Oksidatiivisen stressin tutkiminen umpilisäkkeen poistoleikkauksessa - avoin vs. laparoskooppinen lapsuudessa ja nuoruudessa (OSAE)

Tutkimuksen tarkoitus: Suunnitellussa prospektiivisessa satunnaistetussa tutkimuksessa hapettumisstressiä tutkitaan analysoimalla VOC-yhdisteitä (haihtuvat orgaaniset yhdisteet) uloshengityshengityksessä lapsilla, joille tehdään umpilisäkkeen tulehduksen avo- tai laparoskooppinen leikkaus Lääketieteen yliopiston lasten- ja nuorisokirurgian laitoksella. Grazista. Tuloksena oleva parempi käsitys kirurgisen tekniikan vaikutuksista voi a) olla optimaalisen leikkausasetuksen ennakkoehto ja b) mahdollisesti johtaa suosituksiin ennen leikkausta tai perioperatiivisesti antioksidanttisesti vaikuttavista aineista ja c) olla perusta tuleville kirurgisille toimenpiteille.

Tutkimussuunnitelma: Tämä on prospektiivinen satunnaistettu pilottitutkimus lapsilla ja nuorilla, joille tehdään leikkaus akuutin umpilisäkkeen tulehduksen vuoksi. Potilaat, joilla on monimutkainen umpilisäketulehdus, ja potilaat, joilla on intraoperatiivisesti aiheutettu häiriö, suljetaan pois. Tässä tutkimuksessa leikkauksen suorittavat yksinomaan Grazin lääketieteellisen yliopiston lasten ja nuorten kirurgian osaston asiantuntijat, jotka suorittavat sekä avoimia että laparoskooppisia kirurgisia tekniikoita. Mukaan otetaan 40 akuutista umpilisäkkeentulehduksesta kärsivää 6-18-vuotiasta potilasta. Nämä on jaettu 2 ryhmään. Ryhmä 1 (n = 20) laparoskooppisella ja ryhmä 2 (n = 20) avoimella umpilisäkkeen poistolla.

Tutkimukseen osallistuneiden rekrytointi ja korvaus: Vanhemmat/potilaat tiedotetaan tutkimuksesta tietolomakkeen avulla ja heille toimitetaan suostumus, jos he ovat kiinnostuneita. Osallistujat eivät saa korvausta tutkimukseen osallistumisesta.

Näytteenotto uloshengitetyistä VOC-yhdisteistä (haihtuvat orgaaniset yhdisteet) käyttäen NTME:tä (neulaloukun mikrouutto) OS-mittaukseen (hapetusstressi): Näytteiden lukumäärä: 2 näytettä kumpikin uloshengitetystä hengityksestä alla määriteltyinä aikoina (yhteensä n = 12). Näytteenottoaika: t1 ennen anesteetin asettamista (n = 2); t2 anesteetin lisäämisen jälkeen (n = 2); t3 15 minuuttia leikkauksen jälkeen (n = 2); t4 30 minuuttia leikkauksen jälkeen (n = 2); t5 45 minuuttia leikkauksen jälkeen (n = 2); t6 sauman jälkeen (n = 2).

Uloshengitettyjen VOC-yhdisteiden analyysi OS-mittausta varten: Otetut uloshengityshengitysnäytteet asetetaan kaasukromatografin injektoriin inerttiin kantajakaasuvirtaan (He). Aineet luokitellaan niiden kromatogrammissa retentioajan ja sen massaspektrin mukaan. Tuntemattomia yhteyksiä uloshengitetyn hengityksen massaspektrissä käytetään vertailun perustana referenssitietokantaan.

Verimerkkiaineiden näytteenotto OS-mittausta varten: a) näytteenottoajat valkosoluille, CRP: t1 = 1 näyte ennen leikkausta (ennen anesteetin asettamista) ja t2 = 1 näyte 24 tunnin kuluttua. b) malondialdehydin näytteenottoajat: t1 = 1 näyte ennen anesteetin lisäämistä ja t2 = 1 näyte ompeleen jälkeen.

Histopatologinen luokitus: Eksplantoidusta vermiformisesta umpilisäkkeestä tulee histopatologinen kunnostus Grazin lääketieteellisen yliopiston patologian instituutissa. Siellä luokitus tehdään histopatologisten löydösten perusteella 4 vakavuusasteeseen (akuutti fokaalinen umpilisäkkeen tulehdus, akuutti märkivä umpilisäkkeen tulehdus, akuutti gangrenoottinen umpilisäkkeen tulehdus, rei'itetty umpilisäkkeen tulehdus).

WBC-näytteenotto, CRP: Nämä suoritetaan rutiinidiagnostiikan puitteissa AA:n (akuutin umpilisäkkeen tulehdus) kliinisen esityksen vuoksi.

VOC-näytteenotto: Jokaisesta potilaasta otetaan uloshengityksen aikana 2 hengitysnäytettä, jotka otetaan siitä. Näytteiden keräämiseen tutkijat käyttävät automaattista näytteenottolaitetta, joka on kytketty suoraan kapnometriin. Tämä järjestelmä toimii mikrouutolla (NTME) ja mahdollistaa automaattisen näytteenoton alveolaarisesta ilmasta eli CO2-käyrän tasannelta. Näytteet lähetetään Intitute of Rostock Medical Breath Analysis and Technologies (RoMBAT) -yhteistyökumppaniksi. Tämä yhteistyökumppani valittiin, koska sillä on jo laaja kokemus hapetusstressin menetelmistä ja tutkimuksista toiminnan aikana.

Malondialdehydi (MDA) -näytteenotto: Malondialdehydiä analysoidaan Grazin lääketieteellisen yliopiston lääketieteellisen ja kemiallisen laboratoriodiagnostiikan kliinisessä instituutissa ultramodernin GC-MS-menetelmän avulla. Tätä tarkoitusta varten potilaalle määrätään kaksi mittausaikaa 2 x 400 μl EDTA-plasmaa. Toinen näyte toimii vain turvatoimenpiteenä, jos uusintamittaukset ovat tarpeen. Otetut näytteet on pakastettava -80 °C:seen 2 tunnin kuluessa. . Tämän jälkeen (viimeistään seuraavana päivänä) näytteet on analysoitava instituuttiin.

Suunniteltu arviointi: Tilastolliset tutkimukset suoritetaan SPSS 23.0®:lla. Tietojen graafinen esitys suoritetaan GraphPad Prism 7® -sovelluksella. Sen selvittämiseksi, eroavatko pääkohdemuuttujat (VOC) näiden kahden ryhmän välillä, käytetään lineaarisia malleja toistuviin mittauksiin, joissa ryhmä (avoin vs laparoskooppinen umpilisäkkeen poisto) on välikohdetekijä ja mittausaika (t1 - t6) sisäisenä kohteena. tekijä. Jos normaalijakaumasta poikkeaa, muunnokset otetaan huomioon. Toissijaisia ​​kohteita, eli muutoksia seerumin markkereissa ajankohtina t1 ja t6, verrataan kahden ryhmän välillä (avoin vs laparoskooppinen umpilisäkkeen poisto) Mann-Whitneyn U-testillä (tiedot eivät jakautuneet normaalisti) tai riippumattomalla T-testillä (normaalilla). jakelu). Suhteiden määrittämiseksi haihtuvien orgaanisten yhdisteiden ja seerumin oksidatiivisen stressin markkereiden välillä ajankohtina t1 ja t6 suoritetaan korrelaatioanalyysi (riippuen Pearsonin tai Spearman Rho:n tiedoista). Kaikki tilastolliset testit suoritetaan kahdelta puolelta ja kaikki p-arvot tulkitaan puhtaasti eksploatatiivisesti.