Células F5 anti-MART-1 mais vacina ALVAC MART-1 para tratar melanoma avançado

Fundo:

• Projetamos PBLs humanos para expressar um receptor de células T anti-MART-1 que reconhece um epítopo restrito de antígenos leucocitários humanos (HLA-A) 0201 derivado do clone DMF5 de linfócitos infiltrantes de tumor (TIL).
• Construímos um único vetor retroviral que contém as cadeias alfa e infinita e pode mediar a transferência genética desse receptor de células T (TCR) com alta eficiência sem a necessidade de realizar qualquer seleção.
• Em co-culturas com melanoma HLA-A 0201 positivo, células T transduzidas por TCR anti-MART-1 F5 secretaram uma quantidade significativa de interferon (IFN)- (mas nenhuma secreção significativa foi observada em co-culturas de controle com linhagens celulares.
• Os linfócitos de sangue periférico (PBL) transduzidos por TCR anti-MART-1 F5 podem matar com eficiência tumores positivos para HLA-A 0201. Houve pouco ou nenhum reconhecimento de células de fibroblastos normais.
• Este TCR é 10 vezes mais reativo com células de melanoma do que o MART-1 TCR que mediou a regressão do tumor em dois pacientes com melanoma metastático.
• Neste estudo, gostaríamos de testar nossa hipótese de que a adição de uma vacina antitumoral ALVAC resultará em regressão clínica do tumor e persistência das células transferidas (como é o caso em modelos murinos).

Objetivos.

Objetivos primários:

- Determinar se a administração de linfócitos de sangue periférico manipulados anti-MART-1 F5 TCR, imunização antitumoral ALVAC e aldesleucina a pacientes após um regime preparativo não mieloablativo, mas depletor de linfóides, resultará em regressão clínica do tumor em pacientes com melanoma metastático.

Objetivos secundários:

• Determine a sobrevivência in vivo de células de engenharia genética TCR.
• Determine o perfil de toxicidade deste regime de tratamento.

Elegibilidade:

Pacientes com HLA-A 0201 positivo e com 18 anos de idade ou mais devem ter:

• melanoma metastático;
• receberam anteriormente e não responderam ou recorreram após aldesleucina;
• valores normais para valores laboratoriais básicos.

Os pacientes podem não ter:

• doenças médicas graves concomitantes;
• qualquer forma de imunodeficiência primária ou secundária;
• hipersensibilidade grave a qualquer um dos agentes utilizados neste estudo;
• contra-indicações para a administração de altas doses de aldesleucina.
• Projeto:
• células mononucleares de sangue periférico (PBMC) obtidas por leucaférese (aproximadamente 5 vezes 10^9 células) serão cultivadas na presença de anti-CD3 (OKT3) e aldesleucina para estimular o crescimento de células T.
• A transdução é iniciada pela exposição de aproximadamente 10^8 a 5 X 10^8 células ao sobrenadante do vetor retroviral contendo os genes anti-MART-1 F5 TCR. Essas células transduzidas serão expandidas e testadas quanto à sua atividade antitumoral.
• Uma vez que as PBMC modificadas demonstrem ser biologicamente ativas de acordo com os critérios estritos descritos no Certificado de Análise, os pacientes receberão um regime preparativo não mieloablativo, mas depletor de linfócitos, consistindo em ciclofosfamida e fludarabina, seguido por infusão intravenosa de ex vivo tumor reativo, gene TCR PBMC transduzido mais aldesleucina intravenosa (IV) (720.000 UI/kg a cada 8 horas por um máximo de 15 doses). Aproximadamente 2 horas antes da infusão celular, os pacientes serão imunizados com o vírus ALVAC expressando o antígeno tumoral. A imunização ALVAC será repetida em 2 semanas.
• Os pacientes serão submetidos a avaliação completa do tumor com exame físico, tomografia computadorizada (TC) do tórax, abdome e pelve e avaliação clínica laboratorial quatro a seis semanas após o tratamento e, em seguida, mensalmente por aproximadamente 3 a 4 meses ou até que os critérios fora do estudo sejam atendidos.
• O estudo será conduzido usando um projeto ideal de fase II, onde inicialmente 21 pacientes avaliáveis ​​serão inscritos. Se 0 ou 1 dos 21 pacientes apresentar uma resposta clínica, nenhum outro paciente será inscrito, mas se 2 ou mais dos primeiros 21 pacientes avaliáveis ​​inscritos apresentarem uma resposta clínica, o acúmulo continuará até que um total de 41 pacientes avaliáveis ​​tenha sido inscrito.
• O objetivo será determinar se a combinação de alta dose de aldesleucina, quimioterapia depletora de linfócitos, imunização ALVAC e linfócitos modificados pelo gene anti-MART-1 F5 TCR pode ser associada a uma taxa de resposta clínica que pode descartar 5 por cento (p0 =0,05) em favor de uma modesta taxa de resposta parcial (PR) de 20% mais resposta completa (CR) (p1=0,20).