Rozdíl nosního potenciálu (NPD) pro diagnostiku cystické fibrózy

Cystická fibróza (CF) je autozomálně recesivní systémové onemocnění exokrinních žláz a sekrečních epitelů. Toto onemocnění je důsledkem mutací v genu pro regulátor transmembránové vodivosti (CFTR) cystické fibrózy, které způsobují různé abnormality. CFTR u cystické fibrózy chybí nebo je dysfunkční. Většina defektů v CFTR má za následek abnormální transport chloridových iontů a abnormálně viskózní hlen. Funkce CFTR nosního epitelu bude hodnocena postupem NPD.

Měření NPD je užitečné jako diagnostický nástroj u jedinců s hraničními nebo normálními chloridy v potu, jednou nebo žádnou identifikovanou mutací CFTR a klinickou anamnézou svědčící pro CF. NPD se stala zlatým standardem pro detekci a kvantifikaci funkce CFTR v dýchacích cestách. Test také sloužil jako důležitý koncový bod od roku 1981. Je široce používán a je standardizován pro hodnocení schopnosti nových terapeutik ve studiích navržených k nahrazení, opravě nebo obnovení defektního transportu iontů u pacientů s CF.

Test v podstatě zahrnuje nakapání malých množství testovacích roztoků do přední nosní dírky za účelem měření příjmu nebo sekrece sodíku a chloridu. Pro měření NPD je potřeba pět řešení:

• Řešení č. 1: Vyrovnávací vyzvánění
• Řešení #2: Roztok #1+Amilorid
• Roztok č. 3: Pufrovaný roztok s nulovým chloridem + amilorid
• Roztok #4: Roztok #3 + Isoproterenol
• Roztok č. 5: Roztok č. 4 + adenosin 5'-trifosfát-disodná sůl (ATP)

Cystic Fibrosis Therapeutics Development Network (TDN) je formálním sdružením výzkumných center CF v USA. TDN vyvinula dva standardní operační postupy pro postup NPD a kvalifikaci osob provádějících měření.

Podrobnosti o postupu:

Stručně řečeno, řada uzavíracích kohoutů je nakonfigurována tak, aby umožňovala perfuzi výše uvedených roztoků přes port na špičce průzkumného katetru (trubička PE50. Všechny testovací roztoky se perfundují rychlostí 5,0 cm3 za minutu. V každé nosní dírce se zprůměrují naměřené hodnoty PD u Ringera při 0,5, 1,0, 1,5, 2 a 3 cm (lumen negativní) a vezmou se jako průměrná „základní“ PD. Špička katétru se pak umístí na nejvíce negativní místo PD a udržuje se pro superperfuzní měření s malým kouskem pásky aplikovaným na nosní špičku (k udržení katétru po dobu trvání protokolu). Všechny roztoky se před kontaktem s nosní sliznicí zahřejí na 37˚C.

Pro každý stav perfuze se získá záznam v ustáleném stavu. Záznam trvá alespoň jednu minutu (pro řešení č. 1) a tři minuty (pro řešení č. 2, 3 a 4), než se přistoupí k dalšímu řešení v sekvenci. Roztok č. 5 je perfundován po dobu minimálně jedné minuty a potvrzuje retenci ATP-aktivované sekrece Clˉ u jedinců s CF i bez CF. Bylo získáno několik naměřených hodnot pro analýzu dat a poté všechny nazální P.D. trasování jsou hodnocena vyšetřovateli.