Relapsin varhainen havaitseminen munasarjasyövässä käyttämällä kapillaarikotinäytteenottoa ja proteiinibiomarkkeritestiä (FOLL-OV)

Munasarjasyövän uusiutumisen varhainen havaitseminen käyttämällä kapillaarikotinäytteenottoa ja moninkertaisen proteiinin biomarkkeritestiä - pilottitutkimus

TARKOITUS JA TAVOITTEET Epiteliaalinen munasarjasyöpä (EOC) on tappavin kaikista gynekologisista syövistä. Ruotsissa tapahtuu 700 tapausta vuodessa. Vaikka lähes kolme neljästä naisesta, joilla on EOC uusiutuu 2–3 vuoden sisällä, EOC-hoidon jälkeisten optimoidun seurannan mahdollisista tutkimuksista on silmiinpistävää puute. Tutkimusryhmä on aiemmin tunnistanut plasmamarkkeriproteiinipaneelin, jolla on suuri tarkkuus munasarjasyövän diagnosointiin ja seurantaan. Tämän pilottitutkimuksen tavoitteena on validoida proteiinipaneelin kyky havaita varhainen uusiutuminen oireettomilla potilailla käyttäjäystävällisellä, ei-invasiivisella tavalla eli kotihoidolla kapillaarinäytteenotolla. Lisäksi tulokset muodostavat perustan tulevalle kansalliselle prospektiiviselle satunnaistetulle tutkimukselle (RCT) - FOLL-OV-tutkimukselle.

ALAN TUTKIMUS/ALUSTAVAT TULOKSET Yksi seurantaohjelman päätavoitteista on löytää syövän uusiutuminen varhaisessa vaiheessa ja parantaa siten potilaan onnistuneen hoidon mahdollisuuksia ja pidentää eloonjäämistä. Alan tulevaisuuden tutkimuksista on kuitenkin silmiinpistävää puute.

Äskettäinen RCT osoitti kahdeksan kuukauden pidentyneen kokonaiseloonjäämisen, kun niitä hoidettiin leikkauksella ensimmäisen uusiutumisen yhteydessä, verrattuna pelkkään kemoterapiaan, mutta eloonjäämishyöty rajoittui naisiin, joilla saavutettiin täydellinen kirurginen resektio (3). Tästä syystä on tullut tärkeämpää kuin koskaan havaita uusiutuminen mahdollisimman pian, kun kasvaintaakka on rajallinen.

Tällä hetkellä Ruotsin kansalliset EOC-ohjeet suosittelevat seurantaa 3-4 kertaa vuodessa kahden ensimmäisen vuoden aikana hoidon päättymisen jälkeen. Seuranta koostuu fyysisestä (ja gynekologisesta) tutkimuksesta, transvaginaalisesta ultraäänestä ja sitä täydennetään useaan otteeseen EOC-biomarkkerilla CA125, mutta tämä on valinnainen. CA125 on epäspesifinen markkeri, eikä sitä ole kohonnut kaikissa EOC-tyypeissä. Cochrane-katsauksessa, jossa arvioitiin EOC:sta kärsivien naisten seurantastrategioita, vain yksi RCT sisällytettiin, ja siksi tarvitaan lisää RCT:itä erityyppisten seurantastrategioiden arvioimiseksi käyttämällä tuloksia, kuten selviytymistä, elämänlaatua (QoL) ja kustannuksia. ja psykologisia vaikutuksia. Tärkeää on, että kahdessa äskettäisessä retrospektiivisessä tutkimuksessa ei havaittu juuri lainkaan pahenemisvaiheita pelkästään fyysisessä tarkastuksessa ja säännöllisten klinikkakäyntien tarve kyseenalaistettiin virtuaalisten tapaamisten puolesta, joissa tarkasteltiin oireita ja kasvainmarkkerin mittauksia.

Selvästikin tarvitaan parempia biomarkkereita EOC-relapsille. Tutkimusryhmä on hiljattain kehittänyt riskipisteen EOC:n havaitsemiseksi 11 plasmaproteiinin analyysin perusteella. Kun tämä määritys validoitiin kahdessa riippumattomassa kliinisessä kohortissa, sen herkkyys oli 0,83/0,91 ja spesifisyys 0,88/0,92 EOC:n ja histologian hyvänlaatuisten tilojen erottamiseen. Lisäksi olemme osoittaneet mahdollisuuden seurata muutoksia suhteessa hoidon lopputulokseen ja uusiuteen käyttämällä samaa riskipistettä. Koneoppimisen avulla määritellään neljä erillistä riskipisteiden kehityskulkua, jotka osoittavat, että uusiutumistapahtumat voisi olla mahdollista havaita jopa 60 päivää ennen ensimmäistä kliinisesti kirjattua tapahtumaa. Nämä tulokset suoritettiin käyttämällä märkää plasmaa, mutta aiemmat tutkimukset osoittavat, että kuivatut veripisteet toimivat hyvin proteomisissa analyyseissä aiotulla määrityksellä (PEA), vaikka riskipisteet on kalibroitava uudelleen kuiva- ja märän muodon välisten erojen huomioon ottamiseksi. .

Tässä pilottitutkimuksessa osana suurempaa kliinistä tutkimusprojektia pyritään kalibroimaan riskipisteet uudelleen ja arvioimaan sitä kliinisessä ympäristössä käyttämällä kotipohjaista kapillaariverinäytteenottoa.

TAVOITTEET / TULOS

Pilottitutkimus suunnitellaan prospektiiviseksi kohorttitutkimukseksi, jonka tavoitteena on selvittää seuraavat kysymykset ennen kansallisen RCT:n suunnittelua:

• Riskipisteiden kalibrointi/validointi kapillaariverinäytteissä
• Kuukausittaisen kotinäytteenoton tarkkuus ja standardi Ca125 uusiutumisen diagnosoimiseksi
• Arvioi kotinäytteenoton logistiikka (potilasohjeet, ilmoittautuminen, viestintä jne.)
• Arvioi kotiotoksen hyväksyttävyys puolistrukturoiduilla haastatteluilla tutkimukseen osallistuneiden otoksella (keskeyttämisen syyt, viestintänäkökohdat, toistuvan otannan edut ja haitat)

MENETELMÄ Pilottitutkimus suunnitellaan prospektiiviseksi kohorttitutkimukseksi.

Tutkimuspopulaatio;

Sisällyttämiskriteerit:

• ≥18 vuoden ikä
• Mukana munasarja-/munasyövän/primaarisen vatsakalvon syövän hallintaohjelmassa Uppsalan yliopistollisessa sairaalassa tai Norrlandsin yliopistollisessa sairaalassa, Ruotsissa
• Kolmen vuoden kuluessa vaiheen III-IV EOC:n perushoidon päättymisestä tai uusiutumisen hoidon jälkeen
• Ei merkkejä sairaudesta (normaali CA 125, eikä radiologiassa tai kliinisissä tutkimuksissa havaittu kasvainta).
• Ylläpitohoitoa (PARP-inhibiittori, bevatsikumabi) saavat potilaat voidaan ottaa mukaan.

Poikkeus: Muu syöpädiagnoosi 2 vuoden sisällä (paitsi levyepiteelisyöpä tai basalioma). Ei-ruotsinkielinen. Ei pysty ymmärtämään ohjeita.

Interventio Osallistujat noudattavat tavanomaista seurantaohjelmaa aikataulun mukaan 3-4 kertaa vuodessa. Seuranta koostuu fyysisestä (ja gynekologisesta) tutkimuksesta, transvaginaalisesta ultraäänestä ja s-CA125:n näytteenotosta.

Osallistujat saavat kirjalliset tiedot ja allekirjoittavat tietoisen suostumuksen.

Kapillaaritesti

Tutkimukseen osallistujia pyydetään ottamaan kapillaariverinäyte:

• mukana opiskeluhoitajan avustuksella
• kotona kuukausittain vuoden ajan tai taudin pahenemiseen asti
• uusiutumista epäiltäessä Kapillaarinäyte lähetettiin laboratorioon tutkimukseen osallistujille annetussa kirjekuoressa. Kapillaaritestin tulos analysoidaan takautuvasti, eikä se siten vaikuta hoitoon, vaan sitä käytetään vain tutkimustarkoituksiin. Tuloksia ei ilmoiteta tutkimuksen osallistujille.

Uppsalan biopankki Potilailta, jotka ovat jo kirjallisella suostumuksella Uppsalan biopankkiin (U-CAN), otetaan seurantaverinäytteet biopankkirutiinin mukaisesti sisällyttämisen yhteydessä ja seurannan yhteydessä (https://www.u- can.uu.se).

Opintojen päättyminen Relapsi tai yhden vuoden sisällyttämisen jälkeen

Tiedonhallinta

Seuraavat tiedot syötetään ja tallennetaan pseudonyymitietokantaan (REDCap):

Mukana:

• potilastiedot (ikä, BMI, tupakoinnin samanaikainen sairaus, suorituskyky)
• kasvaintiedot (CA125, muut kasvainmarkkerit, histologia, erilaistumisaste, kasvainvaihe, BRCA/HRD-status, radiologialöydökset)
• aikaisemmat hoitotiedot (kirurgiset ja onkologiset).

Kliinisissä käynneissä/relapsessa (suunniteltu seuranta tai suunnittelemattomat käynnit):

• CA125-arvot
• taudin uusiutumisen oireet ja merkit, mukaan lukien radiologia
• Kapillaaritutkimusten päivämäärä ja tulokset

Henkilötunnuskoodi tallennetaan erilliseen tiedostoon salasanan kanssa. Tästä syystä tutkimustietokannan tietoja ei voida yhdistää yksittäisiin potilaisiin.

Toteutettavuuden arviointi

Tutkimuksen toteutettavuuden ja hyväksyttävyyden arvioimiseksi tutkimukseen osallistujille käsitellään lyhytmuotoinen 5-7 kysymyksen kyselylomake seuraavissa tilanteissa:

• Osallistumisen väheneminen
• Pudotus tutkimusprotokollasta
• Tutkimuksen loppu Tutkimuksen päätyttyä tarjotaan puolistrukturoituja haastatteluja strategiselle otokselle osallistujista (noin 10), joilla on eri ikäisiä ja sairaushistoriaa, jotta voidaan tunnistaa sudenkuopat ja kehittämiskohteet.

Tilastot/teho Kun noin 250 naista täyttää nämä kriteerit Uppsalan yliopistollisessa sairaalassa ja Norrlandsin yliopistollisessa sairaalassa vuosittain, ja arvioitu 50 %:n osallistumisaste, saavutamme 125 naisen tutkimuspopulaation yhdessä vuodessa. Kun 25 henkilöä on pudonnut, 100 jää analysoitavaksi. Noin 30 % näistä naisista kärsii uusiutumisesta tutkimusjakson aikana. Kun osallistuja on noin 10 näytettä, katsomme 1000 näytettä riittäväksi pilottitutkimukseen.

Analyysit Kerätyt kapillaarikuivakortit (Ahlström AutoCollect™) lävistetään puoliautomaattisessa laitteistossa analysoitavia leimauksia varten. Plasmaproteiinien biomarkkerien laboratorioanalyysit suoritetaan SciLifeLab Uppsalan Affinity Proteomics Facilityssä käyttäen Olink Proteomicsin tarjoamaa räätälöityä absoluuttiseen kvantifiointiin perustuvaa määritystä. Riskipisteiden tarkkuus (herkkyys ja spesifisyys) uusiutumisen havaitsemiseksi ja korrelaatio s-CA125:n kanssa lasketaan koneoppimisen avulla. Optimaalinen raja-arvo testipisteelle lasketaan ROC-käyrissä joko yksittäisenä lisäyksenä (esimerkiksi alimman riskipisteen kaksinkertaistuminen) tai ryhmätasolla. Aikaero proteiinipaneelin pistemäärän nousun ja uusiutumisen kliinisen havaitsemisen välillä analysoidaan.

Näitä tuloksia käytetään tehon laskemiseen ja näytteenottovälien päättämiseen tulevaa RCT:tä varten.

Uppsalan biopankkiin kirjallisella suostumuksella jo kuuluneilta potilailta laskimoverinäytteet analysoidaan seurannassa ja relapsivaiheessa, jotta voidaan validoida laskimoveren kapillaaritulokset.

Muut osallisuuden haasteet, keskeyttämisen syyt analysoidaan lyhyellä kyselylomakkeella. Valitun tutkimukseen osallistujaryhmän kanssa tehdään kvalitatiivisia haastatteluja, joissa selvitetään potilaiden kokemuksia ja hyväksyttävyyttä sekä luodaan perusta potilasinformaatiolle ja -viestinnälle RCT:ssä.

Kliininen merkitys Oletuksena on, että EOC-spesifisen proteiinipaneelin useammin analysoitava analyysi johtaa relapsin havaitsemiseen, aikaisempaan hoitoon ja parempaan ennusteeseen. Lisäksi visiona on, että tulevaisuudessa naiset voivat valita erilaisten seurantatapojen välillä yksilöllisten riskitekijöiden, henkilökohtaisten mieltymysten ja logististen syiden mukaan. Pitkällä aikavälillä tästä tutkimuksesta saadut kotiverinäytteen soveltuvuuden arvioinnin tulokset voivat olla hyödyllisiä myös muissa potilasryhmissä.