Differenza potenziale nasale (NPD) per la diagnosi di fibrosi cistica

La fibrosi cistica (FC) è una malattia sistemica autosomica recessiva delle ghiandole esocrine e degli epiteli secretori. La malattia deriva da mutazioni nel gene del regolatore della conduttanza transmembrana della fibrosi cistica (CFTR) che causano una varietà di anomalie. CFTR è assente o disfunzionale nella fibrosi cistica. La maggior parte dei difetti nel CFTR determinano un trasporto anormale di ioni cloruro e un muco anormalmente viscoso. La funzione del CFTR epiteliale nasale sarà valutata mediante la procedura NPD.

Le misurazioni del NPD sono utili come strumento diagnostico in individui con cloruro del sudore borderline o normale, una o nessuna mutazione CFTR identificata e una storia clinica suggestiva di FC. L'NPD è diventato il gold standard per il rilevamento e la quantificazione della funzione CFTR nelle vie aeree. Il test è servito anche come punto finale importante dal 1981. È stato ampiamente utilizzato ed è standardizzato per valutare la capacità di nuove terapie in studi progettati per sostituire, riparare o ripristinare il trasporto ionico difettoso nei pazienti con FC.

L'analisi prevede fondamentalmente il gocciolamento di piccole quantità delle soluzioni di prova nella narice anteriore per misurare l'assorbimento o la secrezione di sodio e cloruro. Ci sono cinque soluzioni richieste per la misurazione NPD:

• Soluzione n. 1: suonerie bufferizzate
• Soluzione #2: Soluzione #1+Amiloride
• Soluzione n. 3: soluzione tamponata di cloruro zero + amiloride
• Soluzione #4: Soluzione #3 + isoproterenolo
• Soluzione n. 5: Soluzione n. 4 + adenosina 5'-trifosfato-sale disodico (ATP)

Il Cystic Fibrosis Therapeutics Development Network (TDN) è un'affiliazione formale dei centri di ricerca sulla fibrosi cistica negli Stati Uniti. Due procedure operative standard sono state sviluppate dal TDN per la procedura NPD e la qualificazione di coloro che eseguono la misurazione.

Dettagli della procedura:

In breve, una serie di rubinetti è configurata per consentire la perfusione delle suddette soluzioni attraverso la porta sulla punta di un catetere esplorativo (tubo PE50. Tutte le soluzioni di test vengono perfuse a una velocità di 5,0 cc al minuto. In ciascuna narice, le letture PD in Ringer a 0,5, 1,0, 1,5, 2 e 3 cm (lumen negativo) vengono calcolate come media e prese come PD media "di base". La punta del catetere viene quindi posizionata nel sito PD più negativo e mantenuta per le misurazioni della superperfusione con un piccolo pezzo di nastro adesivo applicato alla punta nasale (per trattenere il catetere per tutta la durata del protocollo). Tutte le soluzioni vengono riscaldate a 37°C prima del contatto con la mucosa nasale.

Per ogni condizione di perfusione, si ottiene una registrazione allo stato stazionario. La registrazione dura almeno un minuto (per la soluzione n. 1) e per tre minuti (per le soluzioni n. 2, 3 e 4) prima di procedere alla soluzione successiva all'interno della sequenza. La soluzione n. 5 viene perfusa per un minimo di un minuto e conferma la ritenzione della secrezione di Clˉ attivata da ATP sia negli individui CF che non CF. Vengono ottenute diverse letture per l'analisi dei dati, quindi tutti i P.D. i tracciati sono valutati dagli investigatori.