Shigella Sonnei OSPC-rDT conjugaatvaccin

Het werkzame bestanddeel van dit Shigella sonnei O-SP-kernconjugaatvaccin is een saccharide-eiwitconjugaat samengesteld uit een fragment van S. sonnei LPS. De sacharidecomponent bestaat uit gemiddeld 3,5 herhalende eenheden van de O-SP plus het kerngebied van de LPS (O-SPC). De O-SPC is covalent gebonden aan de niet-toxische recombinante difterietoxinemutant (rDT).

Het doel van deze fase van de studie is om te bepalen of dit vaccin veilig is en IgG-antilichaamtypespecifieke immuniteit tegen shigellose bij volwassenen kan induceren. Het algemene doel is om te bepalen of dit vaccin hogere niveaus van IgG-antilichaam kan opwekken dan de eerdere experimentele vaccins gemaakt met O-SP van volledige lengte, waarvan is aangetoond dat het > 70% werkzaam is bij kinderen van meer dan of gelijk aan 3 jaar. Hogere niveaus van IgG anti-O-SP zullen naar verwachting typespecifieke immuniteit tegen shigellose induceren bij jongere kinderen.

Zestig 18-49 jaar oude gezonde volwassenen zullen in Israël worden aangeworven. Vrijwilligers worden willekeurig gevaccineerd met één i.m. injectie van 10 of 25 µg van het onderzoeksconjugaatvaccin. Lokale en systemische reacties zullen na 30 minuten worden waargenomen en de vrijwilligers zullen worden geïnstrueerd om hun temperatuur op te nemen en de injectieplaats te onderzoeken op roodheid en zwelling en om 6 uur en dagelijks gedurende 7 dagen na vaccinatie een vragenlijst in te vullen. De vrijwilligers bezoeken de kliniek 24 of 48 uur na de injectie en op elk gewenst moment. De studie zal beginnen met 5 vrijwilligers die een dosis van 10 µg kregen toegediend en die, als er geen ernstige bijwerkingen optreden, gevolgd worden door 5 vrijwilligers die een dosis van 25 µg kregen toegediend. Als een ernstige bijwerking optreedt bij 1 van de 5 vrijwilligers in een van beide groepen, zullen er nog 5 met die dosis worden geïnjecteerd. Als er geen ernstige bijwerkingen zijn, wordt het onderzoek voortgezet. Als er nog één ernstige reactie is, wordt de studie stopgezet en opnieuw geëvalueerd door de IRB en de FDA.

Vaccin-geïnduceerde antilichamen zullen worden gemeten op 1 en 6 maanden na immunisatie, en worden vergeleken met die opgewekt door onze eerdere S. sonnei-conjugaatvaccins.

Er is een grote hoeveelheid bewijs dat een kritiek niveau van serum IgG-antilichaam tegen het O-specifieke polysaccharidedomein van LPS typespecifieke immuniteit verleent aan S. sonnei evenals aan andere Shigella:

1. Shigellose wordt zelden waargenomen bij zuigelingen tot de leeftijd van 4-6 maanden. De meest voor de hand liggende verklaring hiervoor is dat van de moeder afkomstig IgG-serum voor deze immuniteit zorgt;
2. Er is een leeftijdsgebonden ontwikkeling van IgG-anti-LPS-antilichamen die in veel gevallen niet wordt geïnduceerd door de homologe bacteriën maar door niet-pathogene kruisreagerende darmbacteriën;
3. De hoogste incidentie, morbiditeit en mortaliteit treden op tijdens de leeftijd van 6 maanden tot 6 jaar wanneer het van de moeder afkomstige serum anti-O-SP is afgenomen en de van nature afkomstige antilichamen nog niet zijn verschenen;
4. Eén injectie met een S. sonnei-rEPA-conjugaat toonde significante bescherming tegen shigellose bij soldaten van de Israëlische Defensiemacht. Gevaccineerden die shigellose ontwikkelden, vertoonden significant lagere serum-IgG-responsen op het homologe LPS dan degenen die dat niet deden.
5. Na fase 1- en fase 2-onderzoeken die veiligheid en leeftijdsgebonden immunogeniciteit aantoonden, werd een dubbelblinde, gerandomiseerde en vaccingecontroleerde fase 3-evaluatie van S. sonnei en S. flexneri type 2a O-specifieke polysaccharide (O-SP) eiwitconjugaten uitgevoerd. uitgevoerd onder 1-4-jarigen in Israël.

Voor ontvangers van het S. sonnei-conjugaat werd 71,1% werkzaamheid aangetoond bij 3-4-jarige ontvangers, geen werkzaamheid werd aangetoond voor ontvangers van S. flexneri 2a. Er was voor geen van beide vaccins een statistisch significante werkzaamheid bij de 1-3-jarigen. Niveaus van serum IgG anti-O-SP waren verhoogd volgens het vaccin dat de kinderen kregen, maar G.M. niveaus daalden snel enkele maanden na de laatste injectie. Onze interpretatie is dat de leeftijdsgerelateerde werkzaamheid van de Shigella-conjugaten te wijten was aan de conjugaat-geïnduceerde O-SP-antilichaamniveaus. Dienovereenkomstig hebben we een methode ontwikkeld om de immunogeniciteit van de conjugaten te verhogen om de antilichaamniveaus van Israëlische soldaten te benaderen waarvan is aangetoond dat ze worden beschermd door onze S. sonnei O-SP.

O-SP-kern (O-SPC)-fragmenten met laag molecuulgewicht werden geïsoleerd uit S. sonnei LPS en met hun reducerende uiteinden aan het dragereiwit gebonden. De O-SPC-conjugaten maakten gebruik van oximbindingen tussen de terminale Kdo-residuen aan de reducerende uiteinden van de S. sonnei-sacchariden en aminooxylinkers gebonden aan de drager. De koppelingsreactie werd uitgevoerd bij een neutrale pH en kamertemperatuur. Het dragereiwit was een niet-toxische recombinante difterietoxinemutant. IgG-antilichaamniveaus geïnduceerd in jonge gekruiste muizen door dit nieuwe S. sonnei O-SPC-conjugaat waren significant hoger dan die opgewekt door de O-SP-conjugaten.