嚢胞性線維症の診断のための鼻電位差 (NPD)

嚢胞性線維症 (CF) は、外分泌腺および分泌上皮の常染色体劣性全身性疾患です。 この疾患は、さまざまな異常を引き起こす嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子 (CFTR) 遺伝子の変異に起因します。 嚢胞性線維症では CFTR は存在しないか機能不全です。 CFTR の欠陥のほとんどは、異常な塩化物イオン輸送と異常な粘性粘液をもたらします。 鼻上皮 CFTR 機能は、NPD 手順によって評価されます。

NPD 測定は、境界線または正常な汗塩化物、1 つまたはまったく同定されていない CFTR 変異、および CF を示唆する病歴を有する個人の診断ツールとして有用です。 NPD は、気道における CFTR 機能の検出と定量化のゴールド スタンダードとなっています。 このアッセイは、1981 年以来、重要なエンドポイントとしても機能しています。 これは広く使用されており、CF 患者の欠陥のあるイオン輸送を交換、修復、または回復するように設計された研究で新しい治療法の能力を評価するために標準化されています。

このアッセイでは、基本的に少量の試験溶液を前鼻孔に滴下して、ナトリウムと塩化物の取り込みまたは分泌を測定します。 NPD 測定には 5 つのソリューションが必要です。

• 解決策 #1: バッファリングされた呼び出し音
• ソリューション #2: ソリューション #1 + アミロリド
• 解決策 #3: 緩衝ゼロ塩化物溶液 + アミロリド
• 解決策 4: 解決策 3 + イソプロテレノール
• 溶液 #5: 溶液 #4 + アデノシン 5'-三リン酸二ナトリウム塩 (ATP)

Cystic Fibrosis Therapeutics Development Network (TDN) は、米国の CF 研究センターの正式な所属です。 TDN は、NPD 手順と測定を行う者の資格認定のために、2 つの標準操作手順を作成しました。

手順の詳細:

簡単に言えば、一連の活栓は、探索カテーテル (PE50 チューブ) の先端にあるポートを介して上記の溶液の灌流を可能にするように構成されています。 すべてのテスト ソリューションは、毎分 5.0 cc の速度で灌流されます。 各鼻孔で、0.5、1.0、1.5、2、および 3 cm (ルーメン ネガティブ) でのリンガーの PD 測定値を平均し、平均「ベースライン」PD として取得します。 次に、カテーテルの先端を最も負の PD サイトに配置し、(プロトコルの期間中カテーテルを保持するために) 鼻の先端にテープの小片を適用して超灌流測定のために維持します。 鼻粘膜と接触する前に、すべての溶液を37℃に温めます。

各灌流条件について、定常状態の記録が取得されます。 記録は、シーケンス内の次のソリューションに進む前に、少なくとも 1 分間 (ソリューション #1 の場合) および 3 分間 (ソリューション #2、3、および 4 の場合) 続きます。 ソリューション #5 は最低 1 分間灌流し、CF および非 CF の両方の個人で ATP 活性化 Cl 分泌の保持を確認します。 データ分析のためにいくつかの読み取り値が取得され、次にすべての鼻の PD が取得されます。トレーシングは調査員によって採点されます。