Anti-MART-1 F5 Cells Plus ALVAC MART-1 Vaccino per il trattamento del melanoma avanzato

Sfondo:

• Abbiamo ingegnerizzato PBL umani per esprimere un recettore delle cellule T anti-MART-1 che riconosce un epitopo ristretto di antigeni leucocitari umani (HLA-A) 0201 derivato dal clone DMF5 dei linfociti infiltranti il ​​tumore (TIL).
• Abbiamo costruito un singolo vettore retrovirale che contiene sia catene alfa che infinite e può mediare il trasferimento genetico di questo recettore delle cellule T (TCR) con alta efficienza senza la necessità di eseguire alcuna selezione.
• Nelle co-colture con melanoma HLA-A 0201 positivo, le cellule T trasdotte anti-MART-1 F5 TCR hanno secreto una quantità significativa di interferone (IFN)-(ma nessuna secrezione significativa è stata osservata nelle co-colture di controllo con linee cellulari.
• I linfociti del sangue periferico (PBL) trasdotti anti-MART-1 F5 TCR potrebbero uccidere efficacemente i tumori HLA-A 0201 positivi. C'era poco o nessun riconoscimento delle normali cellule dei fibroblasti.
• Questo TCR è oltre 10 volte più reattivo con le cellule di melanoma rispetto al MART-1 TCR che ha mediato la regressione del tumore in due pazienti con melanoma metastatico.
• In questo studio vorremmo testare la nostra ipotesi che l'aggiunta di un vaccino ALVAC antitumorale risulterà nella regressione clinica del tumore e nella persistenza delle cellule trasferite (come nel caso dei modelli murini).

Obiettivi:

Obiettivi primari:

-Determinare se la somministrazione di linfociti del sangue periferico anti-MART-1 F5 TCR, immunizzazione antitumorale ALVAC e aldesleuchina a pazienti che seguono un regime preparativo non mieloablativo ma depletivo linfoide risulterà in una regressione clinica del tumore in pazienti con melanoma metastatico.

Obiettivi secondari:

• Determinare la sopravvivenza in vivo delle cellule ingegnerizzate con geni TCR.
• Determinare il profilo di tossicità di questo regime di trattamento.

Eleggibilità:

I pazienti che sono HLA-A 0201 positivi e di età pari o superiore a 18 anni devono avere:

• melanoma metastatico;
• ricevuto in precedenza e non ha risposto o si è ripresentato dopo aldesleuchina;
• valori normali per valori di laboratorio di base.

I pazienti potrebbero non avere:

• malattie mediche importanti concomitanti;
• qualsiasi forma di immunodeficienza primaria o secondaria;
• grave ipersensibilità a uno qualsiasi degli agenti utilizzati in questo studio;
• controindicazioni per la somministrazione di alte dosi di aldesleuchina.
• Progetto:
• cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) ottenute per leucaferesi (circa 5 volte 10^9 cellule) saranno coltivate in presenza di anti-CD3 (OKT3) e aldesleuchina per stimolare la crescita delle cellule T.
• La trasduzione viene avviata dall'esposizione di circa 10^8 a 5 X 10^8 cellule al supernatante del vettore retrovirale contenente i geni F5 TCR anti-MART-1. Queste cellule trasdotte saranno espanse e testate per la loro attività antitumorale.
• Una volta dimostrato che le PBMC ingegnerizzate sono biologicamente attive secondo i rigorosi criteri delineati nel certificato di analisi, i pazienti riceveranno un regime preparativo non mieloablativo ma di deplezione dei linfociti costituito da ciclofosfamide e fludarabina seguito da infusione endovenosa di reattivo tumorale ex vivo, gene TCR- PBMC trasdotte più aldesleuchina per via endovenosa (IV) (720.000 UI/kg q8h per un massimo di 15 dosi). Circa 2 ore prima dell'infusione cellulare, i pazienti saranno immunizzati con il virus ALVAC che esprime l'antigene tumorale. L'immunizzazione ALVAC sarà ripetuta a 2 settimane.
• I pazienti saranno sottoposti a valutazione completa del tumore con esame fisico, tomografia computerizzata (TC) del torace, addome e pelvi e valutazione clinica di laboratorio da quattro a sei settimane dopo il trattamento e poi una volta al mese per circa 3-4 mesi o fino a quando i criteri di studio non saranno soddisfatti.
• Lo studio sarà condotto utilizzando un disegno ottimale di fase II in cui inizialmente verranno arruolati 21 pazienti valutabili. Se 0 o 1 dei 21 pazienti manifesta una risposta clinica, non verranno arruolati altri pazienti, ma se 2 o più dei primi 21 pazienti valutabili arruolati hanno una risposta clinica, l'arruolamento continuerà fino a quando non saranno stati selezionati un totale di 41 pazienti valutabili iscritti.
• L'obiettivo sarà determinare se la combinazione di aldesleuchina ad alte dosi, chemioterapia di deplezione dei linfociti, immunizzazione ALVAC e linfociti ingegnerizzati anti-MART-1 F5 TCR sia in grado di essere associata a un tasso di risposta clinica che possa escludere il 5% (p0 =0,05) a favore di un modesto tasso di risposta parziale (PR) più il 20% di risposta completa (CR) (p1=0,20).