Безопасность и эффективность экзосом мезенхимальных стволовых клеток пуповины при лечении хронического кашля после COVID-19

1. Исходная информация 1.1 Синдром пост-COVID-19, также известный как Long Covid, по-прежнему вызывает большие проблемы у населения, несмотря на то, что Китай успешно преодолел первую волну инфекции, вызванной коронавирусом тяжелого острого респираторного синдрома 2 (SARS-CoV-2) в течение более три года, в результате чего во всем мире погибло более 5 миллионов человек.

   Длительный Covid — это мультисистемное заболевание, которое включает в себя множество тяжелых симптомов, сохраняющихся после заражения COVID-19, таких как (1) симптомы, связанные с сердцем: боль в груди, учащенное сердцебиение; (2) респираторные симптомы: кашель, одышка, потеря вкуса или обоняния; (3) симптомы поджелудочной железы: диабет, повреждение поджелудочной железы; (4) иммунная система: аутоиммунитет, синдром активации тучных клеток MCAS; (5) неврологические симптомы: когнитивные нарушения (туман в голове), утомляемость, нарушения сна, потеря памяти, шум в ушах; (6) сосудистые симптомы: утомляемость, нарушения коагуляции, тромбоз глубоких вен, дисфункция эндотелия, микрососудистые заболевания, инсульт; (7) репродуктивные симптомы: эректильная дисфункция, нарушения менструального цикла и т. д., которые сильно влияют на повседневную жизнь пациента. Длительный Covid может возникнуть у людей всех возрастов, и вероятность его развития тесно связана с тяжестью острой инфекции COVID-19. Основные факторы высокого риска, которые могут спровоцировать длительный Covid, включают (1) диабет II типа, (2) высокую вирусную нагрузку во время инфекции COVID-19, (3) предшествующую инфекцию вирусом ЭБ и (4) избыточное количество специфических аутоантител. Стратегии лечения COVID-19 в основном включают использование противовирусных препаратов для блокировки цикла репликации вируса и различные методы подавления воспаления хозяина для улучшения симптомов. В настоящее время традиционные методы иммунотерапии, используемые в клиниках, в основном включают использование гормонов, препаратов моноклональных антител и т. д., но они в основном нацелены на более тяжелые воспалительные реакции и имеют низкую биодоступность, высокую стоимость и значительные побочные эффекты, что делает их неприемлемыми. для лечения затяжного COVID. Поэтому разработка новых иммунорегулирующих методов с низкими побочными эффектами и низкой стоимостью будет иметь большое значение для лечения затяжного COVID.

   1.2 Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) Было показано, что МСК обладают обширными и мощными иммунорегуляторными и регенеративными функциями. МСК могут противодействовать гибели клеток, связанной с патогенезом хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), идиопатического легочного фиброза, астмы, ОРДС и легочной гипертензии, и способствовать регенерации клеток. Экзосомы являются одним из ключевых паракринных эффекторов, секретируемых МСК, и считаются мощными кандидатами для альтернативного лечения различных заболеваний, поскольку их биологический материал подобен материалу клеток-предшественников и они обладают способностью сохранять лечебные свойства. В физиологических и патологических условиях экзосомы играют критическую роль в межклеточной коммуникации, транспортируя различные биомолекулы (такие как микроРНК и белки) в клетки-мишени.

   1.3 Механизм экзосом, происходящих из МСК Экзосомы, происходящие из МСК, наследуют иммуносупрессивные свойства своих исходных клеток. MSC-EV могут использовать несколько механизмов для балансировки функции иммунной системы. Одним из ключевых механизмов является перепрограммирование и изменение фенотипа различных иммунных клеток.

   В нескольких моделях МСК-экзосомы обладают терапевтическими свойствами, аналогичными МСК, и их легче готовить, хранить и транспортировать к постели, избегая при этом некоторых ограничений клеточной терапии, таких как риск легочной эмболии и образования опухоли. Экзосомы, секретируемые МСК, могут регулировать иммунитет посредством взаимодействия с иммунными клетками и ингибировать воспалительные реакции посредством цитокинов. Многочисленные исследования показали, что экзосомы, секретируемые МСК, можно использовать для лечения иммунодефицита, воспалений, ОРДС и других заболеваний легких, поэтому экзосомы, секретируемые МСК, также могут быть эффективны при лечении инфекций COVID-19 и пневмонии. Традиционным методом терапии стволовыми клетками является внутривенная инъекция, а экзосомы являются одним из основных активных компонентов, секретируемых стволовыми клетками размером 30-150 нм. После распыления экзосомы могут напрямую достигать бронхиол и альвеол, что способствует максимальному всасыванию лекарств.

   1.4. Клинические случаи терапии экзосомами, полученными из МСК. Китай также активно проводит соответствующие клинические исследования. Клиническое исследование, проведенное в пятой народной больнице Уси в провинции Цзянсу, подтвердило, что экзосомы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток пуповины, которые распыляются через небулайзер, безопасны и применимы для лечения пневмонии, вызванной COVID-19. Исследователи из больницы Ruijin и больницы Jin Yin-tan совместно провели ингаляционную экзосомную терапию COVID-19 с использованием экзосом, полученных из аллогенных жировых мезенхимальных стволовых клеток человека (HAMSCs-Exos). Недавно ингаляционный препарат против COVID-19 Exo-CD24, представляющий собой комбинацию экзосом и белка CD24, показал многообещающие результаты в фазе I клинических испытаний под руководством эксперта израильского медицинского центра Надира Арбера. Из 30 тяжелобольных добровольцев, участвовавших в исследовании, 29 вылечились после пяти дней лечения. Хотя Exo-CD24 еще не прошел этап испытаний III, он уже продемонстрировал огромный потенциал на будущее. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США одобрило Direct Biologics для начала испытаний I/II фазы для оценки ExoFlo™ для лечения COVID-19. Это первый случай, когда внеклеточные везикулы (EVS) были одобрены FDA США для лечения этого заболевания.

2. Цель исследования Целью данного исследования является оценка безопасности и эффективности ингаляционного распыления экзосом мезенхимальных стволовых клеток пуповины для лечения хронического кашля у пациентов после инфекции COVID-19 посредством нерандомизированного контролируемого клинического исследования.
3. Дизайн исследования Дизайн исследования представляет собой проспективное нерандомизированное параллельное контролируемое исследование. Основываясь на рутинной схеме лечения инфекции COVID-19 в соответствии с клиническими рекомендациями, в экспериментальной группе для лечения хронического кашля у пациентов, перенесших инфекцию COVID-19, будет использоваться ингаляция экзосом мезенхимальных стволовых клеток пуповины. Экспериментальную группу (n=40) и контрольную группу (n=40) будут сравнивать с пациентами, которые не получали ингаляционную ингаляционную терапию экзосомами в течение того же периода. Безопасность и эффективность ингаляционного распыления экзосом мезенхимальных стволовых клеток пуповины для лечения хронического кашля у пациентов после заражения COVID-19 будут оцениваться с помощью опросов по шкале тяжести кашля, времени улучшения симптомов и возникновения нежелательных явлений.

3.1 Исследуемая группа Всего в исследование будет включено 80 участников с соотношением 1:1 для экспериментальной группы (n=40) и контрольной группы (n=40). Исследуемая популяция будет состоять из пациентов, инфицированных COVID-19, которые соответствуют критериям отбора и проходят лечение в реабилитационной амбулаторной клинике COVID-19 в больнице Шэньчжэня Южного медицинского университета.

3.2 Группирование (1) Экспериментальная группа: Ингаляция препарата экзосом мезенхимальных стволовых клеток пуповины распылением; Спецификация: 5мл, концентрация экзосом в препарате 1*10^9 частиц/мл.

(2) Контрольная группа: пациенты в течение того же периода, которые не получали лечения экзосомами стволовых клеток.