Enquête sur le stress oxydatif dans l'appendicectomie - Ouvert versus laparoscopique dans l'enfance et l'adolescence (OSAE)

Objectif de l'étude : dans l'étude prospective randomisée prévue, le stress oxydatif sera étudié en analysant les COV (composés organiques volatils) dans l'haleine expirée chez les enfants subissant une chirurgie ouverte ou laparoscopique pour une appendicite au Département de chirurgie pédiatrique et adolescente de l'Université de médecine. de Graz. Une meilleure compréhension des effets de la technique chirurgicale qui en résulte peut a) être une condition préalable à un cadre chirurgical optimisé et b) éventuellement conduire à des recommandations de substances actives antioxydantes pré- ou périopératoires et c) être une base pour de futures interventions chirurgicales.

Conception de l'étude : Il s'agit d'une étude pilote prospective randomisée chez des enfants et des adolescents subissant une intervention chirurgicale en raison d'une appendicite aiguë. Les patients présentant une appendicite compliquée et ceux présentant un trouble d'origine peropératoire seront exclus. L'opération dans le cadre de cette étude est exclusivement menée par des spécialistes du Département de chirurgie pédiatrique et adolescente de l'Université de médecine de Graz, qui exécutent à la fois des techniques chirurgicales ouvertes et laparoscopiques. 40 patients âgés de 6 à 18 ans souffrant d'appendicite aiguë sont à inclure. Ceux-ci sont divisés en 2 groupes. Groupe 1 (n = 20) avec laparoscopie et groupe 2 (n = 20) avec appendicectomie ouverte.

Recrutement et rémunération des participants à l'étude : Les parents/patients sont informés de l'étude au moyen d'une fiche d'information et reçoivent une déclaration de consentement s'ils sont intéressés. Les participants ne reçoivent aucune compensation pour leur participation à l'étude.

Échantillonnage des COV (composés organiques volatils) expirés à l'aide de NTME (microextraction par piège à aiguille) pour la mesure de l'OS (stress oxydatif) : Nombre d'échantillons : 2 échantillons chacun de l'air expiré aux temps définis ci-dessous (au total n = 12). Le moment du prélèvement : t1 avant l'introduction de l'anesthésique (n = 2) ; t2 après introduction anesthésique (n = 2) ; t3 15 minutes après coupe (n = 2) ; t4 30 minutes après coupe (n = 2) ; t5 45 minutes après coupe (n = 2) ; t6 après couture (n = 2).

Analyse des COV expirés pour mesure OS : Les échantillons d'haleine expirée prélevés sont placés dans un injecteur d'un chromatographe en phase gazeuse dans le flux de gaz vecteur inerte (He). Les substances sont attribuées en fonction de leur temps de rétention dans le chromatogramme et de son spectre de masse. Les connexions inconnues dans le spectre de masse de l'air expiré sont utilisées comme base de comparaison avec une base de données de référence.

Prélèvement des marqueurs sanguins pour la mesure OS : a) temps de prélèvement pour les GB, CRP : t1 = 1 échantillon en préopératoire (avant l'introduction de l'anesthésique) et t2 = 1 échantillon après 24 h. b) temps de prélèvement pour le malondialdéhyde : t1 = 1 échantillon avant introduction anesthésique et t2 = 1 échantillon après suture.

Classement histopathologique : l'appendice vermiforme explanté devient le reconditionnement histopathologique à l'Institut de pathologie de l'Université de médecine de Graz. Là, la classification est faite selon les résultats histopathologiques en 4 degrés de gravité (appendicite aiguë focale, appendicite aiguë suppurée, appendicite aiguë gangreneuse, appendicite perforée).

Prélèvement GB, CRP : Ils sont réalisés dans le cadre du diagnostic de routine en raison de la présentation clinique de l'AA (appendicite aiguë).

Échantillonnage des COV : 2 échantillons d'haleine sont prélevés sur chaque patient lors de l'expiration, prélevés sur celui-ci. Pour prélever les échantillons, les enquêteurs utilisent un dispositif d'échantillonnage automatique relié directement à un capnomètre. Ce système fonctionne par microextraction (NTME) et permet un prélèvement automatique de l'air alvéolaire, c'est-à-dire dans le plateau de la courbe de CO2. Les échantillons sont envoyés à l'Institut de Rostock Medical Breath Analysis and Technologies (RoMBAT) en tant que partenaire de coopération. Ce partenaire a été sélectionné car il possède déjà une grande expérience de la méthodologie et des études sur le stress oxydatif en exploitation.

Échantillonnage de malondialdéhyde (MDA): Le malondialdéhyde est analysé à l'Institut clinique de diagnostic médical et chimique de laboratoire de l'Université médicale de Graz au moyen de la méthode GC-MS ultramoderne. A cet effet, le patient est affecté aux deux temps de mesure 2 x 400 μl de plasma EDTA prélevé. Le deuxième échantillon sert uniquement de mesure de sécurité si des mesures répétées sont nécessaires. Les échantillons obtenus doivent être surgelés à -80 °C dans les 2 heures. . Par la suite (au plus tard le jour suivant) les échantillons doivent être analysés à l'Institut.

Evaluation prévue : Les enquêtes statistiques sont réalisées avec SPSS 23.0®. La représentation graphique des données est réalisée avec GraphPad Prism 7®. Pour déterminer si les principales variables cibles (VOC) diffèrent dans l'évolution entre les deux groupes, des modèles linéaires sont utilisés pour des mesures répétées avec le groupe (appendicectomie ouverte ou laparoscopique) comme facteur de sujet intermédiaire et le temps de mesure (t1 à t6) comme sujet interne facteur. En cas d'écarts par rapport à la distribution normale, des transformations sont prises en compte. Les cibles secondaires, c'est-à-dire l'évolution des marqueurs sériques aux temps t1 et t6, sont comparées entre les 2 groupes (appendicectomie ouverte versus laparoscopique) par test U de Mann-Whitney (données non distribuées normalement) ou test T indépendant (avec Distribution). Afin d'établir des relations entre les COV et les marqueurs sériques du stress oxydatif aux temps t1 et t6 une analyse de corrélation est effectuée (selon les données, Pearson ou Spearman Rho). Tous les tests statistiques sont effectués des deux côtés et toutes les valeurs de p sont interprétées de manière purement exploratoire.