Nasal Potential Difference (NPD) til diagnosticering af cystisk fibrose

Cystisk fibrose (CF) er en autosomal recessiv systemisk lidelse i eksokrine kirtler og sekretoriske epitel. Sygdommen skyldes mutationer i genet for cystisk fibrose transmembrane conductance regulator (CFTR), som forårsager en række abnormiteter. CFTR er fraværende eller dysfunktionel ved cystisk fibrose. De fleste af defekterne i CFTR resulterer i unormal kloridiontransport og unormalt tyktflydende slim. Nasal epitelial CFTR-funktion vil blive vurderet ved NPD-proceduren.

NPD-målinger er nyttige som et diagnostisk værktøj hos personer med borderline eller normale svedklorider, en eller ingen identificerede CFTR-mutationer og en klinisk historie, der tyder på CF. NPD er blevet guldstandarden for påvisning og kvantificering af CFTR-funktion i luftvejene. Analysen har også fungeret som et vigtigt endepunkt siden 1981. Det er blevet brugt flittigt og er standardiseret til at vurdere evnen af ​​nye terapeutika i undersøgelser designet til at erstatte, reparere eller genoprette defekt iontransport hos CF-patienter.

Analysen involverer dybest set at dryppe små mængder af testopløsningerne ind i det forreste næsebor for at måle optagelse eller sekretion af natrium og klorid. Der kræves fem løsninger til NPD-målingen:

• Løsning #1: Bufret ringetoner
• Løsning #2: Løsning #1+Amiloride
• Løsning #3: Bufret nulkloridopløsning + amilorid
• Løsning #4: Løsning #3 + Isoproterenol
• Løsning #5: Opløsning #4 + Adenosin 5'-triphosphat-dinatriumsalt (ATP)

Cystic Fibrosis Therapeutics Development Network (TDN) er en formel tilknytning til CF-forskningscentre i USA. To standarddriftsprocedurer er blevet udviklet af TDN til NPD-proceduren og kvalificering af dem, der udfører målingen.

Proceduredetaljer:

Kort fortalt er en række stophaner konfigureret til at tillade perfusion af ovennævnte opløsninger gennem porten ved spidsen af ​​et udforskningskateter (PE50-slange. Alle testopløsninger perfunderes med en hastighed på 5,0 cc pr. minut. I hvert næsebor beregnes gennemsnittet af PD-aflæsningerne i Ringers ved 0,5, 1,0, 1,5, 2 og 3 cm (lumen negativ) og taget som den gennemsnitlige 'baseline' PD. Kateterspidsen placeres derefter på det mest negative PD-sted og vedligeholdes til superperfusionsmålinger med et lille stykke tape påført næsespidsen (for at holde kateteret i hele protokollens varighed). Alle opløsninger opvarmes til 37˚C før kontakt med næseslimhinden.

For hver perfusionstilstand opnås en steady-state optagelse. Optagelsen varer mindst et minut (for løsning #1) og i tre minutter (for løsning #2, 3 og 4), før du fortsætter til den næste løsning i sekvensen. Opløsning #5 perfunderes i minimum et minut og bekræfter retention af ATP-aktiveret Clˉ-sekretion hos både CF- og ikke-CF-individer. Der opnås adskillige aflæsninger til dataanalyse, og derefter alle nasal P.D. sporing er scoret af efterforskere.