Anti-MART-1 F5-Zellen plus ALVAC MART-1-Impfstoff zur Behandlung von fortgeschrittenem Melanom

Hintergrund:

• Wir haben humane PBLs konstruiert, um einen Anti-MART-1-T-Zellrezeptor zu exprimieren, der ein humanes Leukozyten-Antigen (HLA-A) 0201-eingeschränktes Epitop erkennt, das aus dem tumorinfiltrierenden Lymphozyten (TIL)-Klon DMF5 stammt.
• Wir konstruierten einen einzigen retroviralen Vektor, der sowohl Alpha- als auch Infinity-Ketten enthält und den genetischen Transfer dieses T-Zell-Rezeptors (TCR) mit hoher Effizienz vermitteln kann, ohne dass eine Selektion durchgeführt werden muss.
• In Co-Kulturen mit HLA-A 0201-positiven Melanomen sezernierten Anti-MART-1 F5 TCR-transduzierte T-Zellen eine signifikante Menge an Interferon (IFN) (jedoch wurde in Kontroll-Co-Kulturen mit Zelllinien keine signifikante Sekretion beobachtet.
• Die Anti-MART-1-F5-TCR-transduzierten peripheren Blutlymphozyten (PBL) könnten HLA-A 0201-positive Tumore effizient abtöten. Es gab wenig oder keine Erkennung normaler Fibroblastenzellen.
• Dieser TCR ist über 10-mal reaktiver mit Melanomzellen als der MART-1-TCR, der bei zwei Patienten mit metastasierendem Melanom eine Tumorregression vermittelte.
• In dieser Studie möchten wir unsere Hypothese testen, dass die Zugabe eines Anti-Tumor-ALVAC-Impfstoffs zu einer klinischen Tumorregression und Persistenz der übertragenen Zellen führt (wie es in Mausmodellen der Fall ist).

Ziele:

Hauptziele:

- Bestimmen Sie, ob die Verabreichung von Anti-MART-1 F5 TCR-modifizierten peripheren Blutlymphozyten, ALVAC Anti-Tumor-Immunisierung und Aldesleukin an Patienten nach einer nicht-myeloablativen, aber lymphoiddepletierenden präparativen Therapie zu einer klinischen Tumorregression bei Patienten mit metastasierendem Melanom führt.

Sekundäre Ziele:

• Bestimmen Sie das In-vivo-Überleben von gentechnisch veränderten TCR-Zellen.
• Bestimmen Sie das Toxizitätsprofil dieses Behandlungsschemas.

Teilnahmeberechtigung:

Patienten, die HLA-A 0201 positiv sind und 18 Jahre oder älter sind, müssen Folgendes haben:

• metastatisches Melanom;
• zuvor erhalten und nicht auf Aldesleukin angesprochen haben oder danach wieder aufgetreten sind;
• Normalwerte für grundlegende Laborwerte.

Patienten haben möglicherweise nicht:

• gleichzeitige schwere medizinische Erkrankungen;
• jede Form von primärer oder sekundärer Immunschwäche;
• schwere Überempfindlichkeit gegen einen der in dieser Studie verwendeten Wirkstoffe;
• Kontraindikationen für die Verabreichung von hochdosiertem Aldesleukin.
• Design:
• Durch Leukapherese gewonnene periphere mononukleäre Blutzellen (PBMC) (ca. 5 mal 10^9 Zellen) werden in Gegenwart von Anti-CD3 (OKT3) und Aldesleukin kultiviert, um das T-Zellwachstum zu stimulieren.
• Die Transduktion wird initiiert, indem ungefähr 10^8 bis 5 x 10^8 Zellen einem retroviralen Vektorüberstand ausgesetzt werden, der die Anti-MART-1-F5-TCR-Gene enthält. Diese transduzierten Zellen werden expandiert und auf ihre Anti-Tumor-Aktivität getestet.
• Sobald nachgewiesen wurde, dass technisch hergestellte PBMC gemäß den strengen Kriterien, die im Analysezertifikat dargelegt sind, biologisch aktiv sind, erhalten die Patienten eine nicht-myeloablative, aber lymphozytendepletierende präparative Behandlung bestehend aus Cyclophosphamid und Fludarabin, gefolgt von einer intravenösen Infusion von ex vivo tumorreaktivem TCR-Gen. transduzierte PBMC plus intravenöses (i.v.) Aldesleukin (720.000 IE/kg alle 8 Stunden für maximal 15 Dosen). Etwa 2 Stunden vor der Zellinfusion werden die Patienten mit ALVAC-Virus immunisiert, das das Tumorantigen exprimiert. Die ALVAC-Immunisierung wird nach 2 Wochen wiederholt.
• Die Patienten werden vier bis sechs Wochen nach der Behandlung und dann monatlich für etwa 3 bis 4 Monate oder bis die Kriterien außerhalb der Studie erfüllt sind, einer vollständigen Beurteilung des Tumors mit körperlicher Untersuchung, Computertomographie (CT) von Brust, Bauch und Becken und klinischer Laboruntersuchung unterzogen.
• Die Studie wird unter Verwendung eines optimalen Phase-II-Designs durchgeführt, in das zunächst 21 auswertbare Patienten aufgenommen werden. Wenn bei 0 oder 1 der 21 Patienten ein klinisches Ansprechen auftritt, werden keine weiteren Patienten aufgenommen, aber wenn 2 oder mehr der ersten 21 aufgenommenen auswertbaren Patienten ein klinisches Ansprechen zeigen, wird die Rekrutierung fortgesetzt, bis insgesamt 41 auswertbare Patienten aufgetreten sind eingeschrieben.
• Das Ziel besteht darin, festzustellen, ob die Kombination aus hochdosiertem Aldesleukin, lymphozytendepletierender Chemotherapie, ALVAC-Immunisierung und Anti-MART-1-F5-TCR-Gen-modifizierten Lymphozyten mit einer klinischen Ansprechrate in Verbindung gebracht werden kann, die 5 Prozent (p0 =0,05) zugunsten einer bescheidenen 20-prozentigen partiellen Remission (PR) plus vollständige Remission (CR)-Rate (p1=0,20).