A köldökzsinór mezenchimális őssejt exoszómák biztonsága és hatékonysága a krónikus köhögés kezelésében a COVID-19 után

1. Háttér 1.1 A COVID-19 utáni szindróma, más néven Long Covid, még mindig nagy gondot okoz a lakosságnak annak ellenére, hogy Kína már több mint sikeresen túljutott a súlyos akut légúti szindróma koronavírus 2 (SARS-CoV-2) által okozott fertőzés első hullámán. három év, ami több mint 5 millió halálesetet okozott világszerte.

   A Long Covid egy többrendszerű betegség, amely számos súlyos tünetet foglal magában, amelyek a COVID-19 fertőzés után is fennállnak, mint például (1) szívvel kapcsolatos tünetek: mellkasi fájdalom, szívdobogásérzés; (2) légúti tünetek: köhögés, légszomj, íz- vagy szaglásvesztés; (3) hasnyálmirigy-tünetek: cukorbetegség, hasnyálmirigy-sérülés; (4) immunrendszer: autoimmunitás, hízósejt aktivációs szindróma MCAS; (5) neurológiai tünetek: kognitív károsodás (agyköd), fáradtság, alvászavarok, memóriavesztés, fülzúgás; (6) érrendszeri tünetek: fáradtság, véralvadási zavarok, mélyvénás trombózis, endothel diszfunkció, mikrovaszkuláris betegség, stroke; (7) reproduktív tünetek: merevedési zavar, menstruációs zavarok stb., amelyek súlyosan befolyásolják a beteg mindennapi életét. A hosszú Covid minden korosztályban előfordulhat, és a kialakulásának valószínűsége szorosan összefügg az akut COVID-19 fertőzés súlyosságával. A fő kockázati tényezők, amelyek kiválthatják a Long Covidot, a következők: (1) II-es típusú cukorbetegség, (2) magas vírusterhelés a COVID-19 fertőzés során, (3) korábbi EB vírusfertőzés és (4) túlzott specifikus autoantitestek. A COVID-19 kezelési stratégiái főként vírusellenes gyógyszerek alkalmazását foglalják magukban a vírus replikációs ciklusának blokkolására, valamint különféle módszereket a gazdaszervezet gyulladásának visszaszorítására a tünetek javítása érdekében. A klinikákon jelenleg alkalmazott hagyományos immunterápiás módszerek elsősorban hormonok, monoklonális antitestek stb. alkalmazását foglalják magukban, de főként a súlyosabb gyulladásos reakciókat célozzák, alacsony biohasznosulást, magas költségeket és jelentős mellékhatásokat okoznak, így alkalmatlanok. hosszú COVID kezelésére. Ezért új, alacsony mellékhatásokkal és költséggel járó immunszabályozási módszerek kifejlesztése jelentős lenne a hosszú COVID kezelésében.

   1.2 Mesenchymális őssejtek (MSC) Az MSC-kről kimutatták, hogy átfogó és erőteljes immunszabályozó és regeneráló funkciókkal rendelkeznek. Az MSC-k ellensúlyozhatják a krónikus obstruktív tüdőbetegség (COPD), idiopátiás tüdőfibrózis, asztma, ARDS és pulmonális hipertónia patogeneziséhez kapcsolódó sejthalált, és elősegíthetik a sejtregenerációt. Az exoszómák az egyik kulcsfontosságú parakrin effektor, amelyet az MSC-k választanak ki, és hatékony jelölteknek tekintik őket különböző betegségek alternatív kezelésében, mivel biológiai anyaguk olyan, mint az őssejteké, és képesek megőrizni gyógyító tulajdonságaikat. Fiziológiás és patológiás körülmények között az exoszómák kritikus szerepet játszanak az intercelluláris kommunikációban azáltal, hogy különféle biomolekulákat (például miRNS-t és fehérjéket) szállítanak a célsejtekbe.

   1.3. Az MSC-eredetű exoszómák mechanizmusa Az MSC-eredetű exoszómák immunszuppresszív tulajdonságokat örökölnek a forrássejtektől. Az MSC-EV-k többféle mechanizmust is alkalmazhatnak az immunrendszer működésének kiegyensúlyozására. Az egyik kulcsmechanizmus a különféle immunsejtek fenotípusának átprogramozása és megváltoztatása.

   Több modellben az MSC-exoszómák az MSC-ekhez hasonló terápiás tulajdonságokkal rendelkeznek, és könnyebben elkészíthetők, tárolhatók és az ágy mellé szállíthatók, miközben elkerülik a sejtterápia bizonyos korlátozásait, például a tüdőembólia és a daganatképződés kockázatát. Az MSC-k által kiválasztott exoszómák szabályozhatják az immunitást az immunsejtekkel való kölcsönhatás révén, és gátolhatják a gyulladásos reakciókat a citokineken keresztül. Számos tanulmány kimutatta, hogy az MSC-k által szekretált exoszómák felhasználhatók immunhiány, gyulladás, ARDS és más tüdőbetegségek kezelésére, így az MSC-k által kiválasztott exoszómák a COVID-19 fertőzések és a tüdőgyulladás kezelésében is hatékonyak lehetnek. Az őssejtterápia hagyományos módszere az intravénás injekció, és az exoszómák a 30-150 nm méretű őssejtek által kiválasztott egyik fő aktív komponens. Porlasztás után az exoszómák közvetlenül elérhetik a hörgőket és az alveolusokat, ami elősegíti a gyógyszer felszívódásának maximalizálását.

   1.4 Az MSC-eredetű exoszómaterápia klinikai esetei Kína szintén aktívan indított releváns klinikai vizsgálatokat. A Jiangsu tartományban található Wuxi Fifth People's Hospital klinikai vizsgálata megerősítette, hogy a porlasztott köldökzsinór-mezenchimális őssejt-eredetű exoszómák biztonságosak és megvalósíthatók a COVID-19 tüdőgyulladás kezelésében. A Ruijin Kórház és a Jin Yin-tan Kórház kutatói közösen porlasztott exoszómaterápiát végeztek a COVID-19 ellen humán allogén zsírszövet mezenchimális őssejtekből (HAMSCs-Exos) származó exoszómák felhasználásával. A közelmúltban az Exo-CD24, az exoszómák és a CD24 fehérje kombinációja, az inhalált COVID-19 elleni gyógyszer ígéretes eredményeket mutatott az I. fázisú klinikai vizsgálatban, amelyet Nadir Arber, az izraeli egészségügyi központ szakértője vezetett. A vizsgálatban részt vevő 30 kritikus állapotú önkéntes közül 29 gyógyult meg ötnapos kezelés után. Bár az Exo-CD24 még nem ment át a III. fázisú tesztelésen, máris óriási lehetőségeket mutatott a jövőre nézve. Az amerikai FDA jóváhagyta a Direct Biologics céget, hogy megkezdje az I/II. fázisú vizsgálatot az ExoFlo™ COVID-19 kezelésének értékelésére. Ez az első alkalom, hogy az extracelluláris vezikulákat (EVS) engedélyezte az amerikai FDA a betegség kezelésére.

2. A kutatás célja A tanulmány célja a köldökzsinór-mezenchimális őssejt exoszóma porlasztásos inhaláció biztonságosságának és hatékonyságának értékelése COVID-19 fertőzés utáni krónikus köhögés kezelésében egy nem randomizált, kontrollált klinikai vizsgálaton keresztül.
3. A vizsgálat tervezése A vizsgálati terv egy prospektív, nem randomizált, egyidejű, kontrollált vizsgálat. A COVID-19 fertőzés klinikai irányelveinek megfelelő rutin kezelési rendje alapján a kísérleti csoportban köldökzsinór-mezenchimális őssejt exoszóma porlasztásos inhalációt alkalmaznak a COVID-19 fertőzés utáni krónikus köhögés kezelésére. A kísérleti csoportot (n=40) és a kontrollcsoportot (n=40) összehasonlítjuk azokkal a betegekkel, akik ugyanabban az időszakban nem kaptak exoszóma nebulizációs inhalációs terápiát. A köldökzsinór-mezenchimális őssejt exoszóma porlasztásos inhaláció biztonságosságát és hatékonyságát a krónikus köhögés kezelésére COVID-19 fertőzés utáni betegeknél a köhögés súlyossági pontszámának felmérése, a tünetek javulásának ideje és a nemkívánatos események előfordulása alapján értékelik.

3.1 A vizsgálati populáció A vizsgálatba összesen 80 résztvevőt vonnak be, a kísérleti csoport (n=40) és a kontrollcsoport (n=40) aránya 1:1. A vizsgálati populáció olyan COVID-19-fertőzött betegekből áll, akik megfelelnek a kiválasztási kritériumoknak, és akiket a Southern Medical University Shenzhen Kórházának COVID-19 rehabilitációs ambulanciáján kezelnek.

3.2 Csoportosítás (1) Kísérleti csoport: Köldökzsinór mesenchymalis őssejt exoszóma preparálása porlasztásos inhalációval; specifikáció: 5ml, exoszóma koncentráció a készítményben 1*10^9 részecske/ml.

(2) Kontroll csoport: Azok a betegek, akik ugyanabban az időszakban nem részesültek őssejt exoszómákkal történő kezelésben.