Včasná detekce relapsu u rakoviny vaječníků pomocí kapilárního domácího odběru vzorků a testu proteinových biomarkerů (FOLL-OV)

Včasná detekce relapsu u rakoviny vaječníků pomocí kapilárního domácího odběru vzorků a multiplexního testu proteinových biomarkerů – pilotní studie

ÚČEL A CÍLE Epiteliální rakovina vaječníků (EOC) je nejsmrtelnější ze všech gynekologických rakovin, se 700 případy ročně ve Švédsku. I když téměř tři ze čtyř žen s EOC relapsem během 2-3 let, existuje nápadný nedostatek prospektivních studií o optimalizovaném sledování po léčbě EOC. Výzkumná skupina již dříve identifikovala plazmatický markerový proteinový panel s vysokou přesností pro diagnostiku a sledování rakoviny vaječníků. Cílem této pilotní studie je ověřit schopnost proteinového panelu detekovat časnou recidivu u pacientů bez příznaků uživatelsky přívětivým, neinvazivním způsobem, tj. doma podávaným kapilárním odběrem vzorků. Výsledky budou dále základem pro nadcházející národní prospektivní randomizovanou studii (RCT) – studii FOLL-OV.

PRŮZKUM TERÉNU/PŘEDBĚŽNÉ VÝSLEDKY Jedním z hlavních účelů následného programu je nalézt relaps rakoviny v časném stadiu a tím zlepšit šanci pacienta na úspěšnou léčbu a prodloužení přežití. Přesto je v této oblasti nápadný nedostatek prospektivních studií.

Nedávná RCT prokázala o osm měsíců prodloužené celkové přežití při chirurgické léčbě při prvním relapsu ve srovnání se samotnou chemoterapií, nicméně přínos přežití byl omezen na ženy, kde bylo dosaženo kompletní chirurgické resekce [3]. Proto se stalo důležitější než kdy jindy detekovat relaps co nejdříve, jakmile je to reálně možné, když je nádorová zátěž omezená.

V současnosti doporučují švédské národní směrnice pro EOC sledování 3-4krát ročně během prvních dvou let po ukončení léčby. Sledování se skládá z fyzikálního (a gynekologického) vyšetření, transvaginálního ultrazvuku a je mnohokrát doplněno biomarkerem EOC CA125, je však volitelné. CA125 je nespecifický marker a není zvýšen u všech typů EOC. V Cochranově přehledu hodnotícím strategie sledování u žen s EOC byla zahrnuta pouze jedna RCT, a proto jsou zapotřebí další RCT k hodnocení různých typů strategií následného sledování s použitím výsledků, jako je přežití, kvalita života (QoL), náklady a psychologické účinky. Důležité je, že ve dvou nedávných retrospektivních studiích nebyly detekovány téměř žádné recidivy výhradně při fyzikálním vyšetření a nutnost pravidelných návštěv na klinikách byla zpochybněna ve prospěch virtuálních setkání s přehledem symptomů a měřením nádorového markeru.

Je zřejmé, že jsou zapotřebí lepší biomarkery pro relaps EOC. Výzkumná skupina nedávno vyvinula rizikové skóre pro detekci EOC na základě analýzy 11 plazmatických proteinů. Při validaci ve dvou nezávislých klinických kohortách tento test vykázal citlivost 0,83/0,91 a specificitu 0,88/0,92 pro oddělení EOC a histologických benigních stavů. Dále jsme prokázali možnost sledovat změny ve vztahu k výsledku léčby a relapsu pomocí stejného rizikového skóre. Pomocí strojového učení jsou definovány čtyři různé trajektorie skóre rizika, které naznačují, že by mohlo být možné detekovat události relapsu až 60 dní před první klinicky zaznamenanou událostí. Tyto výsledky byly provedeny s použitím vlhké plazmy, ale předchozí výzkumy ukazují, že suché krevní skvrny dobře fungují pro proteomické analýzy se zamýšleným testem (PEA), i když je potřeba překalibrovat skóre rizika, aby se přizpůsobily rozdíly mezi suchým a vlhkým formátem. .

Tato pilotní studie, která je součástí většího klinického výzkumného projektu, si klade za cíl překalibrovat rizikové skóre a vyhodnotit jej v klinickém prostředí pomocí domácího odběru kapilární krve.

CÍLE/ VÝSLEDEK

Pilotní studie bude navržena jako prospektivní kohortová studie s cílem objasnit následující otázky před plánováním národního RCT:

• Kalibrace/validace rizikového skóre ve vzorcích kapilární krve
• Přesnost měsíčního domácího odběru vzorků a standardní Ca125 pro diagnostiku relapsu
• Vyhodnoťte logistiku při domácím odběru vzorků (pokyny pacientů, registrace, komunikace atd.)
• Zhodnotit přijatelnost domácího odběru pomocí polostrukturovaných rozhovorů se vzorkem účastníků studie (důvody předčasného ukončení, komunikační aspekty, klady a zápory při opakovaném odběru vzorků)

METODA Pilotní studie bude navržena jako prospektivní kohortová studie.

Studijní populace;

Kritéria pro zařazení:

• ≥18 let
• Zahrnuto v kontrolním programu pro rakovinu vaječníků/vajíček/primární peritoneální rakovinu ve Fakultní nemocnici v Uppsale nebo ve Fakultní nemocnici Norrlands, Švédsko
• Do 3 let po dokončení primární léčby EOC III-IV stádia nebo po léčbě relapsu
• Žádné známky onemocnění (normální CA 125 a žádný nádor detekován na radiologii nebo klinickém vyšetření).
• Mohou být zařazeni pacienti na udržovací léčbě (PARP-inhibitor, bevazicumab).

Vyloučení: Jiná diagnóza rakoviny do 2 let (kromě skvamózní rakoviny kůže nebo bazaliomu). Nemluví švédsky. Není schopen porozumět pokynům.

Intervence Účastníci absolvují standardní následný program s plánovanou návštěvou 3-4x ročně. Sledování sestává z fyzikálního (a gynekologického) vyšetření, transvaginálního ultrazvuku a odběru s-CA125.

Při zařazení obdrží účastníci písemné informace a podepíší informovaný souhlas.

Kapilární test

Účastníci studie budou požádáni, aby odebrali vzorek kapilární krve:

• při zařazení za asistence studijní sestry
• doma měsíčně po dobu jednoho roku nebo do relapsu
• při podezření na relaps Vzorek kapiláry a zaslaný do laboratoře v obálce poskytnuté účastníkům studie. Výsledek kapilárního testu bude zpětně analyzován a následně neovlivní léčbu, ale bude použit výhradně pro výzkumné účely. Výsledky nebudou sdělovány účastníkům studie.

Biobanka v Uppsale U pacientů, kteří jsou již zařazeni s písemným souhlasem do biobanky v Uppsale (U-CAN), budou kontrolní vzorky krve odebírány podle rutiny biobanky při zařazení a v případě sledování (https://www.u- can.uu.se).

Konec studie Relaps nebo po jednom roce zařazení

Správa dat

Následující údaje budou vloženy a uloženy v pseudonymizované databázi (REDCap):

Při zařazení:

• údaje o pacientovi (věk, BMI, komorbidita s kouřením, výkonnostní stav)
• údaje o nádoru (CA125, jiné nádorové markery, histologie, diferenciační stupeň, stadium nádoru, stav BRCA/HRD, radiologické nálezy)
• údaje o předchozí léčbě (chirurgické a onkologické).

Při klinických návštěvách/relapsu (plánované následné nebo neplánované návštěvy):

• hodnoty CA125
• příznaky a známky relapsu, včetně radiologie
• Termín a výsledky kapilárních testů

Kód pro osobní identifikaci bude uložen v samostatném souboru s heslem. Data ve výzkumné databázi proto nelze spojovat s jednotlivými pacienty.

Posouzení proveditelnosti

K vyhodnocení proveditelnosti a přijatelnosti studie bude účastníkům studie zpracován krátký dotazník s 5-7 otázkami při následujících příležitostech:

• Klesající účast
• Odstoupení od protokolu studie
• Konec studie Po dokončení studie budou strategickému vzorku účastníků (kolem 10) nabídnuty polostrukturované rozhovory s různým věkem a anamnézou, aby bylo možné identifikovat úskalí a oblasti zlepšení.

Statistika/výkon S přibližně 250 ženami, které ročně splňují tato kritéria pro zařazení do univerzitní nemocnice v Uppsale a univerzitní nemocnice v Norrlands, a předpokládanou mírou začlenění 50 %, dosáhneme studijní populace 125 žen za jeden rok. Při výpadku 25 osob jich 100 zůstane na analýzu. Přibližně 30 % těchto žen bude trpět během období studie recidivou. Při počtu přibližně 10 vzorků na účastníka považujeme 1000 vzorků za dostatečné pro pilotní studii.

Analýzy Shromážděné kapilární suché karty (Ahlström AutoCollect™) jsou děrovány v poloautomatickém zařízení pro děrování, která mají být analyzována. Laboratorní analýzy biomarkerů plazmatických proteinů budou prováděny v Affinity Proteomics Facility ve SciLifeLab Uppsala pomocí vlastního testu poskytnutého Olink Proteomics založeného na absolutní kvantifikaci. Přesnost (senzitivita a specificita) skóre rizika pro detekci relapsu a korelace s s-CA125 budou vypočítány pomocí strojového učení. Optimální mezní hodnota pro skóre testu bude aproximována v křivkách ROC, buď jako individuální zvýšení (například zdvojnásobení nejnižšího skóre rizika) nebo na úrovni skupiny. Bude analyzován časový rozdíl mezi zvýšením skóre proteinového panelu a klinickou detekcí recidivy.

Tyto výsledky budou použity pro výpočet výkonu a rozhodnutí o intervalech vzorkování pro nadcházející RCT.

U pacientů již zařazených do biobanky v Uppsale s písemným souhlasem budou vzorky žilní krve analyzovány při sledování a relapsu, aby bylo možné ověřit výsledky z kapiláry ve venózní krvi.

Další problémy s inkluzí, důvody pro vyřazení budou analyzovány pomocí krátkého dotazníku. Kvalitativní rozhovory s vybranou skupinou účastníků studie budou provedeny s cílem prozkoumat zkušenosti a přijatelnost pacientů a položit základy pro informování pacientů a komunikaci v RCT.

Klinický význam Hypotézou je, že častější analýza proteinového panelu specifického pro EOC povede k časnější detekci relapsu, dřívější léčbě a lepší prognóze. Do budoucna je navíc vizí, že si ženy mohou vybrat mezi různými způsoby sledování v závislosti na individuálních rizikových faktorech, osobních preferencích a logistických důvodech. Z dlouhodobého hlediska mohou být výsledky hodnocení použitelnosti domácího odběru krve z této studie užitečné i u dalších skupin pacientů.