Efekt kliniczny ekstraktu z dializowanych leukocytów w przypadku podejrzenia lub potwierdzenia COVID-19 (FUTURE-T) (FUTURE-T)

Dialyzable Leukocyte Extract (DLE) (Transferon oral®) to dializowany ekstrakt otrzymywany z ludzkich leukocytów. Jego substancją czynną jest złożona mieszanina małocząsteczkowych peptydów otrzymywanych w wyniku dializy (12 kDa), a następnie ultrafiltracji (10 kDa) zlizowanych koncentratów leukocytów i płytek krwi. Ten produkt jest wytwarzany przez Laboratorium Badań Naukowych (Pharma-FT) w Narodowej Szkole Nauk Biologicznych (ENCB), Narodowym Instytucie Politechnicznym (IPN) przy użyciu opatentowanej metody w Meksyku (MX/a/2011/013852), USA (US9328152B2 ), UE (EPA-126128), Kanada (2860260), Peru (000969-2014/DIN) i Kolumbia (14138326).

DLE jest złożonym lekiem, którego substancją czynną jest wiele jednostek peptydowych. Zatem DLE nie może być w pełni scharakteryzowany, co wymaga zastosowania technik analitycznych, które mogą opisać ogólne zachowanie wszystkich jego składników (polidyspersyjność peptydów).

Do określenia masy cząsteczkowej składników peptydowych DLE na podstawie ich migracji przez matrycę polimerową zastosowano dwie techniki ortogonalne. Masę cząsteczkową 10 kDa określono metodą elektroforezy na żelu poliakryloamidowym w warunkach denaturujących (SDS-PAGE), natomiast masę cząsteczkową poniżej 15 kDa określono metodą chromatografii wykluczania molekularnego.

Peptydowy charakter DLE wykazano za pomocą metody aminogramowej. Metoda ta obejmuje kwaśną hydrolizę składników peptydowych aż do uzyskania wolnych aminokwasów, które są derywatyzowane i identyfikowane na podstawie czasu retencji standardu aminokwasowego przy użyciu chromatografii z odwróconymi fazami (RP-UPLC). Dodatkowo, peptydy tego leku określono jako wysoce rozpuszczalne za pomocą RP-UPLC sprzężonego z UV, podczas gdy spektometria mas, sprzężona z RP-UPLC, wykazywała spójne wzorce jonizacji.

Badania niekliniczne i kliniczne istotne dla tych badań. Eksperymentalnie, w mysim modelu infekcji wirusowej, podawanie DLE wykazało spadek stężenia TNF i IL-6 w surowicy, któremu towarzyszył wzrost IFN. U ludzi etiologia wirusowa odpowiada za 90-95% przypadków infekcji dróg oddechowych. Częstymi wirusami związanymi z chorobami układu oddechowego są rinowirusy (~50%), koronawirusy (~10%), adenowirusy, syncytialny wirus oddechowy, grypa i paragrypy (które na ogół sumują się między 10% a 15%), ludzki metapneumowirus (< 5%). Pierwsze dowody na to, że DLE może mieć działanie terapeutyczne w infekcjach dróg oddechowych, pojawiły się na podstawie analizy serii przypadków (36 osób dorosłych i 63 dzieci) z alergicznym nieżytem nosa, u których oprócz standardowego leczenia zastosowano DLE. Zmniejszenie częstości infekcji dróg oddechowych zgłosiło 11% dorosłych i 25,4% dzieci. Podobnie w grupie 70 dorosłych i 54 dzieci z przewlekłą astmą o umiarkowanym nasileniu, którzy otrzymywali DLE jako terapię uzupełniającą, 44% dorosłych i 31% dzieci zgłosiło zmniejszenie częstości infekcji dróg oddechowych, oprócz poprawy objawów alergicznych. objawy. W badaniu z udziałem 52 osób skuteczność DLE oceniono na podstawie zmniejszenia nasilenia i częstości objawów zakaźnych. Badanie to wykazało zmniejszenie częstości i nasilenia zakaźnych objawów ze strony układu oddechowego (77,1%) u pacjentów pediatrycznych. Dla porównania, 82,4% dorosłych zmniejsza częstość i/lub nasilenie zakaźnych objawów ze strony układu oddechowego. W obserwacji klinicznej pacjentów pediatrycznych z sepsą, u których DLE dodano do standardowego leczenia, stwierdzono zmniejszenie stężenia białka C-reaktywnego, zmniejszenie liczby neutrofilów po 72 godzinach od hospitalizacji oraz zwiększenie przeżywalności o 30%. zgłoszone.

SARS-CoV-2 powoduje znaczne uszkodzenie płuc z powodu niekontrolowanej i rozregulowanej aktywności zapalnej, dlatego jako leczenie sugerowano leki immunomodulujące. Odkrycia związane z DLE potwierdzają ich zdolność immunomodulacyjną jako potencjalne narzędzie terapeutyczne w zakaźnych chorobach układu oddechowego z wyraźnym komponentem zapalnym.

Główny cel. Uzyskanie informacji na temat skuteczności DLE jako pomocy w leczeniu objawowym, poprzez zmniejszenie objawów ostrej infekcji dróg oddechowych (podejrzenie/potwierdzone przypadki COVID-19).

Cele drugorzędne.

1. Ocena pogorszenia stanu klinicznego i danych dotyczących alarmów oddechowych.
2. Aby ocenić czas trwania objawów klinicznych.
3. Aby zbadać zmiany cytokin
4. Uzyskanie danych na temat bezpieczeństwa DLE jako środka wspomagającego leczenie objawowe ostrej infekcji dróg oddechowych (podejrzenie/potwierdzone przypadki COVID-19).
5. Generowanie informacji w celu walidacji skali kontyngencji (CS) w celu oceny ciężkości ostrej choroby układu oddechowego (podejrzewane/potwierdzone przypadki COVID-19).

Hipoteza. Dodanie DLE do leczenia objawowego zmniejszy objawy przedmiotowe i podmiotowe ostrej infekcji dróg oddechowych.

Rekrutacja odbywać się będzie drogą elektroniczną.

Ostra infekcja dróg oddechowych zostanie sklasyfikowana zgodnie z jej objawami klinicznymi, zgodnie z meksykańskimi wytycznymi klinicznymi, w których chorobę COVID-19 dzieli się na przypadki mniej poważne i ciężkie. Kliniczna ocena pacjenta zostanie oceniona za pomocą CS zaprojektowanego dla tego badania i obejmuje trzy główne pozycje podzielone na mniejsze pozycje (zakres od 0 do 4 w każdej):

Objawy ogólne: Gorączka, Ból głowy Objawy ze strony górnych dróg oddechowych: Kichanie, przekrwienie błony śluzowej nosa, katar Objawy ze strony dolnych dróg oddechowych: Kaszel, Duszność i Ból lub Uczucie ucisku w klatce piersiowej.

Statystyka. Do analizy zostaną wzięte pod uwagę cztery populacje: osoby zrandomizowane w badaniu lub w pełnym zbiorze analiz (FAS), populacja bezpieczeństwa (SP), populacja zgodna z planem leczenia (ITT) i populacja według protokołu (PP).

Populacja FAS będzie się składać ze wszystkich osób, które zostały zrandomizowane do badania (przypisano im losową liczbę). Populacja ITT będzie składać się ze wszystkich pacjentów, którzy zostali zrandomizowani, którzy otrzymali co najmniej jedną dawkę badanego leku i którzy mieli co najmniej jedną ocenę pierwszorzędowych lub drugorzędowych punktów końcowych po ocenie początkowej. Zgodnie z zasadą intencji leczenia, pacjenci będą analizowani zgodnie z leczeniem przypisanym podczas randomizacji. SP będzie składać się ze wszystkich pacjentów, którzy otrzymali co najmniej jedną dawkę badanego leku i którzy mają co najmniej jedną ocenę bezpieczeństwa po ocenie wyjściowej. Pacjenci będą analizowani zgodnie z otrzymanym leczeniem. Tytułem wyjaśnienia, oświadczenie, że u pacjenta nie występują zdarzenia niepożądane, stanowi ocenę bezpieczeństwa. PP będzie składać się ze wszystkich pacjentów w populacji ITT, którzy ukończą wszystkie wizyty, którzy mają dokładną ocenę głównej zmiennej skuteczności i którzy nie zawierają istotnych naruszeń protokołu.

Metody statystyczne. Dane demograficzne, historia kliniczna i kluczowe wyjściowe zmienne dotyczące skuteczności dla wszystkich pacjentów zrandomizowanych zostaną podsumowane według grup leczenia w tabelach (liczba i odsetek) dla zmiennych jakościowych; oraz w tabelach zawierających średnią, odchylenie standardowe, medianę, minimum i maksimum, według grupy badanej, dla zmiennych ilościowych. Porównanie grup podczas wizyty początkowej zostanie przeanalizowane przy użyciu testów chi-kwadrat dla zmiennych jakościowych i testów t-Studenta dla dwóch prób dla zmiennych ilościowych (wartości p zostaną podane wyłącznie w celach opisowych). Dodatkowo, historia medyczna, leki towarzyszące, choroby współistniejące zostaną podsumowane za pomocą tabel częstości.

Podstawowy wynik. Podstawowym wynikiem skuteczności będzie pomiar wyniku CS na koniec leczenia lub przedwczesne zakończenie leczenia w populacji ITT. Algorytm imputacji ostatniej przeniesionej obserwacji (LOCF) będzie stosowany w przypadku pacjentów, którzy wycofają się, przerwą terapię lub wycofają się z badania. Podstawowa analiza zostanie przeprowadzona z wykorzystaniem populacji ITT. Analiza ta zostanie również przeprowadzona w populacji PP w celu oceny wiarygodności wyników. Główny wynik zostanie przeanalizowany za pomocą modelu kowariancji, który obejmuje grupę leczoną, wartość wyjściową i centrum.

Hipoteza eksploracyjna głównego celu polega na ustaleniu, czy może istnieć różnica w spadku wyniku CS na koniec leczenia, zgodnie z podejściem opartym na hipotezie wyższości opisanym poniżej:

Ho: µPlacebo – µDLE>0 Ha: µPlacebo – µDLE<0

Możliwa wyższość dodania DLE jako środka wspomagającego leczenie objawowe w porównaniu z leczeniem objawowym/placebo zostanie ustalona, ​​jeżeli górna granica dwustronnego 95% przedziału ufności dla różnicy µPlacebo-µDLE będzie mniejsza niż 0.

Wyniki drugorzędne. Pojawienie się danych alarmowych dotyczących oddechu zostanie zidentyfikowane w grupach badawczych, prezentując wyniki na wykresie częstotliwości z odsetkiem pacjentów, którzy przedstawili dane alarmowe według grup. Zostanie on przeanalizowany za pomocą testu Chi-Square. Czas trwania objawów klinicznych odpowiada liczbie dni z którymkolwiek z objawów przedmiotowych i podmiotowych opisanych w CS. Statystyki opisowe zostaną przeprowadzone w każdej grupie leczenia; porównanie zostanie wykonane za pomocą testu t-Studenta. Zmiany immunologiczne definiuje się jako zmiany całkowitej liczby leukocytów, całkowitej liczby limfocytów, OB oraz stężenia w surowicy CRP, prokalcytoniny, D-dimerów, ferrytyny, CK, mioglobiny, IL-6, TNF, interferonów i swoistych przeciwciał dla wirusa. Statystyki opisowe zostaną przedstawione w podziale na grupę terapeutyczną vs. wizytę, a także odsetek pacjentów, którzy wykazują normalizację wartości w trakcie leczenia.

Wielkość próbki. Ze względu na brak informacji na temat skuteczności badanego leku w przypadkach ostrego zakażenia dróg oddechowych COVID-19 nie stosuje się statystycznego wyliczenia liczebności próby. Jednak jako ćwiczenie opisowe, biorąc pod uwagę obecną ewentualność związaną z pandemią COVID-19, w tym badaniu zaproponowano oszacowanie wielkości próby w oparciu o CS, który został specjalnie zaprojektowany dla tego badania. Wynik kontyngencji mieści się w zakresie od 0 do 32, biorąc pod uwagę, że badana populacja to pacjenci bez ciężkiego przebiegu, średnia punktacji będzie odpowiadać rzędu 16 punktów z odchyleniem standardowym równym 4. Przyjęto również, że zachowanie punktacji jest zachowaniem zmienna ciągła o rozkładzie normalnym.

Procedura obliczania wielkości próby odbywa się za pomocą równania Julious 2004/FARTSSIE22 dla projektów wyższości równolegle z dwiema grupami (DLE vs. Placebo). Według następujących wartości:

A. Błąd I rodzaju: 0,05 (5%); B. Błąd II rodzaju: 0,2 (20%). Moc: 1-b: 0,8 (80%) Proponowane odchylenie standardowe: 4 Różnica do wykrycia między grupami: 1 Zależność wielkości próby między grupami: 1:1 (zrównoważona) Obliczona wielkość próby wynosi 253 na grupę. Dodatkowe 10% (q) zostanie uwzględnione w celu zrekompensowania rezygnacji z badania lub leczenia; dlatego 562 pacjentów (nt) 281 zostanie zrandomizowanych według leczenia, aby uzyskać szacunkową liczbę pacjentów do testu hipotezy. nt=n/1-q=506/0,9=562

Procedury wyjaśniania brakujących danych. Brakujących danych dla zmiennych, które są mierzone jednorazowo, nie można zastąpić, a ta osoba nie może zostać włączona do analizy. W przypadku danych, które są mierzone więcej niż jeden raz, w przypadku braku danych, pod uwagę zostanie wzięta ostatnia wartość zmierzona po linii bazowej. (LOCF)

Procedury zgłaszania odchyleń od planu statystycznego. Ewentualne odstępstwa od pierwotnego planu statystycznego zostaną opisane i uzasadnione w raporcie końcowym.

Wybór osób do analizy. Wszystkie randomizowane osoby, które otrzymały co najmniej jedną dawkę badanego produktu zgodnie z maksymą ITT, zostaną włączone do analizy.

Dostęp do informacji. Badanie będzie monitorowane przez określony personel; wewnętrzne i zewnętrzne kontrole i audyty będą dozwolone i ułatwione, umożliwiając dostęp do informacji przy zachowaniu poufności osób biorących udział w badaniu.