Az oxidatív stressz vizsgálata vakbélműtétben – Nyílt versus laparoszkópos gyermek- és serdülőkorban (OSAE)

A vizsgálat célja: A tervezett prospektív, randomizált vizsgálatban az oxidatív stresszt a kilélegzett levegőben található VOC-ok (illékony szerves vegyületek) elemzésével vizsgálják az Orvostudományi Egyetem Gyermek- és Serdülősebészeti Klinikáján vakbélgyulladás miatt nyílt vagy laparoszkópos műtéten átesett gyermekeknél. Grazból. A műtéti technika hatásainak jobb megértése a) előfeltétele lehet az optimalizált műtéti beállításnak, és b) esetleg a műtét előtti vagy perioperatív antioxidáns hatású anyagok ajánlásához vezethet, és c) alapja lehet a jövőbeni műtéti eljárásoknak.

A vizsgálat felépítése: Ez egy prospektív, randomizált kísérleti vizsgálat akut vakbélgyulladás miatt műtéten átesett gyermekek és serdülők körében. A szövődményes vakbélgyulladásban és az intraoperatív eredetű rendellenességben szenvedő betegek kizárásra kerülnek. A jelen tanulmány keretében végzett műtétet kizárólag a Grazi Orvostudományi Egyetem Gyermek- és Serdülősebészeti Osztályának szakemberei végzik, akik nyílt és laparoszkópos sebészeti technikákat egyaránt végeznek. 40 akut vakbélgyulladásban szenvedő, 6-18 éves beteget kell bevonni. Ezeket 2 csoportra osztják. 1. csoport (n = 20) laparoszkópos és 2. csoport (n = 20) nyitott vakbélműtéttel.

A vizsgálatban résztvevők toborzása és javadalmazása: A szülőket/betegeket tájékoztatón tájékoztatják a vizsgálatról, és érdeklődésük esetén beleegyező nyilatkozatot adnak nekik. A résztvevők nem kapnak ellenszolgáltatást a vizsgálatban való részvételért.

Mintavétel a kilégzett VOC-kból (illékony szerves vegyületek) NTME (tűcsapda mikroextrakció) segítségével az OS (oxidatív stressz) mérésére: Minták száma: 2-2 minta a kilélegzett levegőből az alábbiakban meghatározott időpontokban (összesen n = 12). A mintavétel ideje: t1 az érzéstelenítő bevezetése előtt (n = 2); t2 érzéstelenítés után (n = 2); t3 15 perccel a vágás után (n = 2); t4 30 perccel a vágás után (n = 2); t5 45 perccel a vágás után (n = 2); t6 varrás után (n = 2).

A kilégzett illékony szerves vegyületek elemzése az OS méréshez: A kilélegzett levegőmintákat egy gázkromatográf injektorába helyezik az inert vivőgáz áramba (He). Az anyagokat a kromatogramon eltöltött retenciós idejük és annak tömegspektruma alapján kell hozzárendelni. A kilélegzett lélegzet tömegspektrumának ismeretlen összefüggéseit használják összehasonlítási alapként egy referenciaadatbázissal.

Vérmarkerek mintavétele az OS méréshez: a) mintavételi idők WBC-kre, CRP: t1 = 1 minta a műtét előtt (altatás előtt) és t2 = 1 minta 24 óra elteltével. b) A malondialdehid mintavételi ideje: t1 = 1 minta az érzéstelenítő bevezetése előtt és t2 = 1 minta varrat után.

Szövettani osztályozás: Az explantált vermiform vakbél a Grazi Orvostudományi Egyetem Patológiai Intézetének kórszövettani felújítása lesz. Ott a kórszövettani lelet alapján 4 súlyossági fokban történik a besorolás (akut fokális vakbélgyulladás, akut gennyes vakbélgyulladás, akut gangrénás vakbélgyulladás, perforált vakbélgyulladás).

WBC-mintavétel, CRP: Ezeket a rutin diagnosztika keretében végzik az AA (akut vakbélgyulladás) klinikai megjelenése miatt.

VOC-mintavétel: Minden betegtől 2 db leheletmintát veszünk a kilégzés során, abból veszünk. A minták gyűjtéséhez a vizsgálók egy kapnométerhez közvetlenül csatlakoztatott automatikus mintavevő készüléket használnak. Ez a rendszer mikroextrakcióval (NTME) működik, és lehetővé teszi az alveoláris levegő automatikus mintavételét, azaz a CO2 görbe platóján. A mintákat a Rostocki Orvosi Légzéselemzési és Technológiai Intézethez (RoMBAT) mint együttműködő partnerhez küldjük. Ezt a partnert azért választottuk ki, mert már széleskörű tapasztalattal rendelkezik az oxidatív stressz kezelési módszertanában és tanulmányaiban.

Malondialdehid (MDA) mintavétel: A malondialdehid elemzése a Grazi Orvostudományi Egyetem Orvosi és Kémiai Laboratóriumi Diagnosztikai Klinikai Intézetében történik ultramodern GC-MS módszerrel. Ebből a célból a pácienst a két mérési időhöz rendelik, 2 x 400 μl EDTA plazma felvételét. A második minta csak biztonsági intézkedésként szolgál, ha ismételt mérésekre van szükség. A kapott mintákat 2 órán belül -80 °C-on kell mélyhűteni. . Ezt követően (legkésőbb a következő napon) a mintákat elemezni kell az Intézetbe.

Tervezett értékelés: A statisztikai vizsgálatok SPSS 23.0® programmal történnek. Az adatok grafikus ábrázolása a GraphPad Prism 7® programmal történik. Annak vizsgálatára, hogy a fő célváltozók (VOC-k) eltérnek-e a két csoport lefolyásában, lineáris modelleket használunk ismételt mérésekhez, csoportos (nyílt versus laparoszkópos vakbélműtét) köztes alany tényezőként és mérési idő (t1-t6) mint belső alany. tényező. A normál eloszlástól való eltérések esetén a transzformációkat figyelembe veszik. A másodlagos célpontokat, azaz a szérummarkerek változásait a t1 és t6 időkben, a két csoport között (nyílt kontra laparoszkópos vakbélműtét) Mann-Whitney U-teszttel (nem normális eloszlású adatok) vagy független T-teszttel (normál értékkel) hasonlítják össze. terjesztés). A VOC-k és az oxidatív stressz szérum markerei közötti kapcsolatok megállapítása érdekében a t1 és t6 időpontokban korrelációs elemzést végzünk (az adatoktól függően Pearson vagy Spearman Rho). Minden statisztikai tesztet két oldalon hajtanak végre, és minden p-értéket tisztán feltáró jellegűen értelmeznek.