente estáveis ​​quando armazenados a 2-8°C por mais de 10 anos.

Isso torna os anticorpos IM-01 atraentes para a imunoterapia oral, uma vez que os ovos são componentes dietéticos normais, sem efeitos colaterais tóxicos conhecidos. Demonstrou-se que os anticorpos IM-01 se ligam a toxinas e esporos de C. difficile, bem como neutralizam suas atividades biológicas in vitro.

Em comparação com a vacinação ativa, a imunoterapia passiva usando anti-C policlonal derivado do ovo IM-01. difficile tem vantagens, incluindo: (i) início de ação rápido e local, (ii) atividade altamente específica, (iii) aplicabilidade a uma gama mais ampla de pacientes, de crianças a adultos, incluindo pacientes imunocomprometidos, (iv) pode ser aplicado estrategicamente para um evento específico quando ocorre, em contraste com um modelo de vacinação em que grandes populações precisam ser tratadas com antecedência e manter anticorpos ativos por longos períodos, e (v) é uma parte normal da dieta humana.

Em uma literatura publicada, hamsters tratados oralmente com C. difficile anti-toxina A e anticorpos policlonais derivados de ovo neutralizantes anti-toxina B foram protegidos após o desafio C. difficile. Além disso, hamsters tratados com anticorpos derivados de ovos não desenvolveram doença recidivante meses após o tratamento com anticorpos. .

Além disso, os anticorpos policlonais derivados do ovo têm várias vantagens sobre os anticorpos monoclonais (MAbs), uma vez que os MAbs são geralmente específicos para um único epítopo, quando os anticorpos policlonais - uma nova classe de biofármacos, que têm afinidades mais altas para múltiplos antígenos-alvo e podem reconhecer múltiplos epítopos resultando em potência superior; uma vez que podem reconhecer múltiplos epítopos de toxina, pois é relevante para o polimorfismo dos genes da toxina A e da toxina B em C. difficile.

Um estudo em leitões foi realizado para demonstrar a segurança e o efeito terapêutico de anticorpos policlonais derivados de ovo -específicos para E. coli K-88, em animais de fazenda. Foi estabelecido que a E. coli K88, que causa diarreia em leitões por colonizar o trato GI inferior dos leitões, melhora seu desempenho de crescimento após o tratamento oral com anticorpos específicos de E. coli K-88. Além disso, o maior ganho de peso corporal foi alcançado em suínos que foram alimentados com a dosagem mais alta de anticorpos E. coli K-88 (4kg/1.000 kg de ração de creche) em comparação com a dosagem de anticorpo mais baixa (1kg/1.000 kg de ração de creche).

Concluiu-se que a alimentação de leitões com anticorpos policlonais derivados de ovos específicos para E. coli K-88 resulta em desempenho de crescimento significativamente melhorado de uma maneira dependente da dose de anticorpos. O processo de fabricação de anticorpos policlonais derivados de ovo direcionados a E. coli enterotoxigênica foi aprovado e validado pelo Canadian Centre for Veterinary Biologics.

Em conclusão, a imunoterapia oral com anticorpos policlonais é considerada de alto perfil de segurança com baixa probabilidade de efeitos adversos. Se comprovadamente eficaz como uma abordagem anti-infecciosa, a pressão de seleção de antibióticos pode ser reduzida, uma estratégia fundamental para limitar a resistência a antibióticos em infecções por C. difficile.

IM-01 é um produto de ovo em pó seco por pulverização contendo anticorpos policlonais específicos para as toxinas A e toxina B de C. difficile, além de anticorpos para esporos de C. difficile. Uma dosagem de 20g/dia de IM-01 foi selecionada com base em dados de estudos animais pré-clínicos, usando leitões para tratar enterite por C. difficile.disease com 0,6 g de IM-01 por via oral diariamente durante 4 dias.

Sob motivos de compaixão, pacientes com diagnóstico clínico de CDI confirmado com fezes diarreicas não formadas, cólicas abdominais e um teste de fezes positivo para a presença de toxinas e/ou C. difficile em cultura, 106 pacientes (idades: 11-93 anos) foram inscritos para o estudo clínico. Todos os pacientes assinaram formulários de consentimento informado para participar do estudo. A quantidade de produto em pó de anticorpo IM-01 (10g ou 20g) administrado por via oral diariamente por cada paciente com 150 mL de leite e seguido por um período de até 6 semanas após a imunoterapia IM-01. Setenta e seis pacientes receberam uma dose oral de 20 g de IM-01 e 30 pacientes receberam 10 g de IM-01 em pó diariamente por 10 dias consecutivos, como terapia bebível com leite ou achocolatado. O objetivo primário do estudo foi erradicar C. difficile em amostras de fezes.

Dos 106 pacientes tratados com terapia IM-01, 101 pacientes apresentaram melhora significativa dos sintomas clínicos com resultados de teste de fezes negativos para CDI. Cinco pacientes apresentaram sintomas clínicos reduzidos durante o período de tratamento IM-01. Nenhuma recorrência foi observada com a terapia IM-01 durante o período de acompanhamento. Nenhuma preocupação de segurança foi relatada.

Antibióticos padrão de tratamento (SOC) para o tratamento de CDI observaram respostas ao tratamento, ou seja, resolução de diarreia e sintomas/sinais auxiliares em 72-88% dos indivíduos, e para aqueles indivíduos que atingiram a resolução de CDI, ~ 16-24% experimentar uma recorrência de CDI dentro de um acompanhamento de 8 semanas. Os não respondedores são tratados com dosagens mais altas de vancomicina. intervalo do dia. Um período mínimo de acompanhamento pós-tratamento de 30 dias tem sido usado em RCTs recentes de antimicrobianos. Outros ensaios usaram vários pontos de tempo, ou seja, 8 semanas ou 12 semanas após o tratamento. Portanto, na ausência de um braço de controle padrão de atendimento, as taxas de resposta anteriores para resolução dos sintomas de CDI (~ 80%) e uma taxa de recorrência de 20% serão usadas como modelo de resposta para este estudo. Na ausência de randomização de indivíduos para um grupo de controle de tratamento com antibióticos,