Napanuoran mesenkymaalisten kantasolueksosomien turvallisuus ja teho kroonisen yskän hoidossa COVID-19:n jälkeen

1. Taustaa 1.1 COVID-19:n jälkeinen oireyhtymä, joka tunnetaan myös nimellä Long Covid, aiheuttaa edelleen suuria ongelmia yleisölle huolimatta siitä, että Kiina on ylittänyt menestyksekkäästi ensimmäisen vakavan akuutin hengitystieoireyhtymän koronavirus 2:n (SARS-CoV-2) aiheuttaman infektioaallon. kolme vuotta, mikä on johtanut yli 5 miljoonan kuolemantapaukseen maailmanlaajuisesti.

   Pitkä Covid on monisysteeminen sairaus, joka sisältää useita vakavia oireita, jotka jatkuvat COVID-19-tartunnan jälkeen, kuten (1) sydämeen liittyvät oireet: rintakipu, sydämentykytys; (2) hengitystieoireet: yskä, hengenahdistus, maun tai hajun menetys; (3) haimaoireet: diabetes, haimavaurio; (4) immuunijärjestelmä: autoimmuniteetti, syöttösoluaktivaatio-oireyhtymä MCAS; (5) neurologiset oireet: kognitiivinen heikentyminen (aivojen sumu), väsymys, unihäiriöt, muistin menetys, tinnitus; (6) verisuonioireet: väsymys, hyytymishäiriöt, syvä laskimotukos, endoteelin toimintahäiriö, mikrovaskulaarinen sairaus, aivohalvaus; (7) lisääntymisoireet: erektiohäiriöt, kuukautiskiertohäiriöt jne., jotka vaikuttavat vakavasti potilaan jokapäiväiseen elämään. Pitkä Covid voi esiintyä kaiken ikäisillä ihmisillä, ja sen kehittymisen todennäköisyys liittyy läheisesti akuutin COVID-19-infektion vakavuuteen. Tärkeimmät riskitekijät, jotka voivat laukaista Long Covidin, ovat (1) tyypin II diabetes, (2) korkea viruskuorma COVID-19-infektion aikana, (3) aiempi EB-virusinfektio ja (4) liialliset spesifiset autovasta-aineet. COVID-19:n hoitostrategioihin kuuluu pääasiassa viruslääkkeiden käyttö estämään viruksen replikaatiosykli ja erilaisia ​​menetelmiä isännän tulehduksen hillitsemiseksi oireiden parantamiseksi. Tällä hetkellä klinikoilla käytettävät perinteiset immunoterapiamenetelmät sisältävät pääasiassa hormonien, monoklonaalisten vasta-ainelääkkeiden jne. käyttöä, mutta ne on suunnattu pääasiassa vakavampiin tulehdusreaktioihin ja kärsivät alhaisesta hyötyosuudesta, korkeista kustannuksista ja merkittävistä sivuvaikutuksista, mikä tekee niistä sopimattomia. pitkän COVID-taudin hoitoon. Siksi uusien immuunisäätelymenetelmien kehittäminen, joilla on vähäisiä sivuvaikutuksia ja kustannuksia, olisi merkittävää pitkän COVID-taudin hoidossa.

   1.2 Mesenkymaaliset kantasolut (MSC:t) MSC:illä on osoitettu olevan kattavat ja tehokkaat immuunisäätely- ja regeneratiiviset toiminnot. MSC:t voivat torjua kroonisen obstruktiivisen keuhkosairauden (COPD), idiopaattisen keuhkofibroosin, astman, ARDS:n ja keuhkoverenpainetaudin patogeneesiin liittyvää solukuolemaa ja edistää solujen regeneraatiota. Eksosomit ovat yksi tärkeimmistä MSC:iden erittämistä parakriinisista efektoreista, ja niitä pidetään tehokkaina ehdokkaina eri sairauksien vaihtoehtoiseen hoitoon, koska niiden biologinen materiaali on kuin esisolujen biologinen materiaali ja niillä on kyky ylläpitää parantavia ominaisuuksia. Fysiologisissa ja patologisissa olosuhteissa eksosomeilla on kriittinen rooli solujen välisessä viestinnässä kuljettamalla erilaisia ​​biomolekyylejä (kuten miRNA:ta ja proteiineja) kohdesoluihin.

   1.3 MSC-peräisten eksosomien mekanismi MSC-peräiset eksosomit perivät immunosuppressiiviset ominaisuudet lähdesoluistaan. MSC-EV:t voivat käyttää useita mekanismeja immuunijärjestelmän toiminnan tasapainottamiseksi. Yksi keskeinen mekanismi on erilaisten immuunisolujen fenotyypin uudelleenohjelmointi ja muuttaminen.

   Useissa malleissa MSC-eksosomeilla on samanlaisia ​​terapeuttisia ominaisuuksia kuin MSC:illä, ja ne on helpompi valmistaa, varastoida ja kuljettaa sängyn viereen, samalla kun vältetään joitain soluhoidon rajoituksia, kuten keuhkoembolian ja kasvaimen muodostumisen riskiä. MSC:iden erittämät eksosomit voivat säädellä immuniteettia vuorovaikutuksessa immuunisolujen kanssa ja estää tulehdusreaktioita sytokiinien kautta. Lukuisat tutkimukset ovat osoittaneet, että MSC:iden erittämiä eksosomeja voidaan käyttää immuunipuutoksen, tulehduksen, ARDS:n ja muiden keuhkosairauksien hoitoon, joten MSC:iden erittämät eksosomit voivat olla tehokkaita myös COVID-19-infektioiden ja keuhkokuumeen hoidossa. Perinteinen kantasoluhoidon menetelmä on suonensisäinen injektio, ja eksosomit ovat yksi tärkeimmistä aktiivisista komponenteista, joita kooltaan 30-150 nm kantasolut erittävät. Nebulisoinnin jälkeen eksosomit voivat saavuttaa suoraan keuhkoputkien ja keuhkorakkuloiden, mikä edistää lääkkeen imeytymisen maksimoimista.

   1.4 MSC-peräisen eksosomihoidon kliiniset tapaukset Kiina on myös aktiivisesti käynnistänyt asiaankuuluvia kliinisiä tutkimuksia. Kliininen tutkimus Wuxin viidennessä kansansairaalassa Jiangsun maakunnassa vahvisti, että sumutetut napanuoran mesenkymaaliset kantasoluista peräisin olevat eksosomit ovat turvallisia ja käyttökelpoisia COVID-19-keuhkokuumeen hoidossa. Ruijin Hospitalin ja Jin Yin-tan Hospitalin tutkijat suorittivat yhdessä sumutettua eksosomiterapiaa COVID-19:lle käyttämällä eksosomeja, jotka olivat peräisin ihmisen allogeenisista rasvamesenkymaalisista kantasoluista (HAMSCs-Exos). Äskettäin inhaloitava anti-COVID-19-lääke Exo-CD24, eksosomien ja CD24-proteiinin yhdistelmä, on osoittanut lupaavia tuloksia vaiheen I kliinisessä tutkimuksessa, jota johti Israelin lääkärikeskuksen asiantuntija Nadir Arber. Tutkimuksen 30 kriittisesti sairaasta vapaaehtoisesta 29 parantui viiden päivän hoidon jälkeen. Vaikka Exo-CD24 ei ole vielä läpäissyt vaiheen III testausta, se on jo osoittanut valtavan tulevaisuuden potentiaalin. Yhdysvaltain FDA on hyväksynyt Direct Biologicsin aloittamaan vaiheen I/II kokeen ExoFlo™:n arvioimiseksi COVID-19:n hoidossa. Tämä on ensimmäinen kerta, kun Yhdysvaltain FDA on hyväksynyt ekstrasellulaariset vesikkelit (EVS) taudin hoitoon.

2. Tutkimuksen tarkoitus Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida napanuoran mesenkymaalisten kantasolujen eksosomi-sumutusinhalaation turvallisuutta ja tehokkuutta kroonisen yskän hoidossa potilailla COVID-19-infektion jälkeen satunnaistetun kontrolloidun kliinisen tutkimuksen avulla.
3. Tutkimuksen suunnittelu Tutkimussuunnitelma on prospektiivinen, ei-satunnaistettu, samanaikainen kontrolloitu tutkimus. Kliinisten ohjeiden mukaisen COVID-19-infektion rutiinihoito-ohjelman perusteella koeryhmässä käytetään napanuoran mesenkymaalisten kantasolujen eksosomi-sumutusinhalaatiota kroonisen yskän hoitoon potilailla COVID-19-infektion jälkeen. Koeryhmää (n=40) ja kontrolliryhmää (n=40) verrataan potilaisiin, jotka eivät saaneet eksosomi-sumutusinhalaatiohoitoa samana ajanjaksona. Napanuoran mesenkymaalisten kantasolujen eksosomi-sumutusinhalaation turvallisuutta ja tehokkuutta kroonisen yskän hoidossa potilailla COVID-19-infektion jälkeen arvioidaan yskän vakavuustutkimuksilla, oireiden paranemisajalla ja haittatapahtumien esiintymisellä.

3.1 Tutkimuspopulaatio Tutkimukseen otetaan yhteensä 80 osallistujaa, ja koeryhmän (n=40) ja kontrolliryhmän (n=40) suhde on 1:1. Tutkimuspopulaatio koostuu COVID-19-tartunnan saaneista potilaista, jotka täyttävät valintakriteerit ja joita hoidetaan Eteläisen lääketieteellisen yliopiston Shenzhenin sairaalan COVID-19-kuntoutuspoliklinikalla.

3.2 Ryhmittely (1) Kokeellinen ryhmä: Napanuoran mesenkymaalisten kantasolujen eksosomivalmisteen sumutusinhalaatio; spesifikaatio: 5ml, eksosomipitoisuus valmistuksessa on 1*10^9 hiukkasta/ml.

(2) Kontrolliryhmä: Saman ajanjakson potilaat, jotka eivät saaneet kantasolueksosomeilla hoitoa.