Dialysoitavan leukosyyttiuutteen kliininen vaikutus epäillyissä tai vahvistetuissa COVID-19-tapauksissa (FUTURE-T) (FUTURE-T)

Dialysoitava leukosyyttiuute (DLE) (Transferon oral®) on ihmisen leukosyyteistä saatu dialysoitu uute. Sen aktiivinen ainesosa on monimutkainen seos pienimolekyylisiä peptidejä, jotka on saatu dialyysillä (12 kDa) ja sitä seuraavalla ultrasuodatuksella (10 kDa) lysoituneiden leukosyytti- ja verihiutalekonsentraattien avulla. Tämän tuotteen on valmistanut Laboratory of Scientific Research (Pharma-FT) Nacional School of Biological Sciencesissa (ENCB), National Polytechnic Institute (IPN) patentoidulla menetelmällä Meksikossa (MX/a/2011/013852), Yhdysvalloissa (US9328152B2). ), EU (EPA-126128), Kanada (2860260), Peru (000969-2014/DIN) ja Kolumbia (14138326).

DLE on monimutkainen lääke, jonka vaikuttava aine on useita peptidiyksiköitä. Siten DLE:tä ei voida täysin karakterisoida, mikä edellyttää analyyttisten tekniikoiden soveltamista, jotka voivat kuvata sen kaikkien komponenttien yleistä käyttäytymistä (peptidipolydispersiteetti).

DLE:n peptidikomponenttien molekyylipainon määrittämiseen on käytetty kahta ortogonaalista tekniikkaa perustuen niiden kulkeutumiseen polymeerimatriisin läpi. 10 kDa:n molekyylipaino määritettiin polyakryyliamidigeelielektroforeesilla denaturointiolosuhteissa (SDS-PAGE), kun taas alle 15 kDa:n molekyylipaino määritettiin molekyyliekskluusiokromatografialla.

DLE:n peptidiluonne on osoitettu aminogrammimenetelmällä. Tämä menetelmä sisältää peptidikomponenttien happaman hydrolyysin, kunnes saadaan vapaita aminohappoja, jotka derivatisoidaan ja tunnistetaan aminohappostandardin retentioajan perusteella käyttämällä käänteisfaasikromatografiaa (RP-UPLC). Lisäksi tämän lääkkeen peptidien määritettiin erittäin liukoisiksi UV-säteilyyn kytketyllä RP-UPLC:llä, kun taas massaspektometria, joka oli kytketty RP-UPLC:hen, osoitti johdonmukaisia ​​ionisaatiokuvioita.

Ei-kliiniset ja kliiniset tutkimukset, jotka liittyvät tähän tutkimukseen. Kokeellisesti virusinfektion hiiren mallissa DLE:n antaminen osoitti TNF:n ja IL-6:n seerumipitoisuuksien laskua, johon liittyi IFN:n nousu. Ihmisillä virusetiologia on vastuussa 90–95 prosentista hengitystieinfektioiden tapauksista. Yleisimpiä hengitystiesairauksiin liittyviä viruksia ovat rinovirukset (n. 50 %), koronavirukset (n. 10 %), adenovirukset, hengitysteiden synsyyttivirus, influenssa ja parainfluenssavirukset (jotka ovat yleensä 10–15 %), ihmisen metapneumovirus (< 5 %). Ensimmäiset todisteet siitä, että DLE:llä saattaa olla terapeuttista vaikutusta hengitystieinfektioissa, saatiin analysoimalla useita tapauksia (36 aikuista ja 63 lasta), joilla oli allerginen nuha ja jotka saivat DLE:tä tavanomaisen hoidon lisäksi. 11 % aikuisista ja 25,4 % lapsista ilmoitti hengitystieinfektioiden esiintyvyyden vähentyneen. Vastaavasti sarjassa 70 aikuista ja 54 lasta, joilla oli jatkuva keskivaikea astma ja jotka saivat DLE-hoitoa adjuvanttihoitona, 44 % aikuisista ja 31 % lapsista ilmoitti hengitystieinfektioiden esiintyvyyden vähentyneen allergisten sairauksien paranemisen lisäksi. oireita. Tutkimuksessa, johon osallistui 52 henkilöä, DLE:n tehokkuutta arvioitiin vähentämällä infektiooireiden vakavuutta ja esiintymistiheyttä. Tämä tutkimus osoitti, että tarttuvien hengitystieoireiden esiintymistiheys ja vakavuus vähenivät (77,1 %) lapsipotilailla. Vertailun vuoksi 82,4 % aikuisista vähentää tarttuvien hengitystieoireiden esiintymistiheyttä ja/tai heikentää niiden vakavuutta. Sepsistä sairastavien lapsipotilaiden kliinisessä seurannassa, joille DLE lisättiin tavanomaiseen hoitoon, C-reaktiivisen proteiinin pitoisuudet laskivat, neutrofiilien määrä väheni 72 tuntia sairaalahoidon jälkeen ja eloonjäämisaste kasvoi 30 %. raportoitu.

SARS-CoV-2 aiheuttaa merkittäviä keuhkovaurioita kontrolloimattoman ja säätelemättömän tulehdusaktiivisuuden vuoksi, joten hoitona on ehdotettu immunomoduloivia lääkkeitä. DLE:hen liittyvät havainnot tukevat niiden immunomoduloivaa kykyä mahdollisena terapeuttisena välineenä tarttuvissa hengitystiesairauksissa, joissa on huomattava tulehduskomponentti.

Päätavoite. Tuottaa tietoa DLE:n tehokkuudesta oireenmukaisen hoidon apuvälineenä vähentämällä akuutin hengitystieinfektion merkkejä ja oireita (epäillyt/vahvistetut COVID-19-tapaukset).

Toissijaiset tavoitteet.

1. Kliinisen huononemisen ja hengityshälytystietojen arvioiminen.
2. Kliinisten oireiden keston arvioimiseksi.
3. Sytokiinimuutosten tutkiminen
4. Saadakseen tietoa DLE:n turvallisuudesta akuutin hengitystieinfektion oireenmukaisessa hoidossa (epäilyt/vahvistetut COVID-19-tapaukset).
5. Tietojen tuottaminen valmiusasteikon (CS) validoimiseksi akuutin hengitystiesairauden vakavuuden arvioimiseksi (epäillyt/vahvistetut COVID-19-tapaukset).

Hypoteesi. DLE:n lisääminen oireenmukaiseen hoitoon vähentää akuutin hengitystieinfektion merkkejä ja oireita.

Rekrytointimenetelmä toteutetaan sähköisesti.

Akuutti hengitystieinfektio luokitellaan sen kliinisten oireiden mukaan Meksikon kliinisen ohjeen mukaisesti, jossa COVID-19-tauti jaetaan ei-vakaviin ja vakaviin tapauksiin. Potilaan kliininen arviointi arvioidaan tätä tutkimusta varten suunnitellun CS:n avulla, ja se sisältää kolme pääkohtaa, jotka on jaettu vähäisiin osiin (vaihteluväli 0–4 kussakin):

Yleisoireet: Kuume, Päänsärky Ylempien hengitysteiden hengitysteiden oireet: Aivastelu, nenän tukkoisuus, nenä.

Tilastot. Analyysissä otetaan huomioon neljä populaatiota: satunnaistetut yksilöt tutkimuksessa tai täydellisessä analyysisarjassa (FAS), turvallisuuspopulaatio (SP), hoitotarkoituksen mukainen populaatio (ITT) ja populaatio protokollaa kohden (PP).

FAS-populaatio koostuu kaikista tutkimukseen satunnaistetuista henkilöistä (heille on annettu satunnaisluku). ITT-populaatio koostuu kaikista potilaista, jotka oli satunnaistettu, jotka saivat vähintään yhden annoksen tutkimuslääkettä ja joilla oli vähintään yksi arvio primaarisista tai toissijaisista päätepisteistä lähtötilanteen arvioinnin jälkeen. Hoidon tarkoituksen periaatetta noudattaen potilaat analysoidaan satunnaistuksessa määrätyn hoidon mukaan. SP koostuu kaikista potilaista, jotka ovat saaneet vähintään yhden annoksen tutkimuslääkettä ja joilla on vähintään yksi turvallisuusarviointi lähtötilanteen arvioinnin jälkeen. Potilaat analysoidaan heidän saamansa hoidon mukaan. Selventävänä huomautuksena totean, että toteamus, että potilaalla ei ole haittavaikutuksia, on turvallisuusarviointi. PP koostuu kaikista ITT-populaatioon kuuluvista potilaista, jotka suorittavat kaikki käynnit, joilla on tarkka arvio ensisijaisesta tehokkuusmuuttujasta ja jotka eivät sisällä merkittäviä protokollarikkomuksia.

Tilastolliset menetelmät. Demografiset tiedot, kliininen historia ja tärkeimmät lähtötason tehokkuusmuuttujat kaikille satunnaistetuille potilaille esitetään yhteenveto hoitoryhmittäin taulukoissa (lukumäärä ja prosenttiosuus) kvalitatiivisten muuttujien osalta; ja taulukoissa, jotka sisältävät kvantitatiivisten muuttujien keskiarvon, keskihajonnan, mediaanin, minimin ja maksimin käsittelyryhmittäin. Ryhmien vertailu lähtötilanteen käynnillä analysoidaan käyttämällä Khin neliötestejä kvalitatiivisille muuttujille ja kahden otoksen opiskelijan t-testejä kvantitatiivisille muuttujille (p-arvot toimitetaan vain kuvaavia tarkoituksia varten). Lisäksi sairaushistoria, samanaikaiset lääkkeet, rinnakkaissairaudet kootaan yhteen esiintymistiheystaulukoiden avulla.

Ensisijainen tulos. Ensisijainen tehon tulos on CS-pisteiden mittaaminen hoidon lopussa tai varhaisessa lopettamisessa ITT-populaatiossa. Viimeisen siirretyn havainnon (LOCF) imputoinnin algoritmia sovelletaan potilaiden tapauksessa, jotka lopettavat hoidon tai vetäytyvät tutkimuksesta. Ensisijainen analyysi suoritetaan käyttämällä ITT-populaatiota. Tämä analyysi suoritetaan myös PP-populaatiossa tulosten luotettavuuden arvioimiseksi. Ensisijainen tulos analysoidaan kovarianssimallilla, joka sisältää hoitoryhmän, perusarvon ja keskuksen.

Ensisijaisen tavoitteen tutkiva hypoteesi on selvittää, voisiko CS:n pistemäärän laskussa olla eroa hoidon lopussa, alla kuvatulla paremmuushypoteesilla:

Ho: µPlacebo - µDLE>0 Ha: µPlacebo - µDLE<0

DLE-lisäyksen mahdollinen paremmuus oireenmukaisen hoidon apuvälineenä verrattuna oireenmukaiseen/plasebohoitoon todetaan, jos µPlacebo-µDLE-eron 2-puolisen 95 %:n luottamusvälin yläraja on pienempi kuin 0.

Toissijaiset tulokset. Hengityshälytystietojen esiintyminen tunnistetaan tutkimusryhmissä esittämällä tulokset taajuuskaaviona, jossa on hälytystiedot esittäneiden potilaiden osuus ryhmittäin. Se analysoidaan Chi-Square-testillä. Kliinisten ilmenemismuotojen kesto vastaa niiden päivien lukumäärää, joilla on jokin CS:ssä kuvatuista merkeistä ja oireista. Kuvaavat tilastot tehdään kussakin hoitoryhmässä; vertailu tehdään opiskelijan t-testillä. Immunologiset muutokset määritellään muutoksiksi leukosyyttien kokonaismäärässä, lymfosyyttien kokonaismäärässä, ESR:ssä ja seerumin CRP:n, prokalsitoniinin, D-dimeerin, ferritiinin, CK:n, myoglobiinin, IL-6:n, TNF:n, interferonien ja viruksen spesifisten vasta-aineiden pitoisuuksissa. Kuvaavat tilastot esitetään hoitoryhmittäin vs. käynti, sekä niiden potilaiden osuus, joiden arvot ovat normalisoituneet hoidon aikana.

Otoskoko. Koska tutkimuslääkkeen tehosta COVID-19:n aiheuttaman akuutin hengitystieinfektion yhteydessä ei ole tietoa, otoskoon tilastollista laskentaa ei sovelleta. Tässä tutkimuksessa ehdotetaan kuitenkin kuvailevana harjoituksena otosten koon arviota, joka perustuu erityisesti tätä tutkimusta varten suunniteltuun CS:ään. Varautumispisteet vaihtelevat välillä 0-32, kun otetaan huomioon, että tutkimuspopulaatio on ei-vakavia potilaita, pisteytyskeskiarvo vastaa luokkaa 16 pistettä keskihajonnan ollessa 4. On myös oletettu, että pisteytyskäyttäytyminen on jatkuva muuttuja normaalijakaumalla.

Otoskoon laskentamenettely tapahtuu Julious 2004/FARTSSIE22 -yhtälön avulla paremmuussuunnitelmille rinnakkain kahden ryhmän kanssa (DLE vs. Placebo). Seuraavien arvojen mukaan:

a. Tyypin I virhe: 0,05 (5 %); b. Tyypin II virhe: 0,2 (20 %). Teho: 1-b: 0,8 (80 %) Ehdotettu keskihajonta: 4 Ero havaittavissa ryhmien välillä: 1 Otoskoon suhde ryhmien välillä: 1:1 (tasapainotettu) Laskettu otoskoko on 253 per ryhmä. Lisätään 10 % (q) korvaamaan tutkimuksesta tai hoidosta vetäytyminen; Tästä syystä 562 potilasta (nt) 281 satunnaistetaan hoidon mukaan, jotta hypoteesitestin arvioitu määrä potilaita saadaan. nt = n/1-q = 506/0,9 = 562

Menettelyt puuttuvien tietojen selittämiseksi. Kerran mitattujen muuttujien puuttuvia tietoja ei voida korvata, eikä kyseistä henkilöä voida sisällyttää analyysiin. Useammin kuin kerran mitatuissa tiedoissa, jos tiedot puuttuvat, otetaan huomioon viimeinen perusviivan jälkeen mitattu arvo. (LOCF)

Menettelyt tilastosuunnitelmasta poikkeamien ilmoittamiseksi. Jos alkuperäisestä tilastosuunnitelmasta poikkeaa, ne kuvataan ja perustellaan loppuraportissa.

Analyysissä mukana olevien henkilöiden valinta. Kaikki satunnaistetut henkilöt, jotka ovat saaneet vähintään yhden annoksen tutkimusvalmistetta ITT:n enimmäismäärän mukaisesti, otetaan mukaan analyysiin.

Tietojen saatavuus. Tutkimusta valvoo erityishenkilöstö; Sisäiset ja ulkoiset tarkastukset ja auditoinnit sallitaan ja niitä helpotetaan, mikä mahdollistaa pääsyn tietoihin säilyttäen samalla tutkimushenkilöiden luottamuksellisuuden.