Shigella Sonnei OSPC-rDT-Konjugatimpfstoff

Der Wirkstoff dieses Shigella sonnei O-SP-Core-Konjugat-Impfstoffs ist ein Saccharid-Protein-Konjugat, das aus einem Fragment von S. sonnei LPS besteht. Die Saccharidkomponente besteht aus durchschnittlich 3,5 Wiederholungseinheiten des O-SP plus der Kernregion des LPS (O-SPC). Das O-SPC ist kovalent an die ungiftige rekombinante Diphtherietoxin-Mutante (rDT) gebunden.

Das Ziel dieser Phase der Studie besteht darin, festzustellen, ob dieser Impfstoff sicher ist und bei Erwachsenen eine IgG-Antikörpertyp-spezifische Immunität gegen Shigellose induzieren kann. Das übergeordnete Ziel besteht darin, festzustellen, ob dieser Impfstoff höhere Mengen an IgG-Antikörpern hervorrufen kann als die vorherigen experimentellen Impfstoffe, die mit O-SP in voller Länge hergestellt wurden und sich bei Kindern im Alter von mindestens 3 Jahren als > 70 % wirksam erwiesen haben. Es wird erwartet, dass höhere Konzentrationen von IgG-Anti-O-SP bei jüngeren Kindern eine typspezifische Immunität gegen Shigellose induzieren.

In Israel werden 60 gesunde Erwachsene im Alter von 18 bis 49 Jahren rekrutiert. Freiwillige werden nach dem Zufallsprinzip mit einer i.m.-Impfung geimpft. Injektion von 10 oder 25 µg des Prüfkonjugatimpfstoffs. Lokale und systemische Reaktionen werden 30 Minuten lang beobachtet, und die Freiwilligen werden angewiesen, ihre Temperatur zu messen und die Injektionsstelle auf Rötungen und Schwellungen zu untersuchen und jeweils 6 Stunden und 7 Tage lang täglich nach der Impfung einen Fragebogen auszufüllen. Die Freiwilligen werden die Klinik 24 oder 48 Stunden nach der Injektion und jederzeit auf Wunsch aufsuchen. Die Studie beginnt mit 5 Freiwilligen, denen die 10-ug-Dosis injiziert wird. Wenn keine schwerwiegenden Nebenwirkungen auftreten, folgen 5 Freiwilligen, denen die 25-ug-Dosis injiziert wird. Wenn bei einem der 5 Freiwilligen in einer der Gruppen eine schwere Nebenwirkung auftritt, wird 5 weiteren Personen diese Dosis injiziert. Wenn keine schwerwiegenden Nebenwirkungen auftreten, wird die Studie fortgesetzt. Tritt eine weitere schwerwiegende Reaktion auf, wird die Studie abgebrochen und vom IRB und der FDA neu bewertet.

Durch die Impfung induzierte Antikörper werden 1 und 6 Monate nach der Immunisierung gemessen und mit denen verglichen, die durch unsere früheren S. sonnei-Konjugatimpfstoffe hervorgerufen wurden.

Es gibt zahlreiche Hinweise darauf, dass ein kritischer Serum-IgG-Antikörperspiegel gegen die O-spezifische Polysacchariddomäne von LPS typspezifische Immunität gegen S. sonnei und andere Shigellen verleiht:

1. Shigellose wird bei Säuglingen bis zum Alter von 4–6 Monaten selten beobachtet. Die offensichtlichste Erklärung hierfür ist, dass mütterlicherseits gewonnenes Serum-IgG für diese Immunität sorgt;
2. Es kommt zu einer altersbedingten Entwicklung von IgG-Anti-LPS-Antikörpern, die in vielen Fällen nicht durch die homologen Bakterien, sondern durch nicht pathogene, kreuzreagierende Darmbakterien induziert wird;
3. Die höchste Inzidenz, Morbidität und Mortalität treten im Alter von 6 Monaten bis 6 Jahren auf, wenn der maternale Serum-Anti-O-SP nachgelassen hat und die natürlichen Antikörper noch nicht aufgetreten sind;
4. Eine Injektion eines S. sonnei-rEPA-Konjugats zeigte bei Soldaten der israelischen Streitkräfte einen signifikanten Schutz gegen Shigellose. Impfstoffe, die eine Shigellose entwickelten, zeigten deutlich geringere Serum-IgG-Reaktionen auf das homologe LPS als diejenigen, die dies nicht taten. Der durch den Konjugatimpfstoff induzierte hohe Antikörperspiegel weist auf die positive Korrelation zwischen den Serum-IgG-Anti-LPS-Spiegeln und der Immunität gegen eine S. sonnei-Infektion hin;
5. Im Anschluss an Phase-1- und Phase-2-Studien, die Sicherheit und altersbedingte Immunogenität zeigten, wurde eine doppelblinde, randomisierte und impfstoffkontrollierte Phase-3-Bewertung von S. sonnei und S. flexneri Typ 2a O-spezifischen Polysaccharid (O-SP)-Proteinkonjugaten durchgeführt durchgeführt unter 1-4-Jährigen in Israel.

Für Empfänger des S. sonnei-Konjugats wurde eine Wirksamkeit von 71,1 % bei 3- bis 4-jährigen Empfängern gezeigt, für Empfänger von S. flexneri 2a wurde keine Wirksamkeit gezeigt. Bei den 1- bis 3-Jährigen gab es für keinen der beiden Impfstoffe eine statistisch signifikante Wirksamkeit. Die Serum-IgG-Anti-O-SP-Spiegel waren entsprechend dem Impfstoff, den die Kinder erhielten, erhöht, aber G.M. Mehrere Monate nach der letzten Injektion sanken die Werte rapide. Unsere Interpretation ist, dass die altersbedingte Wirksamkeit der Shigella-Konjugate auf die konjugatinduzierten O-SP-Antikörperspiegel zurückzuführen ist. Dementsprechend haben wir eine Methode entwickelt, um die Immunogenität der Konjugate zu erhöhen, um sich den Antikörperspiegeln israelischer Soldaten anzunähern, die nachweislich durch unser S. sonnei O-SP geschützt sind.

Aus S. sonnei-LPS wurden niedermolekulare O-SP-Kernfragmente (O-SPC) isoliert und mit ihren reduzierenden Enden an das Trägerprotein gebunden. Die O-SPC-Konjugate verwendeten Oximbindungen zwischen den terminalen Kdo-Resten an den reduzierenden Enden der S. sonnei-Saccharide und an den Träger gebundenen Aminooxy-Linkern. Die Kupplungsreaktion wurde bei neutralem pH-Wert und Raumtemperatur durchgeführt. Das Trägerprotein war eine ungiftige rekombinante Diphtherietoxin-Mutante. Die durch dieses neue S. sonnei-O-SPC-Konjugat bei jungen aus der Zucht stammenden Mäusen induzierten IgG-Antikörperspiegel waren deutlich höher als die durch die O-SP-Konjugate hervorgerufenen.