Lipotoxicidad posprandial y enfermedad del hígado graso no alcohólico (LITONAS)

Los factores que impulsan la progresión de la esteatosis (NAFL) a la esteatohepatitis (NASH) en pacientes con enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD) siguen siendo en gran parte desconocidos. Datos considerables ahora indican que la esteatosis per se no es un evento hepatotóxico y puede representar, de hecho, un mecanismo de protección contra la toxicidad inducida por ácidos grasos libres (FFA). los investigadores demostraron previamente que las células de Kupffer de ratones NASH acumulan más lípidos tóxicos (ceramidas, diacilgliceroles, esfingolípidos) que mejoran su polarización proinflamatoria. Por lo tanto, la "calidad" de los lípidos acumulados en lugar de la "cantidad" puede desempeñar un papel central en la progresión de NAFLD. Este es un estudio comparativo piloto que tiene como objetivo evaluar la presencia de lípidos tóxicos (como ácidos grasos libres, ceramidas, diacilgliceroles, esfingolípidos) en estado posprandial después de la ingestión de una "dieta occidental" en pacientes con NAFL y NASH. Los resultados secundarios fueron: evaluar la relación entre los lípidos circulantes posprandiales y los marcadores de daño hepático y las citocinas proinflamatorias; para evaluar la hepatotoxicidad de los lípidos posprandiales in vitro. Se reclutará un total de 24 pacientes consecutivos (grupo 1: 12 pacientes con NAFL; grupo 2: 12 pacientes con NASH) con NAFLD comprobado por biopsia (biopsia de hígado < 6 meses). Se realizará una evaluación dietética de las 2 semanas anteriores. Se recopilarán datos antropométricos detallados (índice de masa corporal, circunferencia de cintura y cadera, altura abdominal, pliegues cutáneos) y parámetros metabólicos séricos (perfil lipídico estándar, niveles de lipoproteínas, glucosa plasmática en ayunas, niveles de insulina, niveles de péptido C, hemoglobina A1c). ser evaluado. Después de un ayuno nocturno de 12 horas, los pacientes se someterán a una prueba oral de "dieta occidental" que consiste en la ingestión de una comida rica en grasas saturadas, azúcar refinada y fructosa llamada "dieta occidental" (800 kcal/comida). Se extraerán muestras de sangre en ayunas y luego 2, 4, 6 y 8 horas después de la ingestión de la comida estándar. En cada ocasión, las muestras de plasma y suero se almacenarán a -80 °C para su posterior análisis. La lipidómica se utilizará para cuantificar cada clase de lípidos plasmáticos (lípidos neutros, fosfolípidos y ésteres metílicos de ácidos grasos). Los niveles séricos de citocinas se evaluarán utilizando tecnología de ensayo múltiple. Se evaluarán marcadores de daño hepático (aminotransferasas, fragmentos de queratina 18, microARN-122) en el suero. Los hepatocitos se cultivarán con plasma de pacientes con NAFL o NASH y se incubarán durante la noche. La hepatotoxicidad in vitro se evaluará mediante el ensayo TUNEL, el ensayo MTT y el ensayo de liberación de LDH. los investigadores prevén que se producirá inflamación junto con la muerte de los hepatocitos en pacientes con NAFLD que desarrollen cambios específicos de los lípidos plasmáticos posprandiales con un aumento de los niveles de lípidos tóxicos. Dichos pacientes pueden desarrollar lesiones hepáticas más graves (inflamación, fibrosis/cirrosis) y beneficiarse de las intervenciones. La identificación de un perfil de lípidos plasmáticos tóxicos puede ayudar a elegir la dieta adecuada para prevenir la formación de lípidos nocivos. La identificación de una firma de lípidos plasmáticos posprandiales tóxicos específica de la hepatotoxicidad también puede servir para desarrollar un índice de discriminación para ser validado aún más en la práctica clínica.