Früherkennung eines Rückfalls bei Eierstockkrebs mithilfe kapillarer Heimprobenentnahme und eines Protein-Biomarker-Tests (FOLL-OV)

Früherkennung eines Rückfalls bei Eierstockkrebs mittels Kapillar-Heimprobenentnahme und einem Multiplex-Protein-Biomarker-Test – eine Pilotstudie

ZWECK UND ZIELE Der epitheliale Eierstockkrebs (EOC) ist mit 700 Fällen pro Jahr in Schweden die tödlichste aller gynäkologischen Krebsarten. Obwohl fast drei von vier Frauen mit EOC innerhalb von 2–3 Jahren einen Rückfall erleiden, besteht ein auffälliger Mangel an prospektiven Studien zur optimierten Nachsorge nach EOC-Behandlung. Die Forschungsgruppe hat zuvor ein Plasma-Markerprotein-Panel mit hoher Genauigkeit für die Diagnose und Nachsorge von Eierstockkrebs identifiziert. Das Ziel dieser Pilotstudie besteht darin, das Protein-Panel auf seine Fähigkeit hin zu validieren, einen frühen Rückfall bei symptomfreien Patienten auf benutzerfreundliche, nicht-invasive Weise, d. h. durch eine zu Hause verabreichte Kapillarprobenahme, zu erkennen. Darüber hinaus werden die Ergebnisse die Grundlage für eine bevorstehende nationale prospektive randomisierte Studie (RCT) bilden – die FOLL-OV-Studie.

UMFRAGE DES FELDES/VORLÄUFIGE ERGEBNISSE Eines der Hauptziele eines Nachsorgeprogramms besteht darin, einen Krebsrückfall in einem frühen Stadium zu erkennen und dadurch die Chancen des Patienten auf eine erfolgreiche Behandlung und ein längeres Überleben zu verbessern. Dennoch besteht ein auffälliger Mangel an prospektiven Studien auf diesem Gebiet.

Eine kürzlich durchgeführte RCT zeigte eine um acht Monate verlängerte Gesamtüberlebenszeit bei einer Operation beim ersten Rückfall im Vergleich zur alleinigen Chemotherapie. Allerdings war der Überlebensvorteil auf Frauen beschränkt, bei denen eine vollständige chirurgische Resektion erreicht wurde (3). Daher ist es wichtiger denn je, einen Rückfall so früh wie möglich zu erkennen, wenn die Tumorlast begrenzt ist.

Derzeit empfehlen die schwedischen nationalen Richtlinien für EOC eine Nachuntersuchung drei- bis viermal pro Jahr in den ersten zwei Jahren nach Abschluss der Behandlung. Die Nachsorge besteht aus einer körperlichen (und gynäkologischen) Untersuchung sowie transvaginalem Ultraschall und wird oft durch den EOC-Biomarker CA125 ergänzt, dieser ist jedoch optional. CA125 ist ein unspezifischer Marker und nicht bei allen EOC-Typen erhöht. In einem Cochrane-Review zur Bewertung der Nachsorgestrategien von Frauen mit EOC wurde nur ein RCT einbezogen. Daher sind weitere RCTs erforderlich, um verschiedene Arten von Nachsorgestrategien anhand von Ergebnissen wie Überleben, Lebensqualität (QoL) und Kosten zu bewerten und psychologische Auswirkungen. Wichtig ist, dass in zwei kürzlich durchgeführten retrospektiven Studien fast keine Rückfälle ausschließlich bei der körperlichen Untersuchung festgestellt wurden und die Notwendigkeit regelmäßiger Besuche in der Klinik zugunsten virtueller Treffen mit einer Überprüfung der Symptome und Messungen von Tumormarkern in Frage gestellt wurde.

Es besteht eindeutig Bedarf an besseren Biomarkern für EOC-Rückfälle. Die Forschungsgruppe hat kürzlich einen Risikoscore für den Nachweis von EOC entwickelt, der auf der Analyse von 11 Plasmaproteinen basiert. Bei der Validierung in zwei unabhängigen klinischen Kohorten zeigte dieser Assay eine Sensitivität von 0,83/0,91 und eine Spezifität von 0,88/0,92 zur Trennung von EOC und histologischen gutartigen Erkrankungen. Darüber hinaus haben wir die Möglichkeit aufgezeigt, Veränderungen in Bezug auf Behandlungsergebnis und Rückfall mithilfe desselben Risikoscores zu verfolgen. Mithilfe von maschinellem Lernen werden vier unterschiedliche Risikobewertungsverläufe definiert, die darauf hinweisen, dass es möglich sein könnte, Rückfallereignisse bis zu 60 Tage vor dem ersten klinisch erfassten Ereignis zu erkennen. Diese Ergebnisse wurden mit Nassplasma durchgeführt, frühere Untersuchungen zeigen jedoch, dass getrocknete Blutflecken gut für Proteomikanalysen mit dem vorgesehenen Assay (PEA) geeignet sind, obwohl eine Neukalibrierung des Risikoscores erforderlich ist, um Unterschiede zwischen dem Trocken- und Nassformat auszugleichen .

Diese Pilotstudie ist Teil eines größeren klinischen Forschungsprojekts und zielt darauf ab, den Risikoscore neu zu kalibrieren und ihn in einer klinischen Umgebung mithilfe einer Kapillarblutentnahme zu Hause zu bewerten.

ZIELE/ERGEBNIS

Die Pilotstudie wird als prospektive Kohortenstudie konzipiert mit dem Ziel, vor der Planung einer nationalen RCT folgende Fragen zu klären:

• Kalibrierung/Validierung des Risikoscores in Kapillarblutproben
• Genauigkeit der monatlichen Probenahme zu Hause und des Standard-Ca125 zur Diagnose eines Rückfalls
• Bewerten Sie die Logistik bei der Probenentnahme zu Hause (Patientenanweisungen, Registrierung, Kommunikation usw.)
• Bewerten Sie die Akzeptanz von Home-Sampling durch halbstrukturierte Interviews einer Stichprobe von Studienteilnehmern (Gründe für den Abbruch, Kommunikationsaspekte, Vor- und Nachteile bei wiederholter Probenahme).

METHODE Die Pilotstudie wird als prospektive Kohortenstudie konzipiert.

Studienpopulation;

Einschlusskriterien:

• ≥18 Jahre alt
• Im Kontrollprogramm für Eierstock-/Eileiter-/primärer Peritonealkrebs am Universitätskrankenhaus Uppsala oder am Universitätskrankenhaus Norrlands, Schweden, enthalten
• Innerhalb von 3 Jahren nach Abschluss der Erstbehandlung des EOC im Stadium III–IV oder nach der Behandlung eines Rückfalls
• Keine Anzeichen einer Erkrankung (normaler CA 125 und kein Tumor bei radiologischer oder klinischer Untersuchung festgestellt).
• Patienten unter Erhaltungstherapie (PARP-Inhibitor, Bevazicumab) können eingeschlossen werden.

Ausschluss: Andere Krebsdiagnose innerhalb von 2 Jahren (außer Plattenepithelkarzinom oder Basaliom). Nicht Schwedisch sprechend. Anweisungen nicht verstehen.

Intervention Die Teilnehmer folgen dem Standard-Follow-up-Programm mit geplanten Besuchen 3-4 Mal pro Jahr. Die Nachsorge besteht aus einer körperlichen (und gynäkologischen) Untersuchung, einer transvaginalen Ultraschalluntersuchung und der Probenahme von s-CA125.

Bei der Aufnahme erhalten die Teilnehmer schriftliche Informationen und unterzeichnen eine Einverständniserklärung.

Kapillartest

Die Studienteilnehmer werden gebeten, eine Kapillarblutprobe zu entnehmen:

• bei der Aufnahme mit Unterstützung der Studienkrankenschwester
• zu Hause monatlich während eines Jahres oder bis zum Rückfall
• Bei Verdacht auf einen Rückfall wird die Kapillarprobe entnommen und in einem den Studienteilnehmern ausgehändigten Umschlag an das Labor geschickt. Das Ergebnis des Kapillartests wird nachträglich ausgewertet und hat daher keinen Einfluss auf die Behandlung, sondern dient ausschließlich Forschungszwecken. Die Ergebnisse werden den Studienteilnehmern nicht mitgeteilt.

Uppsala-Biobank Bei Patienten, die bereits mit schriftlicher Einwilligung in die Uppsala-Biobank (U-CAN) aufgenommen wurden, werden Folgeblutproben gemäß der Biobank-Routine bei der Aufnahme und im Falle einer Nachuntersuchung entnommen (https://www.u- can.uu.se).

Studienende: Rückfall oder nach einem Jahr Einschluss

Datenmanagement

Folgende Daten werden erfasst und in einer pseudonymisierten Datenbank (REDCap) gespeichert:

Bei Aufnahme:

• Patientendaten (Alter, BMI, Raucherkomorbidität, Leistungsstatus)
• Tumordaten (CA125, andere Tumormarker, Histologie, Differenzierungsgrad, Tumorstadium, BRCA/HRD-Status, radiologische Befunde)
• bisherige Behandlungsdaten (chirurgisch und onkologisch).

Bei klinischen Besuchen/Rückfällen (geplante Nachuntersuchungen oder ungeplante Besuche):

• CA125-Werte
• Symptome und Anzeichen eines Rückfalls, einschließlich Radiologie
• Datum und Ergebnisse der Kapillartests

Der Code zur persönlichen Identifizierung wird in einer separaten Datei mit Passwort gespeichert. Daher können Daten in der Forschungsdatenbank nicht einzelnen Patienten zugeordnet werden.

Beurteilung der Machbarkeit

Um die Durchführbarkeit und Akzeptanz der Studie zu bewerten, wird den Studienteilnehmern bei folgenden Gelegenheiten ein kurzer Fragebogen mit 5-7 Fragen ausgehändigt:

• Rückläufige Beteiligung
• Abmeldung vom Studienprotokoll
• Ende der Studie Nach Abschluss der Studie werden einer strategischen Stichprobe von Teilnehmern (ca. 10) mit unterschiedlichem Alter und unterschiedlicher Krankengeschichte halbstrukturierte Interviews angeboten, um Fallstricke und Verbesserungsmöglichkeiten zu identifizieren.

Statistik/Leistung Mit etwa 250 Frauen, die diese Einschlusskriterien jährlich am Uppsala University Hospital und am Norrlands University Hospital erfüllen, und einer erwarteten Einschlussrate von 50 % werden wir in einem Jahr eine Studienpopulation von 125 Frauen erreichen. Bei einem Abbruch von 25 Personen bleiben 100 zur Analyse übrig. Etwa 30 % dieser Frauen erleiden während des Studienzeitraums einen Rückfall. Bei ca. 10 Proben/Teilnehmer halten wir 1000 Proben für ausreichend für die Pilotstudie.

Analysen Die gesammelten Kapillar-Trockenkarten (Ahlström AutoCollect™) werden in einer halbautomatischen Stanzanlage zur Analyse gestanzt. Die Laboranalysen für die Plasmaprotein-Biomarker werden in der Affinity Proteomics Facility im SciLifeLab Uppsala durchgeführt, wobei ein maßgeschneiderter Assay von Olink Proteomics verwendet wird, der auf absoluter Quantifizierung basiert. Die Genauigkeit (Sensitivität und Spezifität) des Risikoscores zur Erkennung von Rückfällen und die Korrelation mit s-CA125 werden mithilfe von maschinellem Lernen berechnet. Ein optimaler Grenzwert für den Testwert wird in ROC-Kurven angenähert, entweder als individueller Anstieg (z. B. eine Verdoppelung des niedrigsten Risikowerts) oder auf Gruppenebene. Der Zeitunterschied zwischen dem Anstieg des Protein-Panel-Scores und der klinischen Erkennung eines erneuten Auftretens wird analysiert.

Diese Ergebnisse werden für die Leistungsberechnung und die Entscheidung über die Probenahmeintervalle für die bevorstehende RCT verwendet.

Bei Patienten, die bereits mit schriftlicher Einwilligung in die Uppsala-Biobank aufgenommen wurden, werden venöse Blutproben bei der Nachuntersuchung und beim Rückfall analysiert, um die Ergebnisse aus der Kapillare im venösen Blut validieren zu können.

Weitere Herausforderungen bei der Inklusion und Gründe für den Abbruch werden anhand eines Kurzfragebogens analysiert. Es werden qualitative Interviews mit einer ausgewählten Gruppe von Studienteilnehmern durchgeführt, um die Patientenerfahrung und -akzeptanz zu untersuchen und den Grundstein für die Patienteninformation und -kommunikation im RCT zu legen.

Klinische Bedeutung Die Hypothese ist, dass eine häufigere Analyse eines für EOC spezifischen Proteinpanels zu einer früheren Erkennung von Rückfällen, einer früheren Behandlung und einer besseren Prognose führt. Darüber hinaus besteht die Vision darin, dass Frauen in Zukunft je nach individuellen Risikofaktoren, persönlichen Vorlieben und logistischen Gründen zwischen verschiedenen Möglichkeiten der Nachsorge wählen können. Langfristig können die Ergebnisse der Evaluierung der Anwendbarkeit der häuslichen Blutentnahme aus dieser Studie auch für andere Patientengruppen von Nutzen sein.