Shigella Sonnei OSPC-rDT Vacina Conjugada

O ingrediente ativo desta vacina Shigella sonnei O-SP-core conjugado é um conjugado sacarídeo-proteína composto por um fragmento de S. sonnei LPS. O componente sacarídeo consiste em uma média de 3,5 unidades repetidas do O-SP mais a região central do LPS (O-SPC). O O-SPC está ligado covalentemente ao mutante da toxina diftérica recombinante não tóxica (rDT).

O objetivo desta fase do estudo é determinar se esta vacina é segura e pode induzir imunidade específica do tipo de anticorpo IgG para shigelose em adultos. O objetivo geral é determinar se esta vacina pode provocar níveis mais elevados de anticorpo IgG do que as vacinas experimentais anteriores feitas com O-SP de comprimento total, que demonstraram ser > 70% eficazes em crianças maiores ou iguais a 3 anos de idade. Espera-se que níveis mais altos de IgG anti-O-SP induzam imunidade tipo específica à shigelose em crianças mais novas.

Sessenta adultos saudáveis ​​de 18 a 49 anos serão recrutados em Israel. Os voluntários serão vacinados aleatoriamente com uma vacina i.m. injeção de 10 ou 25 ug da vacina experimental conjugada. Reações locais e sistêmicas serão observadas em 30 minutos, e os voluntários serão instruídos a medir a temperatura e examinar o local da injeção quanto a vermelhidão e inchaço e preencher um questionário às 6 horas e diariamente por 7 dias após a vacinação. Os voluntários visitarão a clínica 24 ou 48 horas após a injeção e a qualquer momento que solicitarem. O estudo começará com 5 voluntários injetados com a dose de 10 ug a ser seguido, se não ocorrerem reações adversas graves, por 5 voluntários injetados com a dose de 25 ug. Se ocorrer uma reação adversa grave em 1 dos 5 voluntários em qualquer um dos grupos, mais 5 serão injetados com essa dose. Se não houver reações adversas graves, o estudo prosseguirá. Se houver mais uma reação grave, o estudo será interrompido e reavaliado pelo IRB e pela FDA.

Os anticorpos induzidos pela vacina serão medidos 1 e 6 meses após a imunização e comparados com os produzidos pelas nossas vacinas conjugadas S. sonnei anteriores.

Há um conjunto de evidências de que um nível crítico de anticorpo IgG sérico para o domínio polissacarídeo O-específico de LPS confere imunidade tipo-específica a S. sonnei, bem como a outros Shigella:

1. Shigelose é raramente observada em lactentes até a idade de 4-6 meses. A explicação mais óbvia para isso é que a IgG sérica de origem materna fornece essa imunidade;
2. Há um desenvolvimento relacionado à idade de anticorpos IgG anti-LPS que, em muitos casos, não é induzido por bactérias homólogas, mas por bactérias entéricas não patogênicas de reação cruzada;
3. A maior incidência, morbidade e mortalidade ocorrem durante os 6 meses aos 6 anos de idade, quando o anti-O-SP sérico de origem materna diminuiu e os anticorpos de origem natural ainda não apareceram;
4. Uma injeção de um conjugado S. sonnei-rEPA mostrou proteção significativa contra shigelose em soldados da Força de Defesa de Israel. Os vacinados que desenvolveram shigelose mostraram respostas séricas de IgG significativamente mais baixas ao LPS homólogo do que aqueles que não desenvolveram.
5. Após os estudos de Fase 1 e Fase 2 que mostraram segurança e imunogenicidade relacionada à idade, uma avaliação de Fase 3 duplo-cega, randomizada e controlada por vacina de S. sonnei e S. flexneri tipo 2a O-specific polissacarídeo (O-SP) conjugados de proteína foi conduzido entre crianças de 1 a 4 anos em Israel.

Para receptores do conjugado de S. sonnei, 71,1% de eficácia foi demonstrada entre receptores de 3-4 anos de idade, nenhuma eficácia foi demonstrada para receptores de S. flexneri 2a. Não houve eficácia estatisticamente significativa para nenhuma das vacinas nas crianças de 1 a 3 anos. Os níveis séricos de IgG anti-O-SP foram elevados de acordo com a vacina que as crianças receberam, mas G.M. os níveis diminuíram rapidamente vários meses após a última injeção. Nossa interpretação é que a eficácia relacionada à idade dos conjugados de Shigella foi devida aos níveis de anticorpos O-SP induzidos pelo conjugado. Consequentemente, desenvolvemos um método para aumentar a imunogenicidade dos conjugados para aproximar os níveis de anticorpos de soldados israelenses que se mostraram protegidos por nosso S. sonnei O-SP.

Fragmentos O-SP-core (O-SPC) de baixa massa molecular foram isolados de S. sonnei LPS e ligados por suas extremidades redutoras à proteína carreadora. Os conjugados O-SPC usaram ligações de oxima entre os resíduos Kdo terminais nas extremidades redutoras dos sacarídeos de S. sonnei e ligantes aminooxi ligados ao transportador. A reação de acoplamento foi realizada em pH neutro e temperatura ambiente. A proteína transportadora era um mutante de toxina diftérica recombinante não tóxica. Os níveis de anticorpo IgG induzidos em camundongos jovens endogâmicos por este novo conjugado S. sonnei O-SPC foram significativamente maiores do que aqueles induzidos pelos conjugados O-SP.