Leczenie łagodnego i umiarkowanego zakażenia Clostridium Difficile (CDI) (IM-01)

WPROWADZENIE: PODSTAWOWE INFORMACJE I UZASADNIENIA NAUKOWE Zwiększona częstość występowania „superbakterii” opornych na antybiotyki zwiększyła stosowanie antybiotyków o szerokim spektrum działania na całym świecie. Niezamierzonym skutkiem leczenia przeciwdrobnoustrojowego jest zaburzenie mikroflory przewodu pokarmowego, co skutkuje podatnością na patogeny oportunistyczne, takie jak Clostridium difficile (C. trudne).

C. difficile jest Gram-dodatnią, tworzącą przetrwalniki, beztlenową bakterią, która powoduje szpitalne i pozaszpitalne zakażenia jelitowe prowadzące do biegunki związanej z C. difficile, rzekomobłoniastego zapalenia okrężnicy, zapalenia okrężnicy i śmierci.

Zakażenie Clostridium difficile (CDI) pozostaje główną przyczyną biegunki zakaźnej związanej z opieką zdrowotną, występującą głównie w szpitalach, ale także w społeczności z częstością ~100/100 000 populacji i nieproporcjonalnie dotykającą osoby starsze. Główną przyczyną patogenezy jest uszkodzenie mikrobiomu jelitowego przez środki przeciwdrobnoustrojowe w połączeniu z nabyciem przetrwalników C. difficile. CDI występuje endemicznie w szpitalach i chociaż środki kontroli zakażeń zmniejszyły szpitalne wskaźniki CDI w Kanadzie w ciągu ostatnich 5 lat, obecnie wydaje się, że przypadki CDI są bardziej widoczne. W leczeniu CDI stosuje się alternatywne środki przeciwdrobnoustrojowe skierowane na patogen, głównie metronidazol, wankomycynę, lub fidaksomycyna podawana przez zalecane 10-14 dni. Podczas gdy większość odpowiada na antybiotykoterapię, kolejne nawroty CDI obserwuje się u 25-40% pacjentów. Nawroty CDI są ponownie leczone tymi samymi antybiotykami, a ze względu na nieselektywne spektrum działania metronidazolu i wankomycyny prawdopodobieństwo kolejnych nawrotów wzrasta. Fidaksomycyna jest stosunkowo bardziej selektywna, a jej stosowanie wiąże się z mniejszą liczbą nawrotów, ale wysoki koszt fidaksomycyny ogranicza stosowanie.

Zakażenie C. difficile jest poważną chorobą biegunkową, związaną ze znaczną chorobowością i śmiertelnością i odpowiada za biegunkę szpitalną i pozaszpitalną, rzekomobłoniaste zapalenie jelita grubego, zapalenie jelita grubego i śmierć.

Firma ImmuniMed Inc. opracowała immunoterapię doustną z wykorzystaniem przeciwciał poliklonalnych anty-C. difficile pochodzących z jaj (IM-01), która jest bezpośrednio ukierunkowana na czynniki wirulencji C. difficile. IM-01 jest produkowany z jaj kurzych po uodpornieniu kur niosek zjadliwymi antygenami C. difficile, toksyną A, toksyną B C. difficile, całymi komórkami C. difficile i sporami C. difficile. IM-01 ma postać proszku z całych jaj suszonych rozpyłowo (żółtko plus białko zawierające owoalbuminę) i jest bardzo stabilny pod względem aktywności funkcjonalnej. Po rozpuszczeniu IM-01 jest podawany doustnie, co pozwala mu dotrzeć do światła jelita, gdzie toksyny C. difficile wywierają swoje toksyczne działanie. Ponadto przeciwciała IM-01 wiążą się z toksynami i zarodnikami C. difficile i neutralizują ich aktywność biologiczną in vitro.

Wykorzystanie przeciwciał poliklonalnych pochodzących z jaj kurzych (IgY) do nadawania odporności biernej zyskało uwagę jako nowa strategia immunoterapii doustnej jako alternatywa dla antybiotyków w leczeniu patogenów jelitowych powodujących biegunkę u zwierząt i ludzi, w tym enterotoksycznej E. coli, Salmonella spp oraz bydlęce i ludzkie rotawirusy. W porównaniu z przeciwciałami ssaczymi (IgG), przeciwciała pochodzące z jaja kurzego (IgY) mają wysoką specyficzność antygenową i awidność, reagują szybciej na te same antygeny i różnią się od przeciwciał ssaczych (IgG) zarówno pod względem właściwości strukturalnych, jak i immunologicznych. W porównaniu z IgG IgY jest bardziej stabilny w jelicie przy pH 3,5-11 i lepiej toleruje rozkład enzymatyczny przez trypsynę i chymotrypsynę; stabilność IgY wobec pepsyny zależy od pH.

Firma Immunimed ustaliła, że ​​przeciwciała poliklonalne IgY swoiste dla E. coli w proszku jajecznym zawierającym albuminę są funkcjonalnie stabilne, gdy są przechowywane w temperaturze 2-8°C przez ponad 10 lat.

To sprawia, że ​​przeciwciała IM-01 są atrakcyjne w immunoterapii doustnej, ponieważ jaja są normalnymi składnikami diety, bez znanych toksycznych skutków ubocznych. Wykazano, że przeciwciała IM-01 wiążą się z toksynami i zarodnikami C. difficile, a także neutralizują ich aktywność biologiczną in vitro.

W porównaniu z aktywnym szczepieniem, bierna immunoterapia przy użyciu poliklonalnego anty-C pochodzącego z jaja IM-01. difficile ma następujące zalety: (i) szybki i miejscowy początek działania, (ii) wysoce specyficzna aktywność, (iii) możliwość zastosowania u szerszego grona pacjentów, od dzieci po dorosłych, w tym pacjentów z obniżoną odpornością, (iv) strategiczne zastosowanie dla specyficzne zdarzenie, gdy wystąpi, w przeciwieństwie do modelu szczepienia, w którym duże populacje muszą być leczone z wyprzedzeniem i utrzymywać aktywne przeciwciała przez długi czas, oraz (v) jest normalną częścią diety człowieka.

W opublikowanej literaturze, chomiki leczone doustnie przeciwciałami poliklonalnymi pochodzącymi z jaja neutralizującymi antytoksynę A i antytoksynę B z C. difficile były chronione po prowokacji C. difficile. Również chomiki leczone przeciwciałami pochodzącymi z jaj nie rozwinęły nawrotu choroby kilka miesięcy po leczeniu przeciwciałami. .

Co więcej, przeciwciała poliklonalne pochodzące z jaja mają kilka zalet w porównaniu z przeciwciałami monoklonalnymi (MAb), ponieważ MAb są generalnie specyficzne dla pojedynczego epitopu, podczas gdy przeciwciała poliklonalne - nowa klasa biofarmaceutyków, które mają wyższe powinowactwo do wielu docelowych antygenów i mogą rozpoznawać wiele epitopów skutkujące wyższą mocą; ponieważ mogą rozpoznawać wiele epitopów toksyn, ponieważ jest to istotne dla polimorfizmu genów toksyny A i toksyny B w C. difficile.

Przeprowadzono badanie na prosiętach w celu wykazania bezpieczeństwa i działania terapeutycznego przeciwciał poliklonalnych pochodzących z jaj, specyficznych dla E. coli K-88, u zwierząt gospodarskich. Stwierdzono, że bakterie E. coli K88, które powodują biegunkę u prosiąt poprzez kolonizację dolnego odcinka przewodu pokarmowego prosiąt, poprawiają ich wzrost po podaniu doustnym przeciwciał swoistych dla E. coli K-88. Ponadto osiągnięto najwyższy przyrost masy ciała u świń żywionych najwyższą dawką przeciwciał E. coli K-88 (4kg/1000 kg diety odchowu) w porównaniu z najniższą dawką przeciwciał (1kg/1000 kg diety odchowu).

Stwierdzono, że karmienie prosiąt poliklonalnymi przeciwciałami pochodzącymi z jaj, swoistymi dla E. coli K-88, skutkuje znacząco poprawioną wydajnością wzrostu w sposób zależny od dawki przeciwciała. Proces produkcji przeciwciał poliklonalnych pochodzących z jaj skierowanych przeciwko enterotoksycznej E. coli został zatwierdzony i zatwierdzony przez Canadian Centre for Veterinary Biologics.

Podsumowując, uważa się, że doustna immunoterapia z użyciem przeciwciał poliklonalnych charakteryzuje się wysokim profilem bezpieczeństwa i niskim prawdopodobieństwem wystąpienia działań niepożądanych. Jeśli okaże się skuteczne jako podejście przeciwinfekcyjne, presja selekcji antybiotyków może zostać zmniejszona, co jest kluczową strategią ograniczania oporności na antybiotyki w infekcjach C. difficile.

IM-01 jest suszonym rozpyłowo produktem w proszku jajecznym zawierającym przeciwciała poliklonalne specyficzne dla toksyny A i toksyny C. difficile oraz przeciwciała przeciwko zarodnikom C. difficile. Dawkę IM-01 wynoszącą 20 g/dobę wybrano na podstawie danych z przedklinicznych badań na zwierzętach z wykorzystaniem prosiąt do leczenia zapalenia jelit wywołanego przez C. difficile. z 0,6 g IM-01 doustnie codziennie przez 4 dni.

Ze względów humanitarnych, pacjentów z potwierdzonym rozpoznaniem klinicznym CDI z nieuformowanymi biegunkami, skurczami brzucha i dodatnim wynikiem testu kału na obecność toksyn i/lub C. difficile w hodowli, 106 pacjentów (w wieku: 11-93 lat) zostało włączonych do badania badania kliniczne. Wszyscy pacjenci podpisali formularze świadomej zgody na udział w badaniu. Ilość produktu przeciwciała w proszku IM-01 (10 g lub 20 g) podawanego codziennie doustnie przez każdego pacjenta ze 150 ml mleka i obserwowana przez okres do 6 tygodni po immunoterapii IM-01. Siedemdziesięciu sześciu pacjentów otrzymywało doustnie dawkę 20 g IM-01, a 30 pacjentów otrzymywało 10 g proszku IM-01 dziennie przez 10 kolejnych dni, jako terapię do picia z mlekiem lub mlekiem czekoladowym. Pierwszorzędowym punktem końcowym badania była eradykacja C. difficile w próbkach kału.

Spośród 106 pacjentów leczonych terapią IM-01, 101 pacjentów wykazało znaczną poprawę objawów klinicznych z ujemnym wynikiem testu kału na CDI. Pięciu pacjentów wykazało zmniejszenie objawów klinicznych podczas okresu leczenia IM-01. W okresie obserwacji nie zaobserwowano nawrotu po terapii IM-01. Nie zgłoszono żadnych obaw dotyczących bezpieczeństwa.

Antybiotyki standardowej opieki (SOC) stosowane w leczeniu CDI zaobserwowano odpowiedzi na leczenie, tj. ustąpienie biegunki i dodatkowych objawów przedmiotowych/podmiotowych u 72-88% pacjentów, a u osób, które osiągnęły ustąpienie CDI, ~16-24% doświadczysz nawrotu CDI w ciągu 8 tygodni obserwacji. Osoby niereagujące na leczenie są leczone wyższymi dawkami wankomycyny. odstęp dnia. W niedawnych RCT środków przeciwdrobnoustrojowych zastosowano minimalny okres obserwacji po leczeniu wynoszący 30 dni. W innych badaniach wykorzystano kilka punktów czasowych, tj. 8 tygodni lub 12 tygodni po leczeniu. Dlatego też, wobec braku standardowej grupy kontrolnej opieki, powyższe wskaźniki odpowiedzi na ustąpienie objawów CDI (~80%) i odsetek nawrotów wynoszący 20% zostaną wykorzystane jako szablon odpowiedzi w tym badaniu. W przypadku braku randomizacji pacjentów do grupy kontrolnej leczonej antybiotykami,