Klinisk effekt af dialyserbart leukocytekstrakt i mistænkte eller bekræftede tilfælde af COVID-19 (FUTURE-T) (FUTURE-T)

Dialyserbar leukocytekstrakt (DLE) (Transferon oral®) er et dialyseret ekstrakt opnået fra humane leukocytter. Dens aktive ingrediens er en kompleks blanding af peptider med lav molekylvægt opnået ved dialyse (12 kDa) og efterfølgende ultrafiltrering (10 kDa) af lyserede leukocyt- og blodpladekoncentrater. Dette produkt er fremstillet af Laboratory of Scientific Research (Pharma-FT) ved Nacional School of Biological Sciences (ENCB), National Polytechnic Institute (IPN) ved hjælp af en patenteret metode i Mexico (MX/a/2011/013852), USA (US9328152B2 ), EU (EPA-126128), Canada (2860260), Peru (000969-2014/DIN) og Colombia (14138326).

DLE er et komplekst lægemiddel, det aktive princip er flere peptidenheder. DLE kan således ikke karakteriseres fuldt ud, hvilket kræver anvendelse af analytiske teknikker, der kan beskrive den overordnede opførsel af alle dets komponenter (peptidpolydispersitet).

To ortogonale teknikker er blevet brugt til at bestemme molekylvægten af ​​peptidkomponenterne i DLE baseret på deres migration gennem en polymermatrix. Molekylvægten på 10 kDa blev bestemt ved polyacrylamidgelelektroforese under denaturerende betingelser (SDS-PAGE), mens en molekylvægt lavere end 15 kDa blev bestemt ved molekylær eksklusionskromatografi.

Peptidnaturen af ​​DLE er blevet demonstreret ved hjælp af en aminogrammetode. Denne metode omfatter sur hydrolyse af peptidkomponenterne, indtil der opnås frie aminosyrer, som derivatiseres og identificeres baseret på retentionstiden for en aminosyrestandard ved hjælp af omvendt fasekromatografi (RP-UPLC). Derudover blev peptiderne af dette lægemiddel bestemt til at være meget opløselige ved RP-UPLC koblet til UV, mens massespektometri, koblet til RP-UPLC, udviste konsistente ioniseringsmønstre.

Ikke-kliniske og kliniske undersøgelser, der er relevante for denne forskning. Eksperimentelt, i en murin model af virusinfektion, viste administration af DLE et fald i serumkoncentrationer for TNF og IL-6, ledsaget af en stigning af IFN. Hos mennesker er viral ætiologi ansvarlig for 90-95% af tilfældene af luftvejsinfektioner. De almindelige vira involveret i luftvejssygdomme er rhinovirus (~50%), coronavirus (~10%), adenovira, respiratorisk syncytialvirus, influenza og parainfluenzavirus (som generelt udgør mellem 10% til 15%), human metapneumovirus (< 5 %). Det første bevis på, at DLE kunne have en terapeutisk effekt ved luftvejsinfektioner, opstod fra analysen af ​​en række tilfælde (36 voksne og 63 børn) med allergisk rhinitis, som fik DLE ud over standardbehandlingen. 11 % af voksne og 25,4 % af børn rapporterede et fald i hyppigheden af ​​luftvejsinfektioner. Tilsvarende rapporterede 44 % af voksne og 31 % af børn i en serie på 70 voksne og 54 børn med vedvarende moderat astma, som modtog behandling med DLE som adjuverende terapi, et fald i hyppigheden af ​​luftvejsinfektioner, ud over forbedringen af ​​allergiske symptomer. I en undersøgelse af 52 personer blev effektiviteten af ​​DLE evalueret ved at reducere sværhedsgraden og hyppigheden af ​​smitsomme symptomer. Denne undersøgelse viste et fald i hyppigheden og sværhedsgraden af ​​de infektiøse luftvejssymptomer (77,1 %) hos pædiatriske patienter. Til sammenligning reducerer 82,4% af voksne hyppigheden og/eller formindsker sværhedsgraden af ​​infektiøse luftvejssymptomer. I en klinisk opfølgning af pædiatriske patienter med sepsis, hvortil DLE blev føjet til standardbehandlingen, var et fald i C-reaktive proteinniveauer, reduktion i neutrofiltallet 72 timer efter hospitalsindlæggelse og en stigning i overlevelsesraten på 30 %. rapporteret.

SARS-CoV-2 inducerer betydelig lungeskade på grund af ukontrolleret og dysreguleret inflammatorisk aktivitet, så immunmodulerende lægemidler er blevet foreslået som behandling. Resultaterne relateret til DLE, understøtter deres immunmodulerende kapacitet som et potentielt terapeutisk værktøj ved infektiøse luftvejssygdomme med en fremtrædende inflammatorisk komponent.

Primært mål. At generere information om effektiviteten af ​​DLE som en hjælp til symptomatisk behandling ved at reducere tegn og symptomer på akut luftvejsinfektion (mistænkte/bekræftede tilfælde af COVID-19).

Sekundære mål.

1. At evaluere klinisk forringelse og respiratorisk alarmdata.
2. At vurdere varigheden af ​​de kliniske manifestationer.
3. At udforske cytokinændringer
4. At indhente data om sikkerheden af ​​DLE som en hjælp til symptomatisk behandling af akut luftvejsinfektion (mistænkte/bekræftede tilfælde af COVID-19).
5. At generere information for at validere kontingentskalaen (CS) for at vurdere sværhedsgraden af ​​akut luftvejssygdom (mistænkte/bekræftede tilfælde af COVID-19).

Hypotese. Tilføjelse af DLE til den symptomatiske behandling vil reducere tegn og symptomer på akut luftvejsinfektion.

Rekrutteringsmetoden vil ske elektronisk.

Den akutte luftvejsinfektion vil blive klassificeret i henhold til dens kliniske symptomer efter den mexicanske kliniske retningslinje, hvor COVID-19 sygdom er opdelt i ikke-alvorlige og alvorlige tilfælde. Den kliniske evaluering af patienten vil blive vurderet af en CS designet til denne undersøgelse og inkluderer tre hovedpunkter opdelt i mindre punkter (interval 0 til 4 i hver):

Generelle symptomer: Feber, Hovedpine Overordnede luftvejssymptomer: Nysen, tilstoppet næse, løbende næse Symptomer på nedre luftveje: Hoste, åndenød og smerter eller følelse af sammensnøring eller undertrykkelse i brystet.

Statistikker. Fire populationer vil blive taget i betragtning til analysen: randomiserede individer i undersøgelsen eller det fulde analysesæt (FAS), sikkerhedspopulation (SP), populationen af ​​intention-to-treat (ITT) og population per-protokol (PP).

FAS-populationen vil bestå af alle individer, der blev randomiseret til undersøgelsen (de tildeles et tilfældigt nummer). ITT-populationen vil bestå af alle patienter, der blev randomiseret, som fik mindst én dosis af undersøgelseslægemidlet, og som havde mindst én vurdering af de primære eller sekundære endepunkter efter baseline-vurderingen. Efter princippet om hensigten med behandlingen, vil patienter blive analyseret i henhold til den behandling, der er tildelt under randomiseringen. SP vil bestå af alle patienter, der har modtaget mindst én dosis af undersøgelseslægemidlet, og som har mindst én sikkerhedsvurdering efter baseline-vurderingen. Patienterne vil blive analyseret i henhold til den behandling, de har modtaget. Som en opklarende note udgør udsagnet om, at patienten ikke har nogen bivirkninger, en sikkerhedsvurdering. PP vil bestå af alle patienter i ITT-populationen, som gennemfører alle besøg, som har en nøjagtig evaluering af den primære effektvariabel, og som ikke indeholder væsentlige protokolovertrædelser.

Statistiske metoder. Demografiske data, klinisk historie og centrale baseline effektivitetsvariabler for alle randomiserede patienter vil blive opsummeret efter behandlingsgruppe i tabeller (antal og procent) for kvalitative variabler; og i tabeller indeholdende gennemsnit, standardafvigelse, median, minimum og maksimum, efter behandlingsgruppe, for de kvantitative variable. En sammenligning af grupper ved baseline-besøget vil blive analyseret ved hjælp af chi-kvadrat-tests for kvalitative variable og to-stikprøver studerendes t-tests for kvantitative variable (p-værdier vil kun blive givet til beskrivende formål). Derudover vil sygehistorien, samtidig medicinering, komorbiditeter blive opsummeret ved hjælp af frekvenstabeller.

Primært resultat. Det primære resultat af effektivitet vil være måling af scoren af ​​CS ved afslutningen af ​​behandlingen eller tidlig afslutning i ITT-populationen. Algoritmen for imputering af den sidste observation, der overføres (LOCF) vil blive anvendt i tilfælde af patienter, der trækker sig tilbage, afbryder behandlingen eller trækker sig fra undersøgelsen. Den primære analyse vil blive udført ved hjælp af ITT-populationen. Denne analyse vil også blive udført i PP-populationen for at vurdere resultaternes robusthed. Det primære resultat vil blive analyseret med en kovariansmodel, der inkluderer behandlingsgruppen, baseline værdi og center.

Den eksplorative hypotese for det primære mål er at fastslå, om der kan være en forskel i faldet i scoren af ​​CS ved slutningen af ​​behandlingen, under en overlegenhedshypotesetilgang beskrevet nedenfor:

Ho: µPlacebo - µDLE>0 Ha: µPlacebo - µDLE<0

Mulig overlegenhed af DLE-tilsætningen som en hjælp til symptomatisk behandling i forhold til symptomatisk/placebobehandling vil blive fastslået, hvis den øvre grænse for det 2-sidede 95 % konfidensinterval for forskellen µPlacebo-µDLE er mindre end 0.

Sekundære resultater. Forekomsten af ​​respiratoriske alarmdata vil blive identificeret i undersøgelsesgrupperne, idet resultaterne præsenteres i et frekvensdiagram med andelen af ​​patienter, der præsenterede alarmdata efter gruppe. Det vil blive analyseret ved hjælp af Chi-Square testen. Varigheden af ​​kliniske manifestationer svarer til antallet af dage med nogen af ​​de tegn og symptomer, der er beskrevet i CS. Beskrivende statistik vil blive udført i hver behandlingsgruppe; sammenligningen vil blive foretaget ved hjælp af elevens t-test. Immunologiske ændringer er defineret som ændringer i det totale leukocyttal, totale lymfocytter, ESR og serumkoncentration af CRP, procalcitonin, D-dimer, ferritin, CK, myoglobin, IL-6, TNF, interferoner og specifikke antistoffer for virussen. Beskrivende statistik vil blive præsenteret efter behandlingsgruppe vs. besøg, samt andelen af ​​patienter, der viser normalisering af værdier under behandlingen.

Prøvestørrelse. På grund af manglende information om undersøgelseslægemidlets effektivitet i tilfælde af akut luftvejsinfektion med COVID-19, gælder den statistiske beregning af prøvestørrelsen ikke. Men som en beskrivende øvelse, givet det aktuelle beredskab på grund af COVID-19-pandemien, foreslås et skøn over stikprøvestørrelsen i denne undersøgelse baseret på CS, der er specifikt designet til denne undersøgelse. Kontingensscore går fra 0 til 32, i betragtning af at undersøgelsespopulationen er ikke-svære patienter, vil scoregennemsnittet svare til størrelsesordenen 16 point med en standardafvigelse på 4. Det er også blevet antaget, at scoringsadfærden er den for en kontinuert variabel med normalfordeling.

Proceduren for beregning af prøvestørrelse er ved hjælp af Julious 2004/FARTSSIE22-ligningen for overlegenhedsdesign parallelt med to grupper (DLE vs. Placebo). I henhold til følgende værdier:

en. Type I fejl: 0,05 (5%); b. Type II fejl: 0,2 (20%). Effekt: 1-b: 0,8 (80%) Foreslået standardafvigelse: 4 Forskel at påvise mellem grupper: 1 Prøvestørrelsesforholdet mellem grupper: 1:1 (balanceret) Den beregnede stikprøvestørrelse er 253 pr. gruppe. Yderligere 10 % (q) vil blive inkluderet for at kompensere for tilbagetrækninger fra undersøgelsen eller behandlingen; derfor vil 562 patienter (nt) 281 blive randomiseret efter behandling for at få det estimerede antal patienter til hypotesetesten. nt=n/1-q =506/0,9=562

Procedurer til at forklare manglende data. Manglende data for de variable, der måles ved en enkelt lejlighed, kan ikke erstattes, og det pågældende individ kan ikke indgå i analysen. For data, der er målt på mere end én gang, i tilfælde af manglende data, vil den sidst målte værdi efter baseline blive taget i betragtning. (LOCF)

Procedurer for indberetning af eventuelle afvigelser fra den statistiske plan. Hvis der er afvigelser fra den oprindelige statistiske plan, vil disse blive beskrevet og begrundet i den endelige rapport.

Udvælgelse af personer, der skal indgå i analysen. Alle randomiserede personer, der har modtaget mindst én dosis af forsøgsproduktet under ITT-maksimen, vil blive inkluderet i analysen.

Adgang til information. Undersøgelsen vil blive overvåget af specifikt personale; interne og eksterne inspektioner og revisioner vil blive tilladt og lettet, hvilket giver adgang til information, samtidig med at fortroligheden af ​​undersøgelsespersonerne bevares.