Intervention basierend auf der Mittelmeerdiät während der Schwangerschaft und den ersten beiden Jahren zur Verbesserung der neurologischen Entwicklung (CONMED)

Es wird in ClinicalTrials.gov registriert. Die Randomisierung erfolgt in Blöcken von 50 Patienten (der letzte von 34 bei insgesamt 534 Patienten).

unter Verwendung der „Sample“-Funktion des Statistikprogramms R Version 4.0.2 (R Core Team, 2020).

Studienfächer:

Alle erwachsenen schwangeren Frauen, die ab der 4. Woche + 0 Schwangerschaftstage bis zur 14. Woche + 6. Schwangerschaftstage am routinemäßigen Besuch im ersten Trimester teilnehmen, sind Kandidaten für die Teilnahme an der Studie.

Die Studie wird am Universitätskrankenhaus La Paz und in angeschlossenen Gesundheitszentren durchgeführt.

Schätzung der Stichprobengröße:

1. Unter Verwendung des kognitiven Entwicklungsscores des Bayleys-III-Tests nach 2 Jahren: Eine Stichprobengröße von 200 Patienten pro Gruppe erreicht eine Trennschärfe von 80 %, um die Nullhypothese der Mittelwertgleichheit abzulehnen, wenn der Unterschied in den Populationsmittelwerten μ1 – μ2 = 123,6 – beträgt. 118,6 = 5,0 mit einer Standardabweichung von 17,8 für beide Gruppen (JAMA Netw Open. 2023) und mit einem Signifikanzniveau (Alpha) von 0,05 unter Verwendung eines t-Tests bei zwei Stichproben mit gleichen Varianzen.
2. Unter Verwendung des sozioemotionalen Scores des Bayleys-III-Tests: Eine Stichprobengröße von 200 Patienten pro Gruppe (für die Diät- und Kontrollgruppe) erreicht eine Trennschärfe von 80 %, um die Nullhypothese der Mittelwertgleichheit abzulehnen, wenn der Unterschied in den Populationsmittelwerten μ1 beträgt – μ2 = 108,6 – 103,4 = 5,2 mit einer Standardabweichung von 18,5 für beide Gruppen (JAMA Netw Open. 2023) und mit einem Signifikanzniveau (Alpha) von 0,05 unter Verwendung eines Zwei-Wege-T-Tests mit Stichproben gleicher Varianz.

Unter der Annahme eines Verlusts von 25 % (10 % bei der Nachuntersuchung, 15 % Versagen der Ernährungsintervention) bräuchten wir eine Stichprobengröße von 267 Patienten pro Gruppe.

Die Schätzung der Stichprobengröße ist kleiner, wenn CBCL mit zwei wiederholten Messungen für die Ergebnisvariablen verwendet wird. Die Anzahl der rekrutierten Frauen mit einer statistischen Aussagekraft von 0,8 und einem Alpha-Wert von 0,5 sollte 82 Säuglinge pro Gruppe betragen. Unter der Annahme von Verlusten von 25 %, also insgesamt 107 pro Gruppe.

Um die Einhaltung der MITTELMEER-Diät (MD) objektiv zu bewerten, wird Folgendes verwendet:

• Quantifizierung der Gesamtphenolverbindungen (CFT) in Urinproben: Die Gesamtphenolverbindungen werden in Urinproben bestimmt. Für die Bestimmung der gesamten Phenolverbindungen im Urin wird ein Verfahren befolgt. Spektrophotometrische Methode unter Verwendung des Folin-Ciocalteu-Reagenz, beschrieben und validiert von Medina-Remón et al. Wir werden eine Festphasen-Vorextraktion mit OASIS 30 mg MAX 96-Well-Platten durchführen, um Interferenzen mit dem Folin-Ciocalteu-Reagenz zu beseitigen. Für die Bestimmung der CFT wird die Gallussäure als Referenz verwendet. Kreatinin wird mit einer zuvor beschriebenen Methode (Jaffé M. et al.) bestimmt und von Medina-Remón et al. für Platten mit 96 Vertiefungen angepasst. Für Kreatinin wird eine Kalibrierungskurve erstellt. CFTs werden durch Kreatinin normalisiert und als mg-Äquivalente Gallussäure/g Kreatinin ausgedrückt.
• Magnetresonanz, Analyse metabolischer Fingerabdrücke und Biomarker spezifischer Nahrungsaufnahme und Lebensmittelgruppen, präzise Messung, entwickelt und validiert am Imperial College London (doi:10.1016/S2213-8587(16)30419-3, 10.1038/s43016-020-0093-y).

Studienvariablen:

1. Bayleys Skala Version III, die die folgenden vier Skalen ableitet (rohe und typische skalarabgeleitete Werte): (a) kognitiv, (b) Sprache (rezeptiv und ausdrucksstark), (c) motorisch (fein und grob) und (d) sozioemotional.

2. Bewertung des Verhaltens, externalisierender Probleme des Kindes (Aufmerksamkeitsdefizit, Aggressivität) und internalisierender Störungen (Angst, Depression) durch validierte Elternbefragungen. Hierzu werden sie verwendet:

   • Checkliste zum Verhalten von Kindern (CBCL), Eltern werden diesen Fragebogen beantworten.
   • BRIEF-P (Behavior Rating Inventory for Executive Function-Preschool), ein Instrument zur Bewertung der Exekutivfunktion (EF) von Säuglingen als endophänotypischer Indikator für Externalisierungsprobleme nach zwei Jahren. Aus diesem Test werden die folgenden drei Indizes extrahiert:
   • Hemmender Selbstkontrollindex,
   • Flexibilitätsindex
   • Emergenter Metakognitionsindex. Ein für Bayleys III akkreditierter Psychologe wird die Bewertung der neurologischen Entwicklung durchführen und die Fragebögen sowie den Bayleys-Test blind für die Gruppe des Kindes auswerten.
3. Bewertung sekundärer Ziele, Einfluss von MD:

3.1. Mikronährstoffstatus beim Kind. Sie hängen mit dem Ernährungszustand von Säuglingen zusammen und können einen erheblichen Einfluss auf die Entwicklung und Gesundheit des Nervensystems haben. Blutbestimmungen von:

• Omega-3-Fettsäuren, insbesondere Docosahexaensäure (DHA).
• Eisen.
• Transportprotein für Vitamin D und Retinol.
• Kalzium, Phosphor, Magnesium, Selen und Zink. 3.2. Darüber hinaus werden Blutproben zur Proteomik und zur Bewertung epigenetischer Veränderungen (letztere auch beim Vater) verwendet.

3.3. Körperzusammensetzung: Die Messung der Körperzusammensetzung erfolgt mittels DEXA (X-ray Absorptiometry Dual Energy). Diese Röntgentechnik mit sehr niedriger Dosis bestimmt die Körperzusammensetzung unter Berücksichtigung von drei Komponenten: Muskelgewebe, Fett und Knochen. Die erhaltenen Werte ermöglichen die Berechnung von Fettmassenindizes (IMG) und Magermasseindizes (IMM) als Indikatoren für den Ernährungszustand (Mazess RB et. al. 1990). Die Densitometrie wird Software im GE IDXA Lunar Densitometer erwerben: enCORE v17, installiert im Nuclear Medicine Service des La Paz University Hospital. 3.4. Oxidative Schädigung von Proteinen, Lipiden und DNA im Urin. 3.5. Zusammensetzung der Muttermilch: Da beobachtet wurde, dass die Nahrungsaufnahme die Zusammensetzung der Muttermilch (BM) verändern kann, werden den Müttern während der Stillzeit (3 Monate nach der Geburt) Milchproben entnommen.

3.6. Mikrobiota. Um den Zusammenhang zwischen MD-Adhärenz und Veränderungen in der Mikrobiota von Müttern und Säuglingen zu ermitteln, wird eine Analyse von Kot, Milch und vaginalem Exsudat bei der Mutter und des Kots des Kindes durchgeführt, um die Mikrobiota zu messen und kurzkettige Fettsäuren zu analysieren Kot.

Datenerfassung:

Bei der Mutter:

1. Soziodemografische Daten der Mutter (Alter, höchster erreichter Bildungsabschluss, Beschäftigungssituation und sozioökonomischer Status (monatliches Nettogehalt der Familieneinheit), Geburtsland, Wohnstraße zur Abschätzung des Mindestdurchschnittseinkommens und der Umweltbelastung.
2. Geburtsgeschichte: Schwangerschaftsdiabetes, Gewichtszunahme, erstes, zweites und drittes Trimester, mit der Schwangerschaft verbundene Krankheiten.
3. Vorgeburtliche Vorgeschichte der Mutter: Body-Mass-Index, prägestationaler Diabetes.
4. Während der Schwangerschaft: Nüchternglukose/Insulin, HOMA; Blutdruck, Anämie der Mutter, Medikamente für die Mutter.
5. Daten zur körperlichen Aktivitätspraxis von Müttern im dritten Schwangerschaftstrimester anhand des Pregnancy Physical Activity Questionnaire (PPAQ)
6. Art der Lieferung.
7. Postpartal: Messung der Bauchtaille und Körperzusammensetzung (% Fettmasse und Muskelmasse) nach 3 Monaten Entbindung.
8. Art des Stillens.
9. Giftige Gewohnheiten: Rauchen vor, während der Schwangerschaft und Stillzeit. Einnahme von Alkohol oder anderen giftigen Substanzen vor, während der Schwangerschaft und Stillzeit.

Im Säuglings-Kleinkind:

1. Geschlecht, Gewicht, Länge und Kopfumfang bei der Geburt, 3, 9, 18 und 24 Monate und Ernährungstagebuch im Alter von 6, 12, 18 und 24 Monaten.
2. Inzidenz allergischer Erkrankungen: Diagnose von atopischer Dermatitis, Asthma, wiederkehrendem Bronchospasmus und Vorliegen von Nahrungsmittelallergien nach 6, 12, 18 und 24 Monaten.
3. Lebensqualität im Alter von zwei Jahren, wie von Eltern anhand des TAPQOL-Fragebogens angegeben.
4. Mikronährstoffwerte.
5. Körperzusammensetzung nach zwei Jahren, gemessen durch Densitometrie.
6. Die Verwendung von Bildschirmen wurde mithilfe des SCREENQ, einem von Eltern ausgefüllten Fragebogen, bewertet.
7. Gesundheitsbewertung (einschließlich Ereignisse und Medikamente).
8. Anzahl der Geschwister und Position (1., 2....).
9. Exposition gegenüber Grünflächen. Alle Fragebögen werden in ihrer spanischen Version verwendet.

Statistische Analyse Die statistische Studie wird am Ende der Studie nach Behandlungsabsicht durchgeführt. Eine gute Haftung wird durch Protokolle definiert, beispielsweise durch die Verbesserung von drei Punkten im 17-Nahrungsmittel-Fragebogen bei Müttern. Da die Hauptvariable bei Kleinkindern auftritt, werden wir bei diesen eine gute Einhaltung des DM gemäß dem Fragebogenscore KIDMED im Alter von 24 Monaten berücksichtigen: ≥8 gute Einhaltung; 4-7 Zwischenhaftung; ≤3 geringe Haftung. Mögliche Störvariablen sind die Auswirkungen des Stillens, definiert als ausschließliches (≥ 6 Monate altes), gemischtes (< 6 Monate Stillen mit Verwendung von Milchnahrung) oder künstliches Stillen; das Geschlecht des Kindes und das sozioökonomische Niveau der Familien, definiert als das monatliche Nettoeinkommen der Familieneinheit (<1.300 €; 1.300 € – 1.900 €; 1.900 € – 2.550 €; 2.550 € – 3.550 €; 3.550 € – 4.500 €). ; >4500€).

Die Beschreibung der qualitativen Daten erfolgt in Form absoluter Häufigkeiten und Prozentsätze und der quantitativen Daten anhand von Mittelwert und Standardabweichung oder Median und Interquartilbereich, abhängig von der Verteilung dieser Daten.

Die Normalität der kontinuierlichen Variablen wird mit dem Kolmogorov-Smirnov-Test untersucht.

Für den Vergleich zwischen den Diätgruppen und den qualitativen Variablen wird der Pearson Chi-Quadrat-Test verwendet.

Für die nach zwei Jahren gemessenen Zielvariablen, die je nach Ernährungsgruppe Unterschiede aufweisen, wurden verallgemeinerte lineare Modelle verwendet, um den Einfluss der Ernährung auf die zuvor beschriebenen Variablen anzupassen, die als störend gelten. Alle statistischen Tests werden als bilateral betrachtet und als signifikante Werte gelten p unter 0,05.