Intervention baseret på middelhavsdiæten under graviditeten og de første to år til forbedring af neurologisk udvikling (CONMED)

Det vil blive registreret i ClinicalTrials.gov. Randomisering vil blive udført i blokke med 50 patienter (den sidste af 34 for i alt 534 patienter).

ved at bruge "sample"-funktionen i det statistiske program R version 4.0.2 (R Core Team, 2020).

Studiefag:

Alle voksne gravide kvinder, der deltager i det rutinemæssige første trimesterbesøg fra 4 uger + 0 dages graviditet op til 14 ugers + 6 dages svangerskab, vil være kandidater til at deltage i undersøgelsen.

Undersøgelsen vil blive udført på La Paz Universitetshospital og i tilhørende sundhedscentre.

Estimering af stikprøvestørrelse:

1. Brug af den kognitive udviklingsscore fra Bayleys III-testen efter 2 år: En stikprøvestørrelse på 200 patienter pr. gruppe når en styrke på 80 % for at forkaste nulhypotesen om ligebehandling, når forskellen i befolkningsgennemsnit er μ1 - μ2 = 123,6 - 118,6 = 5,0 med en standardafvigelse på 17,8 for begge grupper (JAMA Netw Open. 2023) og med et signifikansniveau (alfa) på 0,05 ved hjælp af en to-stikprøve t-test med lige store varianser.
2. Brug af den socioemotionelle score fra Bayleys III-testen: En stikprøvestørrelse på 200 patienter pr. gruppe (for diæt- og kontrolgruppen) når en styrke på 80 % til at forkaste nulhypotesen om lige midler, når forskellen i befolkningsgennemsnit er μ1 - μ2 = 108,6 - 103,4 = 5,2 med en standardafvigelse på 18,5 for begge grupper (JAMA Netw Open. 2023) og med et signifikansniveau (alfa) på 0,05 ved hjælp af en tovejs t-testprøver med lige store varianser.

Hvis vi antager et tab på 25 % (10 % ved opfølgning, 15 % svigt af ernæringsintervention), ville vi have brug for en stikprøvestørrelse på 267 patienter pr. gruppe.

Estimatet af stikprøvestørrelsen er mindre ved brug af CBCL med to gentagne mål for udfaldsvariablerne. Antallet af kvinder rekrutteret med en statistisk styrke på 0,8 og en alfaværdi på 0,5 bør være 82 spædbørn pr. gruppe. Forudsat tab på 25%, i alt 107 pr. gruppe.

For objektivt at vurdere overholdelse af middelhavsdiæten (MD), vil følgende blive brugt:

• Kvantificering af totale phenolforbindelser (CFT) i urinprøver: Den samlede mængde phenolforbindelser vil blive bestemt i urinprøver. Til bestemmelse af totale phenolforbindelser i urin vil en procedure blive fulgt. Spektrofotometrisk metode ved brug af Folin-Ciocalteu-reagenset, beskrevet og valideret af Medina-Remón et al. Vi vil udføre en fastfase-præekstraktion ved hjælp af OASIS 30 mg MAX 96-brønds plader for at fjerne interferens med Folin-Ciocalteu-reagenset. Til bestemmelse af CFT vil gallussyren blive brugt som reference. Kreatinin vil blive bestemt ved hjælp af en metode, der tidligere er beskrevet (Jaffé M. et al.) og tilpasset til plader med 96 brønde af Medina-Remón et al. Der vil blive udarbejdet en kalibreringskurve for kreatinin. CFT'er vil blive normaliseret af kreatinin og vil blive udtrykt som mg-ækvivalenter af gallussyre/g kreatinin.
• Magnetisk resonans, analyse af metaboliske fingeraftryk og biomarkører for specifik fødeindtagelse og fødevaregrupper, præcis måling, udviklet og valideret ved Imperial College London (doi:10.1016/S2213-8587(16)30419-3, 10.1038/s43016-020-0093-y).

Undersøgelsesvariable:

1. Bayleys skala version III, der udleder følgende fire skalaer (rå og typiske skalarafledte scores): (a) kognitiv, (b) sprog (receptiv og ekspressiv), (c) motorisk (fin og grov) og (d) socioemotionel.

2. Evaluering af adfærd, eksternaliserende problemer hos barnet (opmærksomhedsunderskud, aggressivitet) og internaliserende lidelser (angst, depression) gennem validerede forældreundersøgelser. Til dette vil de blive brugt:

   • Child Behavior Checklist (CBCL), forældre vil besvare dette spørgeskema.
   • BRIEF-P (Behavior Rating Inventory for Executive Function-Preschool), som er et instrument designet til at evaluere spædbørns eksekutive funktion (EF) som en endofenotypisk indikator for eksternaliserende problemer, efter to år. Fra denne test vil følgende tre indekser blive udtrukket:
   • Inhiberende selvkontrolindeks,
   • Fleksibilitetsindeks
   • Emergent metakognitionsindeks. En psykolog, akkrediteret til Bayleys III, vil udføre den neuro-udviklingsmæssige evaluering, og spørgeskemaerne vil blive evalueret, samt Bayleys-testen blindt for barnets gruppe.
3. Evaluering af sekundære mål, indflydelse fra MD:

3.1. Mikronæringsstofstatus hos barnet. De er relateret til spædbørns ernæringsstatus og kan have en betydelig indvirkning på nervesystemets udvikling og sundhed. Blodbestemmelser af:

• Omega-3 fedtsyrer, især docosahexaensyre (DHA).
• Jern.
• D-vitamin og retinol transportprotein.
• Calcium, fosfor, magnesium, selen og zink. 3.2. Derudover vil blodprøver blive brugt til proteomik og evaluering af epigenetiske ændringer (sidstnævnte også hos faderen).

3.3. Kropssammensætning: Målingen af ​​kropssammensætning vil blive udført ved hjælp af DEXA (røntgenabsorptiometri dual energy). Denne røntgenteknik med meget lav dosis bestemmer kropssammensætning under hensyntagen til 3 komponenter: magert væv, fedt og knogler. De opnåede værdier tillader beregning af fedtmasseindeks (IMG) og magert (IMM) som indikatorer for ernæringsstatus (Mazess RB et. al. 1990). Densitometrien vil erhverve software i GE IDXA Lunar Densitometer: enCORE v17, installeret i Nuclear Medicine Service fra La Paz University Hospital. 3.4. Oxidativ skade på proteiner, lipider og DNA i urin. 3.5. Sammensætning af modermælk, da det er blevet observeret, at indtagelse af kosten kan ændre sammensætningen af ​​modermælk (BM), vil mælkeprøver blive indsamlet fra mødre i diegivningsperioden (ved 3 måneder efter fødslen).

3.6. Mikrobiota. For at kende sammenhængen, som MD-adhærens har med ændringer i mikrobiotaen hos mødre og spædbørn, vil der blive udført analyse af afføring, mælk og skedeekssudat hos moderen og afføring hos barnet til måling af mikrobiota og analyse af kortkædede fedtsyrer i afføring.

Dataindsamling:

Hos moderen:

1. Sociodemografiske data for moderen (alder, højeste opnåede uddannelsesniveau, beskæftigelsessituation og status socioøkonomisk (månedlig nettoløn for familien), fødeland, bopælsgade for at estimere minimumsgennemsnitsindkomst og miljøforurening.
2. Obstetrisk historie: svangerskabsdiabetes, vægtøgning, første, andet og tredje trimester, sygdomme forbundet med graviditet.
3. Moderens prænatal historie: kropsmasseindeks, prægestationsdiabetes.
4. Under graviditet: Fastende glukose/insulin, HOMA; blodtryk, anæmi hos mor, modermedicin.
5. Data om mødres fysiske aktivitetspraksis i tredje trimester af graviditeten gennem Pregnancy Physical Activity Questionnaire (PPAQ)
6. Leveringstype.
7. Postpartum: Mavetaljemål og kropssammensætning (% fedtmasse og mager masse) ved 3 måneders levering.
8. Type af amning.
9. Giftige vaner: ryger før, under graviditet og amning. Indtagelse af alkohol eller andre giftige stoffer før, under graviditet og amning.

Hos spædbarnet:

1. Køn, vægt, længde og hovedomkreds ved fødslen, 3, 9, 18 og 24 måneder og kostdagbog ved 6, 12, 18 og 24 måneders alderen.
2. Forekomst af allergisk sygdom: Diagnoser af atopisk dermatitis, astma, tilbagevendende bronkospasmer og tilstedeværelse af fødevareallergi ved 6, 12, 18 og 24 måneder.
3. Livskvalitet ved to år som rapporteret af forældre ved hjælp af TAPQOL-spørgeskemaet.
4. Mikronæringsstofværdier.
5. Kropssammensætning efter to år målt ved densitometri.
6. Brug af skærme evalueret ved hjælp af SCREENQ, et spørgeskema udfyldt af forældre.
7. Sundhedsvurdering (herunder begivenheder og medicin).
8. Antal søskende og stilling (1., 2....).
9. Eksponering for grønne områder. Alle spørgeskemaer vil blive brugt i deres spanske version.

Statistisk analyse Den statistiske undersøgelse vil blive udført i slutningen af ​​undersøgelsen med intention om at behandle. God vedhæftning er defineret af protokol, såsom forbedring på tre punkter i 17-mad spørgeskemaet hos mødre. Da hovedvariablen er hos småbørn, vil vi overveje god overholdelse af DM i disse i henhold til spørgeskemascore KIDMED ved 24 måneder: ≥8 god overholdelse; 4-7 mellemvedhæftning; ≤3 lav vedhæftning. Som mulige forvirrende variabler er virkningen af ​​amning, defineret som eksklusiv (≥ 6 måneders alder), blandet (< 6 måneders amning med brug af modermælkserstatning) eller kunstig amning; barnets køn og familiernes socioøkonomiske niveau defineret som den månedlige nettoindkomst for familieenheden (<€1.300; €1300 - €1900; €1900 - €2550; €2550 - €3550; €3550 - €4500 > 4500 €).

Beskrivelsen af ​​de kvalitative data vil ske i form af absolutte frekvenser og procenter og dataene kvantitative ved brug af middelværdi og standardafvigelse eller median og interkvartilområde, afhængig af fordelingen af ​​disse data.

Normaliteten af ​​de kontinuerlige variable vil blive undersøgt ved hjælp af Kolmogorov Smirnov-testen.

Til sammenligningen mellem kostgrupperne og de kvalitative variabler vil Pearson Chi-Square testen blive brugt.

For målvariablerne, målt efter to år, der viser forskelle i forhold til diætgrupperne, generaliserede lineære modeller for at justere effekten af ​​kosten for de variabler, der anses for at være forvirrende beskrevet tidligere. Alle statistiske test vil blive betragtet som bilaterale, og som signifikante værdier vil de p lavere 0,05.