Lipotossicità postprandiale e steatosi epatica non alcolica (LITONAS)

I fattori che guidano la progressione dalla steatosi (NAFL) alla steatoepatite (NASH) nei pazienti con steatosi epatica non alcolica (NAFLD) rimangono in gran parte sconosciuti. Dati considerevoli ora indicano che la steatosi di per sé non è un evento epatotossico e può rappresentare di fatto un meccanismo protettivo contro la tossicità indotta da acidi grassi liberi (FFA). i ricercatori hanno precedentemente dimostrato che le cellule di Kupffer dei topi NASH accumulano più lipidi tossici (ceramidi, diacilgliceroli, sfingolipidi) migliorando la loro polarizzazione proinfiammatoria. Pertanto, la "qualità" dell'accumulo di lipidi piuttosto che la "quantità" può svolgere un ruolo centrale nella progressione della NAFLD. Questo è uno studio comparativo pilota che mira a valutare la presenza di lipidi tossici (come acidi grassi liberi, ceramidi, diacilgliceroli, sfingolipidi) nello stato postprandiale dopo l'ingestione di una "dieta occidentale" nei pazienti con NAFL e NASH. Gli esiti secondari erano: valutare la relazione tra lipidi circolanti postprandiali e marcatori di danno epatico e citochine proinfiammatorie; per valutare l'epatotossicità dei lipidi postprandiali in vitro. Verrà reclutato un totale di 24 pazienti consecutivi (gruppo 1: 12 pazienti NAFL; gruppo 2: 12 pazienti NASH) con NAFLD comprovata da biopsia (biopsia epatica <6 mesi). Verrà eseguita una valutazione dietetica che copre le 2 settimane precedenti. Verranno raccolti dati antropometrici dettagliati (indice di massa corporea, circonferenze vita e fianchi, altezza addominale, pliche cutanee) e parametri metabolici sierici (profilo lipidico standard, livelli di lipoproteine, glicemia a digiuno, livelli di insulina, livelli di peptide C, emoglobina A1c). essere valutato. Dopo un digiuno notturno di 12 ore, i pazienti saranno sottoposti a un test orale di "dieta occidentale" consistente nell'ingestione di un pasto ad alto contenuto di grassi saturi, zucchero raffinato e fruttosio chiamato "dieta occidentale" (800 kcal/pasto). I campioni di sangue verranno prelevati a digiuno e successivamente 2, 4, 6 e 8 ore dopo l'ingestione del pasto standard. Ogni volta i campioni di plasma e siero saranno conservati a -80°C per le successive analisi. La lipidomica sarà utilizzata per quantificare ciascuna classe lipidica plasmatica (lipidi neutri, fosfolipidi ed esteri metilici degli acidi grassi). I livelli sierici di citochine saranno valutati utilizzando la tecnologia del saggio multiplo. I marcatori di danno epatico saranno valutati (aminotransferasi, frammenti di cheratina 18, microRNA-122) nel siero. Gli epatociti saranno coltivati ​​con plasma di pazienti NAFL o NASH e incubati durante la notte. L'epatotossicità in vitro sarà valutata utilizzando il saggio TUNEL, il saggio MTT e il saggio di rilascio di LDH. i ricercatori prevedono che l'infiammazione insieme alla morte degli epatociti si verificherà nei pazienti NAFLD che sviluppano specifici cambiamenti lipidici plasmatici postprandiali con un aumento dei livelli di lipidi tossici. Tali pazienti possono sviluppare lesioni epatiche più gravi (infiammazione, fibrosi/cirrosi) e beneficiare degli interventi. L'identificazione di un profilo lipidico plasmatico tossico può aiutare a scegliere la dieta adeguata per prevenire la formazione di lipidi dannosi. L'identificazione di una firma lipidica plasmatica postprandiale tossica specifica per l'epatotossicità può anche servire a sviluppare un indice di discriminazione da convalidare ulteriormente nella pratica clinica.