Undersøgelse af oxidativ stress ved appendektomi - åben versus laparoskopisk i barndom og ungdom (OSAE)

Undersøgelsens formål: I det planlagte prospektive randomiserede studie vil oxidativ stress blive undersøgt ved at analysere VOC'er (flygtige organiske forbindelser) i udåndingsluften hos børn, der gennemgår åben eller laparoskopisk kirurgi for blindtarmsbetændelse ved Institut for Pædiatrisk og Ungdomskirurgi på Medicinsk Universitet. af Graz. En deraf følgende bedre forståelse af virkningerne af operationsteknikken kan a) være en forudsætning for et optimeret operationsmiljø og b) eventuelt føre til anbefalinger af præ- eller perioperativt antioxidativt aktive stoffer og c) være grundlag for fremtidige operationer.

Studiedesign: Dette er et prospektivt randomiseret pilotstudie i børn og unge, der skal opereres på grund af akut blindtarmsbetændelse. Patienter med kompliceret blindtarmsbetændelse og patienter med en intraoperativt forårsaget lidelse vil blive udelukket. Operationen inden for rammerne af denne undersøgelse udføres udelukkende af specialister fra afdelingen for pædiatrisk og ungdomskirurgi på det medicinske universitet i Graz, som udfører både åbne og laparoskopiske kirurgiske teknikker. 40 patienter i alderen 6-18 år, der lider af akut blindtarmsbetændelse, skal inkluderes. Disse er opdelt i 2 grupper. Gruppe 1 (n = 20) med laparoskopisk og gruppe 2 (n = 20) med åben blindtarmsoperation.

Rekruttering og kompensation af undersøgelsesdeltagere: Forældre/patienter gøres opmærksomme på undersøgelsen ved hjælp af et informationsblad og forsynes med en samtykkeerklæring, hvis det er interesseret. Deltagerne modtager ingen kompensation for at deltage i undersøgelsen.

Prøveudtagning af udåndede VOC'er (flygtige organiske forbindelser) ved hjælp af NTME (nålefældemikroekstraktion) til måling OS (oxidativ stress): Antal prøver: 2 prøver hver fra udåndet ånde på de tidspunkter, der er defineret nedenfor (i alt n = 12). Tidspunktet for prøveudtagning: t1 før introduktion af bedøvelsesmiddel (n = 2); t2 efter indføring af bedøvelsesmiddel (n = 2); t3 15 minutter efter skæring (n = 2); t4 30 minutter efter skæring (n = 2); t5 45 minutter efter skæring (n = 2); t6 efter søm (n = 2).

Analyse af udåndede VOC'er til måling OS: De udåndede udåndingsprøver, der tages, placeres i en injektor af en gaskromatograf i den inerte bæregasstrøm (He). Stofferne tildeles efter deres retentionstid i kromatogrammet og dets massespektrum. Ukendte sammenhænge i massespektret af udåndet ånde bruges som grundlag for sammenligning med en referencedatabase.

Prøvetagning af blodmarkører til måling af OS: a) prøveudtagningstider for WBC'er, CRP: t1 = 1 prøve præoperativt (før introduktion af bedøvelse) og t2 = 1 prøve efter 24 timer. b) prøveudtagningstider for malondialdehyd: t1 = 1 prøve før anæstesiindføring og t2 = 1 prøve efter sutur.

Histopatologisk klassificering: Den eksplanterede vermiforme appendiks bliver den histopatologiske renovering ved Institut for Patologi ved det medicinske universitet i Graz. Der foretages klassificeringen efter de histopatologiske fund i 4 sværhedsgrader (akut fokal blindtarmsbetændelse, akut suppurativ blindtarmsbetændelse, akut gangrenøs blindtarmsbetændelse, perforeret blindtarmsbetændelse).

Prøveudtagning af WBC'er, CRP: Disse udføres inden for rammerne af rutinediagnostik på grund af den kliniske præsentation af AA (akut blindtarmsbetændelse).

Prøveudtagning af VOC'er: Der tages 2 udåndingsprøver fra hver patient under udånding, taget fra den. For at indsamle prøverne bruger efterforskerne en automatisk prøveudtagningsanordning forbundet direkte til et kapnometer. Dette system arbejder med mikroekstraktion (NTME) og muliggør en automatisk prøvetagning af alveolærluften, det vil sige i CO2-kurvens plateau. Prøverne sendes til Intitute of Rostock Medical Breath Analysis and Technologies (RoMBAT) som samarbejdspartner. Denne partner blev udvalgt, fordi den allerede har stor erfaring med metodikken og undersøgelser af oxidativ stress under operationer.

Malondialdehyd (MDA) prøvetagning: Malondialdehyd analyseres ved det kliniske institut for medicinsk og kemisk laboratoriediagnostik ved det medicinske universitet i Graz ved hjælp af ultramoderne GC-MS-metode. Til dette formål tildeles patienten de to måletider 2 x 400 μl EDTA plasma taget. Den anden prøve tjener kun som en sikkerhedsforanstaltning, hvis gentagne målinger er nødvendige. De opnåede prøver skal dybfryses ved -80 °C inden for 2 timer. . Efterfølgende (senest den efterfølgende dag) skal prøverne analyseres til Instituttet.

Planlagt evaluering: De statistiske undersøgelser udføres med SPSS 23.0®. Grafisk repræsentation af dataene udføres med GraphPad Prism 7®. For at undersøge om hovedmålvariablerne (VOC'er) adskiller sig i forløbet mellem de to grupper, anvendes lineære modeller til gentagne målinger med gruppe (åben versus laparoskopisk blindtarmsoperation) som mellemliggende emnefaktor og måletidspunkt (t1 til t6) som internt emne. faktor. Ved afvigelser fra normalfordelingen tages transformationer i betragtning. De sekundære mål, dvs. ændringerne i serummarkørerne på Tiderne t1 og t6, sammenlignes mellem de 2 grupper (åben versus laparoskopisk blindtarmsoperation) ved Mann-Whitney U-test (data ikke normalfordelt) eller uafhængig T-test (med normal fordeling). For at etablere relationer mellem VOC'erne og serummarkørerne for oxidativ stress på tidspunkterne t1 og t6 udføres en korrelationsanalyse (afhængigt af dataene, Pearson eller Spearman Rho). Alle statistiske test udføres på to sider og alle p-værdier tolkes rent eksplorativt.