Undersøkelse av oksidativt stress ved appendektomi - åpen versus laparoskopisk i barndom og ungdom (OSAE)

Mål med studien: I den planlagte prospektive randomiserte studien vil oksidativt stress bli undersøkt ved å analysere VOC (flyktige organiske forbindelser) i utåndingspusten hos barn som gjennomgår åpen eller laparoskopisk kirurgi for blindtarmbetennelse ved Barne- og ungdomskirurgisk avdeling ved Medisinsk universitet. av Graz. En resulterende bedre forståelse av effekten av operasjonsteknikken kan a) være en forutsetning for en optimalisert operasjonssetting og b) muligens føre til anbefalinger av pre- eller perioperativt antioksidativt aktive stoffer og c) være en base for fremtidige kirurgiske prosedyrer.

Studiedesign: Dette er en prospektiv randomisert pilotstudie hos barn og unge som skal opereres på grunn av akutt blindtarmbetennelse. Pasienter med komplisert blindtarmbetennelse og de med en intraoperativt forårsaket lidelse vil bli ekskludert. Operasjonen innenfor rammen av denne studien utføres utelukkende av spesialister ved avdelingen for pediatrisk og ungdomskirurgi ved det medisinske universitetet i Graz, som utfører både åpne og laparoskopiske kirurgiske teknikker. 40 pasienter i alderen 6-18 år som lider av akutt blindtarmbetennelse skal inkluderes. Disse er delt inn i 2 grupper. Gruppe 1 (n = 20) med laparoskopisk og gruppe 2 (n = 20) med åpen blindtarmsoperasjon.

Rekruttering og kompensasjon av studiedeltakere: Foreldre/pasienter gjøres kjent med studien ved hjelp av et informasjonsark og får samtykkeerklæring ved interesse. Deltakerne får ingen kompensasjon for å delta i studien.

Prøvetaking av utåndede VOC (flyktige organiske forbindelser) ved bruk av NTME (nålefangermikroekstraksjon) for måling OS (oksidativt stress): Antall prøver: 2 prøver hver fra utåndet pust på tidspunktene definert nedenfor (totalt n = 12). Tidspunktet for prøvetaking: t1 før introduksjon av anestesimiddel (n = 2); t2 etter introduksjon av anestesimiddel (n = 2); t3 15 minutter etter kuttet (n = 2); t4 30 minutter etter kuttet (n = 2); t5 45 minutter etter kuttet (n = 2); t6 etter søm (n = 2).

Analyse av utåndede VOC for måling OS: De utåndede pusteprøvene som er tatt, plasseres i en injektor av en gasskromatograf inn i den inerte bæregasstrømmen (He). Stoffene er tilordnet i henhold til deres retensjonstid i kromatogrammet og dets massespektrum. Ukjente sammenhenger i massespekteret til utåndet pust brukes som grunnlag for sammenligning med en referansedatabase.

Prøvetaking av blodmarkører for måling OS: a) prøvetakingstider for hvite blodlegemer, CRP: t1 = 1 prøve preoperativt (før anestesiinnføring) og t2 = 1 prøve etter 24 timer. b) prøvetakingstider for malondialdehyd: t1 = 1 prøve før anestesiinnføring og t2 = 1 prøve etter sutur.

Histopatologisk gradering: Den eksplanterte vermiforme blindtarmen blir den histopatologiske oppussingen ved Institutt for patologi ved det medisinske universitetet i Graz. Der foretas klassifiseringen etter de histopatologiske funnene i 4 alvorlighetsgrader (akutt fokal blindtarmbetennelse, akutt suppurativ blindtarmbetennelse, akutt gangrenøs blindtarmbetennelse, perforert blindtarmbetennelse).

Prøvetaking av WBC, CRP: Disse utføres innenfor rammen av rutinediagnostikk på grunn av den kliniske presentasjonen av AA (akutt blindtarmbetennelse).

Prøvetaking av VOC: 2 pusteprøver tas fra hver pasient under ekspirasjon, tatt fra den. For å samle prøvene bruker etterforskerne en automatisk prøvetakingsenhet koblet direkte til et kapnometer. Dette systemet fungerer med mikroekstraksjon (NTME) og muliggjør en automatisk prøvetaking av alveolærluften, dvs. på platået til CO2-kurven. Prøvene sendes til Intitute of Rostock Medical Breath Analysis and Technologies (RoMBAT) som samarbeidspartner. Denne partneren ble valgt fordi den allerede har lang erfaring med metodikk og studier på oksidativt stress under operasjoner.

Malondialdehyd (MDA) prøvetaking: Malondialdehyd er analysert ved Clinical Institute for Medical and Chemical Laboratory Diagnostics ved Medical University of Graz ved hjelp av ultramoderne GC-MS metode. For dette formålet blir pasienten tildelt de to måletidene 2 x 400 μl EDTA-plasma tatt. Den andre prøven tjener bare som et sikkerhetstiltak hvis gjentatte målinger er nødvendig. Prøvene som tas må dypfryses ved -80 °C innen 2 timer. . Deretter (senest påfølgende dag) skal prøvene analyseres til instituttet.

Planlagt evaluering: De statistiske undersøkelsene er utført med SPSS 23.0®. Grafisk representasjon av dataene utføres med GraphPad Prism 7®. For å undersøke om hovedmålvariablene (VOC) er forskjellige i forløpet mellom de to gruppene, brukes lineære modeller for gjentatte målinger med gruppe (åpen versus laparoskopisk blindtarmsoperasjon) som intermediær subjektfaktor og måletidspunkt (t1 til t6) som internt subjekt. faktor. Ved avvik fra normalfordelingen tas transformasjoner i betraktning. De sekundære målene, dvs. endringene i serummarkørene på Tidene t1 og t6, sammenlignes mellom de 2 gruppene (åpen versus laparoskopisk appendektomi) ved Mann-Whitney U-test (data ikke normalfordelt) eller uavhengig T-test (med normal fordeling). For å etablere sammenhenger mellom VOC-ene og serummarkørene for oksidativt stress på tidspunktene t1 og t6 utføres en korrelasjonsanalyse (avhengig av dataene, Pearson eller Spearman Rho). Alle statistiske tester gjennomføres på to sider og alle p-verdier tolkes rent eksplorativt.