Клетки Anti-MART-1 F5 плюс вакцина ALVAC MART-1 для лечения прогрессирующей меланомы

Задний план:

• Мы сконструировали PBL человека для экспрессии Т-клеточного рецептора против MART-1, который распознает эпитоп, ограниченный антигенами лейкоцитов человека (HLA-A) 0201, полученный из клона DMF5 инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL).
• Мы сконструировали единственный ретровирусный вектор, который содержит как альфа-, так и бесконечные цепи и может опосредовать генетический перенос этого Т-клеточного рецептора (TCR) с высокой эффективностью без необходимости проведения какой-либо селекции.
• В кокультурах с HLA-A 0201-положительной меланомой Т-клетки, трансдуцированные анти-MART-1 F5 TCR, секретировали значительное количество интерферона (IFN)- (но в контрольных кокультурах с клеточными линиями значительной секреции не наблюдалось.
• Лимфоциты периферической крови (PBL), трансдуцированные анти-MART-1 F5 TCR, могут эффективно уничтожать HLA-A 0201-положительные опухоли. Распознавание нормальных клеток фибробластов было незначительным или отсутствовало вообще.
• Этот TCR более чем в 10 раз более реактивен с клетками меланомы, чем TCR MART-1, который опосредовал регрессию опухоли у двух пациентов с метастатической меланомой.
• В этом испытании мы хотели бы проверить нашу гипотезу о том, что добавление противоопухолевой вакцины ALVAC приведет к клинической регрессии опухоли и сохранению перенесенных клеток (как в случае с мышиными моделями).

Цели:

Основные цели:

-Определить, приведет ли введение анти-MART-1 F5 TCR-инженерных лимфоцитов периферической крови, противоопухолевой иммунизации ALVAC и альдеслейкина пациентам после немиелоаблативного, но лимфоидного подготовительного режима к клинической регрессии опухоли у пациентов с метастатической меланомой.

Второстепенные цели:

• Определить выживаемость клеток с генной инженерией TCR in vivo.
• Определите профиль токсичности этой схемы лечения.

Право на участие:

Пациенты с положительным результатом на HLA-A 0201 в возрасте 18 лет и старше должны иметь:

• метастатическая меланома;
• ранее получали и не реагировали на альдеслейкин или рецидивировали после него;
• нормальные значения основных лабораторных показателей.

У пациентов может отсутствовать:

• сопутствующие серьезные медицинские заболевания;
• любая форма первичного или вторичного иммунодефицита;
• тяжелая гиперчувствительность к любому из агентов, используемых в этом исследовании;
• противопоказания для введения высоких доз альдеслейкина.
• Дизайн:
• мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC), полученные с помощью лейкафереза ​​(примерно 5×10^9 клеток), будут культивировать в присутствии анти-CD3 (OKT3) и альдеслейкина для стимуляции роста Т-клеток.
• Трансдукция инициируется воздействием приблизительно от 10 8 до 5 X 10 8 клеток на супернатант ретровирусного вектора, содержащий гены анти-MART-1 F5 TCR. Эти трансдуцированные клетки будут размножены и проверены на их противоопухолевую активность.
• После подтверждения биологической активности сконструированных РВМС в соответствии со строгими критериями, изложенными в Сертификате анализа, пациенты будут получать немиелоаблативную, но истощающую лимфоциты препаративную схему, состоящую из циклофосфамида и флударабина с последующим внутривенным вливанием ex vivo опухолереактивного TCR-гена. трансдуцированные РВМС плюс внутривенный (в/в) альдеслейкин (720 000 МЕ/кг каждые 8 ​​часов, максимум 15 доз). Приблизительно за 2 часа до инфузии клеток пациентов иммунизируют вирусом ALVAC, экспрессирующим опухолевый антиген. Иммунизация ALVAC будет повторена через 2 недели.
• Пациенты проходят полную оценку опухоли с физическим осмотром, компьютерной томографией (КТ) грудной клетки, брюшной полости и таза и клинико-лабораторным обследованием через четыре-шесть недель после лечения, а затем ежемесячно в течение примерно 3-4 месяцев или до тех пор, пока не будут соблюдены критерии вне исследования.
• Исследование будет проводиться с использованием оптимального дизайна фазы II, в который первоначально будет включен 21 поддающийся оценке пациент. Если у 0 или 1 из 21 пациента наблюдается клинический ответ, то дальнейшие пациенты не будут зачислены, но если у 2 или более из первых 21 зарегистрированных пациентов, поддающихся оценке, будет клинический ответ, то набор будет продолжаться до тех пор, пока не будет в общей сложности 41 поддающийся оценке пациент. зачислен.
• Цель будет заключаться в том, чтобы определить, может ли комбинация высокой дозы альдеслейкина, химиотерапии, истощающей лимфоциты, иммунизации ALVAC и анти-MART-1 F5 TCR-гена, быть связана с частотой клинического ответа, которая может исключить 5 процентов (p0 = 0,05) в пользу скромного 20-процентного частичного ответа (PR) плюс частота полного ответа (CR) (p1 = 0,20).