Nenäpotentiaaliero (NPD) kystisen fibroosin diagnosointiin

Kystinen fibroosi (CF) on autosomaalinen resessiivinen systeeminen eksokriinisten rauhasten ja erittävän epiteelin häiriö. Sairaus johtuu kystisen fibroosin transmembraanisen konduktanssin säätelijägeenin (CFTR) mutaatioista, jotka aiheuttavat erilaisia ​​poikkeavuuksia. CFTR puuttuu tai se ei toimi kystisessä fibroosissa. Useimmat CFTR:n viat johtavat epänormaaliin kloridi-ionien kuljetukseen ja epänormaalin viskoosiseen limaan. Nenän epiteelin CFTR-toiminto arvioidaan NPD-menettelyllä.

NPD-mittaukset ovat hyödyllisiä diagnostisena työkaluna henkilöillä, joilla on raja-arvoisia tai normaaleja hikiklorideja, yksi tai ei yhtään tunnistettua CFTR-mutaatiota ja kliininen historia, joka viittaa CF:ään. NPD:stä on tullut kultainen standardi hengitysteiden CFTR-toiminnon havaitsemiseen ja kvantifiointiin. Määritys on myös toiminut tärkeänä päätepisteenä vuodesta 1981 lähtien. Sitä on käytetty laajasti ja se on standardoitu arvioimaan uusien lääkkeiden kykyä tutkimuksissa, jotka on suunniteltu korvaamaan, korjaamaan tai palauttamaan viallinen ionikuljetus CF-potilailla.

Analyysi sisältää pohjimmiltaan pienten testiliuosmäärien tippumisen etumaiseen sieraimeen natriumin ja kloridin oton tai erittymisen mittaamiseksi. NPD-mittaukseen tarvitaan viisi ratkaisua:

• Ratkaisu #1: Puskuroidut soittoäänet
• Ratkaisu 2: Ratkaisu 1 + Amiloridi
• Ratkaisu #3: Puskuroitu nollakloridiliuos + amiloridi
• Ratkaisu #4: Liuos #3 + Isoproterenoli
• Liuos 5: Liuos 4 + adenosiini-5'-trifosfaatti-dinatriumsuola (ATP)

Cystic Fibrosis Therapeutics Development Network (TDN) on Yhdysvaltojen CF-tutkimuskeskusten virallinen liitto. TDN on kehittänyt kaksi vakiotoimintamenettelyä NPD-menettelyä ja mittauksen suorittajien pätevyyttä varten.

Menettelyn tiedot:

Lyhyesti sanottuna sarja sulkuhanoja on konfiguroitu mahdollistamaan edellä mainittujen liuosten perfuusio tutkivan katetrin (PE50-letku) kärjessä olevan portin kautta. Kaikki testiliuokset perfusoidaan nopeudella 5,0 cc/min. Jokaisessa sieraimessa Ringerin PD-lukemat kohdissa 0,5, 1,0, 1,5, 2 ja 3 cm (luumennegatiivinen) lasketaan keskiarvoksi ja otetaan keskimääräiseksi "perustason" PD:ksi. Katetrin kärki asetetaan sitten negatiivisimpaan PD-kohtaan ja sitä ylläpidetään superperfuusiomittauksia varten pienellä teipinpalalla, joka kiinnitetään nenäkärkeen (katetrin pitämiseksi paikallaan protokollan ajan). Kaikki liuokset lämmitetään 37 ˚C:een ennen kuin ne joutuvat kosketuksiin nenän limakalvon kanssa.

Jokaisesta perfuusiotilanteesta saadaan vakaan tilan tallennus. Tallennus kestää vähintään yhden minuutin (ratkaisu 1) ja kolme minuuttia (ratkaisut 2, 3 ja 4), ennen kuin siirrytään sekvenssin seuraavaan ratkaisuun. Liuosta #5 perfusoidaan vähintään minuutin ajan, ja se vahvistaa ATP-aktivoidun Clˉ-erityksen pidättymisen sekä CF- että ei-CF-henkilöillä. Tietojen analysointia varten saadaan useita lukemia, ja sitten kaikki nenän P.D. jäljitykset pisteytetään tutkijoiden toimesta.