Anti-MART-1 F5-cellen plus ALVAC MART-1-vaccin om geavanceerd melanoom te behandelen

Achtergrond:

• We hebben menselijke PBL's ontwikkeld om een ​​anti-MART-1 T-celreceptor tot expressie te brengen die een menselijk leukocytenantigenen (HLA-A) 0201 beperkt epitoop herkent dat is afgeleid van de tumor-infiltrerende lymfocyten (TIL) kloon DMF5.
• We hebben een enkele retrovirale vector geconstrueerd die zowel alfa- als oneindige ketens bevat en die de genetische overdracht van deze T-celreceptor (TCR) met hoge efficiëntie kan mediëren zonder enige selectie uit te voeren.
• In co-kweken met HLA-A 0201-positief melanoom scheidden anti-MART-1 F5 TCR-getransduceerde T-cellen een significante hoeveelheid interferon (IFN)- af (maar er werd geen significante secretie waargenomen in controle-co-kweken met cellijnen.
• De anti-MART-1 F5 TCR-getransduceerde perifere bloedlymfocyten (PBL) kunnen op efficiënte wijze HLA-A 0201-positieve tumoren doden. Er was weinig of geen herkenning van normale fibroblastcellen.
• Deze TCR is meer dan 10 keer reactiever met melanoomcellen dan de MART-1 TCR die tumorregressie medieerde bij twee patiënten met gemetastaseerd melanoom.
• In deze studie willen we onze hypothese testen dat de toevoeging van een anti-tumor ALVAC-vaccin zal resulteren in klinische tumorregressie en persistentie van de overgebrachte cellen (zoals het geval is in muizenmodellen).

Doelstellingen:

Primaire doelen:

-Bepaal of de toediening van anti-MART-1 F5 TCR-gemanipuleerde perifere bloedlymfocyten, ALVAC-antitumorimmunisatie en aldesleukine aan patiënten die een niet-myeloablatief maar lymfoïddepletiepreparatief regime volgen, zal resulteren in klinische tumorregressie bij patiënten met gemetastaseerd melanoom.

Secundaire doelstellingen:

• Bepaal de overleving in vivo van TCR-gen-gemanipuleerde cellen.
• Bepaal het toxiciteitsprofiel van dit behandelingsregime.

Geschiktheid:

Patiënten die HLA-A 0201-positief zijn en 18 jaar of ouder zijn, moeten:

• gemetastaseerd melanoom;
• die eerder zijn ontvangen en niet hebben gereageerd op of zijn teruggekomen na aldesleukin;
• normale waarden voor fundamentele laboratoriumwaarden.

Patiënten hebben mogelijk niet:

• gelijktijdige ernstige medische ziekten;
• elke vorm van primaire of secundaire immunodeficiëntie;
• ernstige overgevoeligheid voor een van de middelen die in dit onderzoek zijn gebruikt;
• contra-indicaties voor toediening van hoge doses aldesleukin.
• Ontwerp:
• perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC) verkregen door leukaferese (ongeveer 5 keer 10^9 cellen) zullen worden gekweekt in aanwezigheid van anti-CD3 (OKT3) en aldesleukine om T-celgroei te stimuleren.
• Transductie wordt geïnitieerd door blootstelling van ongeveer 10 ^ 8 tot 5 x 10 ^ 8 cellen aan retrovirale vectorsupernatant die de anti-MART-1 F5 TCR-genen bevat. Deze getransduceerde cellen zullen worden geëxpandeerd en getest op hun antitumoractiviteit.
• Zodra is aangetoond dat gemanipuleerde PBMC biologisch actief zijn volgens de strikte criteria die zijn uiteengezet in het analysecertificaat, zullen patiënten een niet-myeloablatief maar lymfocytenafbrekend preparatief regime krijgen bestaande uit cyclofosfamide en fludarabine, gevolgd door intraveneuze infusie van ex vivo tumorreactief, TCR-gen. getransduceerde PBMC plus intraveneus (IV) aldesleukine (720.000 IE/kg q8h voor maximaal 15 doses). Ongeveer 2 uur voorafgaand aan celinfusie zullen patiënten worden geïmmuniseerd met het ALVAC-virus dat het tumorantigeen tot expressie brengt. ALVAC-immunisatie wordt na 2 weken herhaald.
• Patiënten ondergaan een volledige evaluatie van de tumor met lichamelijk onderzoek, computertomografie (CT) van de borst, buik en bekken en klinische laboratoriumevaluatie vier tot zes weken na de behandeling en vervolgens maandelijks gedurende ongeveer 3 tot 4 maanden of totdat aan de criteria buiten het onderzoek is voldaan.
• De studie zal worden uitgevoerd met behulp van een fase II optimaal ontwerp waarbij in eerste instantie 21 evalueerbare patiënten zullen worden ingeschreven. Als 0 of 1 van de 21 patiënten een klinische respons ervaart, worden er geen nieuwe patiënten meer ingeschreven, maar als 2 of meer van de eerste 21 evalueerbare patiënten die zijn ingeschreven een klinische respons hebben, wordt de opbouw voortgezet tot er in totaal 41 evalueerbare patiënten zijn opgenomen. ingeschreven.
• Het doel zal zijn om te bepalen of de combinatie van hoge dosis aldesleukine, chemotherapie die de lymfocyten afbreekt, ALVAC-immunisatie en anti-MART-1 F5 TCR-gemanipuleerde lymfocyten kan worden geassocieerd met een klinisch responspercentage dat 5 procent kan uitsluiten (p0 =0,05) ten gunste van een bescheiden partiële respons (PR) plus complete respons (CR) van 20 procent (p1=0,20).