Efecto clínico del extracto de leucocitos dializables en casos sospechosos o confirmados de COVID-19 (FUTURE-T) (FUTURE-T)

El extracto de leucocitos dializables (DLE) (Transferon oral®) es un extracto dializado obtenido de leucocitos humanos. Su principio activo es una mezcla compleja de péptidos de bajo peso molecular obtenidos por diálisis (12 kDa), y posterior ultrafiltración (10 kDa) de concentrados de leucocitos y plaquetas lisados. Este producto es fabricado por el Laboratorio de Investigaciones Científicas (Pharma-FT) de la Escuela Nacional de Ciencias Biológicas (ENCB), Instituto Politécnico Nacional (IPN) utilizando un método patentado en México (MX/a/2011/013852), EE. UU. (US9328152B2 ), UE (EPA-126128), Canadá (2860260), Perú (000969-2014/DIN) y Colombia (14138326).

DLE es un fármaco complejo, el principio activo son múltiples unidades peptídicas. Por lo tanto, DLE no puede caracterizarse por completo, lo que requiere la aplicación de técnicas analíticas que puedan describir el comportamiento general de todos sus componentes (polidispersidad peptídica).

Se han utilizado dos técnicas ortogonales para determinar el peso molecular de los componentes peptídicos de DLE en función de su migración a través de una matriz polimérica. El peso molecular de 10 kDa se determinó por electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE), mientras que un peso molecular inferior a 15 kDa se determinó por cromatografía de exclusión molecular.

La naturaleza peptídica de DLE se ha demostrado utilizando un método de aminograma. Este método incluye la hidrólisis ácida de los componentes peptídicos hasta la obtención de aminoácidos libres, los cuales se derivatizan e identifican en función del tiempo de retención de un estándar de aminoácidos mediante cromatografía de fase inversa (RP-UPLC). Además, se determinó que los péptidos de este fármaco eran altamente solubles mediante RP-UPLC acoplada a UV, mientras que la espectrometría de masas, acoplada a RP-UPLC, exhibió patrones de ionización consistentes.

Estudios no clínicos y clínicos relevantes para esta investigación. Experimentalmente, en un modelo murino de infección por virus, la administración de DLE mostró una disminución de las concentraciones séricas de TNF e IL-6, acompañada de un aumento de IFN. En humanos, la etiología viral es responsable del 90-95% de los casos de infecciones del tracto respiratorio. Los virus comunes involucrados en las enfermedades respiratorias son los rinovirus (∼50 %), los coronavirus (∼10 %), los adenovirus, el virus respiratorio sincitial, los virus de la influenza y la parainfluenza (que generalmente suman entre el 10 % y el 15 %), el metapneumovirus humano (< 5 %). La primera evidencia de que el LED podría tener un efecto terapéutico en las infecciones respiratorias surgió del análisis de una serie de casos (36 adultos y 63 niños) con rinitis alérgica que recibieron LED además del tratamiento estándar. El 11% de los adultos y el 25,4% de los niños reportaron una disminución en la frecuencia de infecciones respiratorias. Asimismo, en una serie de 70 adultos y 54 niños con asma persistente moderada que recibieron tratamiento con ELD como terapia adyuvante, el 44% de los adultos y el 31% de los niños reportaron una disminución en la frecuencia de infecciones respiratorias, además de la mejoría de las alergias. síntomas. En un estudio de 52 personas, se evaluó la eficacia de DLE al reducir la gravedad y la frecuencia de los síntomas infecciosos. Ese estudio mostró una disminución en la frecuencia y en la severidad de los síntomas respiratorios infecciosos (77,1%) en pacientes pediátricos. En comparación, el 82,4% de los adultos disminuyen la frecuencia y/o la gravedad de los síntomas respiratorios infecciosos. En un seguimiento clínico de pacientes pediátricos con sepsis a los que se añadió LED al tratamiento estándar se observó disminución de los niveles de proteína C reactiva, reducción del recuento de neutrófilos a las 72 horas de la hospitalización y aumento de la supervivencia del 30%. informado.

El SARS-CoV-2 induce un daño pulmonar significativo debido a la actividad inflamatoria descontrolada y desregulada, por lo que se han sugerido fármacos inmunomoduladores como tratamiento. Los hallazgos relacionados con el LED, avalan su capacidad inmunomoduladora como potencial herramienta terapéutica en enfermedades respiratorias infecciosas con un componente inflamatorio destacado.

Objetivo principal. Generar información sobre la eficacia del ELD como coadyuvante en el tratamiento sintomático, al reducir los signos y síntomas de infección respiratoria aguda (casos sospechosos/confirmados de COVID-19).

Metas secundarias.

1. Evaluar deterioro clínico y datos de alarma respiratoria.
2. Evaluar la duración de las manifestaciones clínicas.
3. Para explorar los cambios de citoquinas
4. Obtener datos sobre la seguridad de DLE como ayuda en el tratamiento sintomático de la infección respiratoria aguda (casos sospechosos/confirmados de COVID-19).
5. Generar información para validar la escala de contingencia (CS) para evaluar la gravedad de la enfermedad respiratoria aguda (casos sospechosos/confirmados de COVID-19).

Hipótesis. La adición de LED al tratamiento sintomático reducirá los signos y síntomas de infección respiratoria aguda.

El método de contratación se realizará por vía electrónica.

La infección respiratoria aguda se clasificará de acuerdo a su sintomatología clínica, siguiendo la Guía Clínica Mexicana en la que la enfermedad por COVID-19 se divide en casos no graves y casos graves. La evaluación clínica del paciente será valorada por un EC diseñado para este estudio, e incluye tres ítems mayores subdivididos en ítems menores (rango de 0 a 4 en cada uno):

Síntomas generales: fiebre, dolor de cabeza Síntomas respiratorios de las vías respiratorias superiores: estornudos, congestión nasal, secreción nasal Síntomas respiratorios de las vías respiratorias inferiores: tos, disnea y dolor o sensación de constricción u opresión en el pecho.

Estadísticas. Se considerarán cuatro poblaciones para el análisis: individuos aleatorizados en el estudio o conjunto de análisis completo (FAS), población de seguridad (SP), población por intención de tratar (ITT) y población por protocolo (PP).

La población FAS consistirá en todos los individuos que fueron aleatorizados en el estudio (se les asigna un número aleatorio). La población ITT consistirá en todos los pacientes que fueron aleatorizados, que recibieron al menos una dosis del fármaco del estudio y que tuvieron al menos una evaluación de los criterios de valoración primarios o secundarios después de la evaluación inicial. Siguiendo el principio de la intención de tratamiento, los pacientes serán analizados según el tratamiento asignado durante la aleatorización. El SP estará compuesto por todos los pacientes que recibieron al menos una dosis del fármaco del estudio y que tienen al menos una evaluación de seguridad después de la evaluación inicial. Los pacientes serán analizados de acuerdo al tratamiento que recibieron. Como nota aclaratoria, la declaración de que el paciente no tiene eventos adversos constituye una evaluación de seguridad. El PP estará compuesto por todos los pacientes de la población ITT que completen todas las visitas, que tengan una evaluación precisa de la variable principal de eficacia y que no contengan violaciones significativas del protocolo.

Métodos de estadística. Los datos demográficos, el historial clínico y las variables clave de eficacia inicial para todos los pacientes aleatorizados se resumirán por grupo de tratamiento en tablas (número y porcentaje) para las variables cualitativas; y en tablas que contienen el promedio, desviación estándar, mediana, mínimo y máximo, por grupo de tratamiento, para las variables cuantitativas. Se analizará una comparación de grupos en la visita inicial mediante pruebas de chi-cuadrado para variables cualitativas y pruebas t de Student de dos muestras para variables cuantitativas (los valores de p se proporcionarán solo con fines descriptivos). Adicionalmente se resumirán la historia clínica, medicamentos concomitantes, comorbilidades mediante tablas de frecuencia.

Resultado primario. El resultado primario de eficacia será la medición de la puntuación de la CS al final del tratamiento o terminación temprana, en la población ITT. Se aplicará el algoritmo de imputación de la última observación realizada (LOCF) en el caso de pacientes que se retiren, interrumpan la terapia o se retiren del estudio. El análisis principal se realizará utilizando la población ITT. Este análisis también se realizará en la población PP para evaluar la solidez de los resultados. El resultado primario se analizará con un modelo de covarianza que incluye el grupo de tratamiento, el valor inicial y el centro.

La hipótesis exploratoria del objetivo primario es establecer si podría existir una diferencia en la disminución del puntaje del SC al final del tratamiento, bajo un enfoque de hipótesis de superioridad que se describe a continuación:

Ho: µPlacebo - µDLE>0 Ha: µPlacebo - µDLE<0

Se establecerá la posible superioridad de la adición de DLE como ayuda para el tratamiento sintomático en relación con el tratamiento sintomático/placebo si el límite superior del intervalo de confianza del 95 % bilateral para la diferencia µPlacebo-µDLE es inferior a 0.

Resultados secundarios. Se identificará la aparición de datos de alarma respiratoria en los grupos de estudio, presentando los resultados en un gráfico de frecuencia con la proporción de pacientes que presentaron datos de alarma por grupo. Se analizará mediante la prueba Chi-Cuadrado. La duración de las manifestaciones clínicas corresponde al número de días con alguno de los signos y síntomas descritos en la SC. Se realizarán estadísticas descriptivas en cada grupo de tratamiento; la comparación se realizará mediante la prueba t de Student. Los cambios inmunológicos se definen como cambios en el recuento total de leucocitos, linfocitos totales, ESR y concentración sérica de PCR, procalcitonina, dímero D, ferritina, CK, mioglobina, IL-6, TNF, interferones y anticuerpos específicos para el virus. Se presentarán estadísticas descriptivas por grupo de tratamiento vs. visita, así como la proporción de pacientes que muestran normalización de valores durante el tratamiento.

Tamaño de la muestra. Debido a la falta de información sobre la eficacia del fármaco en estudio en casos de infección respiratoria aguda por COVID-19, no aplica el cálculo estadístico del tamaño de la muestra. Sin embargo, como ejercicio descriptivo, dada la contingencia actual por la pandemia del COVID-19, en este estudio se propone una estimación del tamaño de la muestra en base al SC que ha sido diseñado específicamente para este estudio. El puntaje de contingencia va de 0 a 32, considerando que la población de estudio son pacientes no graves, el promedio de puntaje corresponderá al orden de 16 puntos con una desviación estándar de 4. También se ha asumido que el comportamiento de puntaje es el de un variable continua con distribución normal.

El procedimiento de cálculo del tamaño de la muestra es mediante la ecuación Julious 2004/FARTSSIE22 para diseños de superioridad en paralelo con dos grupos (DLE vs. Placebo). Según los siguientes valores:

a. error tipo I: 0,05 (5%); b. Error tipo II: 0,2 (20%). Potencia: 1-b: 0,8 (80 %) Desviación estándar propuesta: 4 Diferencia a detectar entre grupos: 1 Relación del tamaño de la muestra entre grupos: 1:1 (equilibrada) El tamaño de la muestra calculado es de 253 por grupo. Se incluirá un 10% (q) adicional para compensar las bajas del estudio o tratamiento; por lo tanto, 562 pacientes (nt) 281 serán aleatorizados por tratamiento para tener el número estimado de pacientes para la prueba de hipótesis. nt=n/1-q =506/0.9=562

Procedimientos para explicar los datos faltantes. Los datos faltantes de las variables que se miden en una sola ocasión no se pueden sustituir, y ese individuo no se puede incluir en el análisis. Para los datos que se miden más de una vez, en caso de que falten datos, se tendrá en cuenta el último valor medido después de la línea de base. (LOCF)

Procedimientos para informar cualquier desviación del plan estadístico. Si existen desviaciones del plan estadístico original, estas serán descritas y justificadas en el informe final.

Selección de individuos a incluir en el análisis. Se incluirán en el análisis todos los individuos aleatorizados que hayan recibido al menos una dosis del producto en investigación bajo la máxima ITT.

Acceso a la información. El estudio será monitoreado por personal específico; Se permitirán y facilitarán las inspecciones y auditorías internas y externas, permitiendo el acceso a la información manteniendo la confidencialidad de los sujetos del estudio.