Efeito clínico do extrato de leucócitos dialisáveis ​​em casos suspeitos ou confirmados de COVID-19 (FUTURE-T) (FUTURE-T)

O Extrato de Leucócitos Dialisáveis ​​(DLE) (Transferon oral®) é um extrato dialisado obtido de leucócitos humanos. Seu princípio ativo é uma mistura complexa de peptídeos de baixo peso molecular obtidos por diálise (12 kDa) e posterior ultrafiltração (10 kDa) de concentrados de leucócitos e plaquetas lisados. Este produto é fabricado pelo Laboratório de Investigação Científica (Pharma-FT) da Escola Nacional de Ciências Biológicas (ENCB), Instituto Politécnico Nacional (IPN) utilizando um método patenteado no México (MX/a/2011/013852), EUA (US9328152B2 ), UE (EPA-126128), Canadá (2860260), Peru (000969-2014/DIN) e Colômbia (14138326).

DLE é uma droga complexa, o princípio ativo é várias unidades peptídicas. Assim, o DLE não pode ser totalmente caracterizado, exigindo a aplicação de técnicas analíticas que possam descrever o comportamento geral de todos os seus componentes (polidispersão peptídica).

Duas técnicas ortogonais foram usadas para determinar o peso molecular dos componentes peptídicos do DLE com base em sua migração através de uma matriz polimérica. O peso molecular de 10 kDa foi determinado por eletroforese em géis de poliacrilamida sob condições desnaturantes (SDS-PAGE), enquanto o peso molecular inferior a 15 kDa foi determinado por cromatografia de exclusão molecular.

A natureza peptídica do DLE foi demonstrada usando um método de aminograma. Este método inclui a hidrólise ácida dos componentes peptídicos até a obtenção de aminoácidos livres, que são derivatizados e identificados com base no tempo de retenção de um padrão de aminoácidos por cromatografia de fase reversa (RP-UPLC). Além disso, os peptídeos desta droga foram determinados como altamente solúveis por RP-UPLC acoplado a UV, enquanto a espectrometria de massa, acoplada a RP-UPLC, exibiu padrões de ionização consistentes.

Estudos não clínicos e clínicos relevantes para esta pesquisa. Experimentalmente, em modelo murino de infecção viral, a administração de DLE mostrou diminuição das concentrações séricas de TNF e IL-6, acompanhada de aumento de IFN. Em humanos, a etiologia viral é responsável por 90-95% dos casos de infecções do trato respiratório. Os vírus comuns envolvidos em doenças respiratórias são rinovírus (∼50%), coronavírus (∼10%), adenovírus, vírus sincicial respiratório, influenza e vírus parainfluenza (que geralmente somam entre 10% a 15%), metapneumovírus humano (< 5%). A primeira evidência de que o LED poderia ter efeito terapêutico nas infecções respiratórias surgiu da análise de uma série de casos (36 adultos e 63 crianças) com rinite alérgica que receberam LED além do tratamento padrão. 11% dos adultos e 25,4% das crianças relataram uma diminuição na frequência de infecções respiratórias. Da mesma forma, em uma série de 70 adultos e 54 crianças com asma persistente moderada que receberam tratamento com LED como terapia adjuvante, 44% dos adultos e 31% das crianças relataram diminuição da frequência de infecções respiratórias, além da melhora dos sintomas alérgicos sintomas. Em um estudo com 52 indivíduos, a eficácia do LED foi avaliada reduzindo a gravidade e a frequência dos sintomas infecciosos. Esse estudo mostrou uma diminuição na frequência e na gravidade dos sintomas respiratórios infecciosos (77,1%) em pacientes pediátricos. Em comparação, 82,4% dos adultos diminuem a frequência e/ou diminuem a gravidade dos sintomas respiratórios infecciosos. Em acompanhamento clínico de pacientes pediátricos com sepse aos quais o LED foi adicionado ao tratamento padrão, diminuição dos níveis de proteína C-reativa, redução da contagem de neutrófilos em 72 horas após a internação e aumento da taxa de sobrevida de 30% relatou.

O SARS-CoV-2 induz dano pulmonar significativo devido à atividade inflamatória descontrolada e desregulada, então drogas imunomoduladoras têm sido sugeridas como tratamento. Os achados relacionados ao LED suportam sua capacidade imunomoduladora como uma ferramenta terapêutica potencial em doenças respiratórias infecciosas com componente inflamatório proeminente.

Objetivo primário. Gerar informação sobre a eficácia do LED como auxiliar no tratamento sintomático, reduzindo os sinais e sintomas de infeção respiratória aguda (casos suspeitos/confirmados de COVID-19).

Objetivos secundários.

1. Avaliar a deterioração clínica e os dados de alarme respiratório.
2. Avaliar a duração das manifestações clínicas.
3. Para explorar alterações de citocinas
4. Obter dados sobre a segurança do LED como auxiliar no tratamento sintomático da infecção respiratória aguda (casos suspeitos/confirmados de COVID-19).
5. Gerar informação para validar a escala de contingência (EC) para avaliar a gravidade da doença respiratória aguda (casos suspeitos/confirmados de COVID-19).

Hipótese. A adição de LED ao tratamento sintomático reduzirá os sinais e sintomas de infecção respiratória aguda.

O método de recrutamento será realizado eletronicamente.

A infecção respiratória aguda será classificada de acordo com seus sintomas clínicos, seguindo a Diretriz Clínica Mexicana na qual a doença COVID-19 é dividida em casos não graves e graves. A avaliação clínica do paciente será avaliada por um EC elaborado para este estudo, e inclui três itens maiores subdivididos em itens menores (variando de 0 a 4 em cada um):

Sintomas gerais: Febre, Dor de cabeça Sintomas respiratórios das vias aéreas superiores: Espirros, congestão nasal, coriza Sintomas respiratórios das vias aéreas inferiores: Tosse, Dispneia e Dor ou Sensação de constrição ou opressão no peito.

Estatisticas. Quatro populações serão consideradas para a análise: indivíduos randomizados no estudo ou conjunto completo de análise (FAS), população de segurança (SP), população da intenção de tratar (ITT) e população por protocolo (PP).

A população FAS consistirá em todos os indivíduos que foram randomizados para o estudo (a eles é atribuído um número aleatório). A população ITT consistirá em todos os pacientes que foram randomizados, que receberam pelo menos uma dose do medicamento do estudo e que tiveram pelo menos uma avaliação dos desfechos primários ou secundários após a avaliação inicial. Seguindo o princípio da intenção de tratamento, os pacientes serão analisados ​​de acordo com o tratamento atribuído durante a randomização. O SP consistirá em todos os pacientes que receberam pelo menos uma dose do medicamento do estudo e que tiveram pelo menos uma avaliação de segurança após a avaliação inicial. Os pacientes serão analisados ​​de acordo com o tratamento que receberam. Como nota esclarecedora, a afirmação de que o paciente não apresenta eventos adversos constitui uma avaliação de segurança. O PP consistirá em todos os pacientes da população ITT que concluírem todas as visitas, que tenham uma avaliação precisa da variável primária de eficácia e que não contenham violações significativas do protocolo.

Métodos estatísticos. Dados demográficos, histórico clínico e variáveis ​​de eficácia de linha de base chave para todos os pacientes randomizados serão resumidos por grupo de tratamento em tabelas (número e porcentagem) para variáveis ​​qualitativas; e em tabelas contendo a média, desvio padrão, mediana, mínimo e máximo, por grupo de tratamento, para as variáveis ​​quantitativas. Uma comparação de grupos na visita inicial será analisada usando testes qui-quadrado para variáveis ​​qualitativas e testes t de Student de duas amostras para variáveis ​​quantitativas (valores-p serão fornecidos apenas para fins descritivos). Além disso, o histórico médico, medicamentos concomitantes e comorbidades serão resumidos usando tabelas de frequência.

Resultado primário. O resultado primário de eficácia será a medição da pontuação do CS no final do tratamento ou término precoce, na população ITT. O algoritmo de imputação da última observação realizada (LOCF) será aplicado no caso de pacientes que desistem, descontinuam a terapia ou desistem do estudo. A análise primária será realizada usando a população ITT. Esta análise também será realizada na população PP para avaliar a robustez dos resultados. O resultado primário será analisado com um modelo de covariância que inclui o grupo de tratamento, o valor basal e o centro.

A hipótese exploratória do objetivo primário é estabelecer se poderia haver diferença na diminuição da pontuação do EC ao final do tratamento, sob uma abordagem de hipótese de superioridade descrita a seguir:

Ho: µPlacebo - µDLE>0 Ha: µPlacebo - µDLE<0

A possível superioridade da adição de DLE como auxílio ao tratamento sintomático em relação ao tratamento sintomático/placebo será estabelecida se o limite superior do intervalo de confiança de 95% bilateral para a diferença µPlacebo-µDLE for menor que 0.

Resultados secundários. O aparecimento de dados de alarme respiratório será identificado nos grupos de estudo, apresentando os resultados em um gráfico de frequência com a proporção de pacientes que apresentaram dados de alarme por grupo. Será analisado por meio do teste Qui-quadrado. A duração das manifestações clínicas corresponde ao número de dias com qualquer um dos sinais e sintomas descritos no EC. Estatísticas descritivas serão realizadas em cada grupo de tratamento; a comparação será feita por meio do teste t de Student. Alterações imunológicas são definidas como alterações na contagem total de leucócitos, linfócitos totais, VHS e concentração sérica de PCR, procalcitonina, dímero D, ferritina, CK, mioglobina, IL-6, TNF, interferons e anticorpos específicos para o vírus. Estatísticas descritivas serão apresentadas por grupo de tratamento vs. visita, bem como a proporção de pacientes que apresentam normalização dos valores durante o tratamento.

Tamanho da amostra. Devido à falta de informações sobre a eficácia do medicamento em estudo em casos de infecção respiratória aguda por COVID-19, o cálculo estatístico do tamanho da amostra não se aplica. No entanto, como exercício descritivo, dada a atual contingência pela pandemia de COVID-19, propõe-se neste estudo uma estimativa do tamanho da amostra com base no EC que foi especificamente desenhado para este estudo. A pontuação de contingência varia de 0 a 32, considerando que a população do estudo é de pacientes não graves, a média de pontuação corresponderá à ordem de 16 pontos com desvio padrão de 4. Também foi assumido que o comportamento da pontuação é o de um variável contínua com distribuição normal.

O procedimento de cálculo do tamanho da amostra é por meio da equação Julious 2004/FARTSSIE22 para delineamentos de superioridade em paralelo com dois grupos (DLE vs. Placebo). De acordo com os seguintes valores:

a. Erro tipo I: 0,05 (5%); b. Erro tipo II: 0,2 (20%). Poder: 1-b: 0,8 (80%) Desvio padrão proposto: 4 Diferença a detectar entre os grupos: 1 A relação do tamanho da amostra entre os grupos: 1:1 (balanceado) O tamanho da amostra calculado é de 253 por grupo. Um adicional de 10% (q) será incluído para compensar as desistências do estudo ou tratamento; portanto, 562 pacientes (nt) 281 serão randomizados por tratamento para ter o número estimado de pacientes para o teste de hipótese. nt=n/1-q =506/0,9=562

Procedimentos para explicar os dados perdidos. Dados faltantes para as variáveis ​​que são medidas em uma única ocasião não podem ser substituídos, e aquele indivíduo não pode ser incluído na análise. Para dados medidos mais de uma vez, em caso de falta de dados, será considerado o último valor medido após a linha de base. (LOCF)

Procedimentos para relatar qualquer desvio do plano estatístico. Caso existam desvios ao plano estatístico original, estes serão descritos e justificados no relatório final.

Seleção dos indivíduos a serem incluídos na análise. Todos os indivíduos randomizados que receberam pelo menos uma dose do produto experimental sob a máxima de ITT serão incluídos na análise.

Acesso a informação. O estudo será acompanhado por pessoal específico; inspeções e auditorias internas e externas serão permitidas e facilitadas, permitindo o acesso às informações, mantendo a confidencialidade dos indivíduos do estudo.