Segurança e eficácia de exossomos de células-tronco mesenquimais de cordão umbilical no tratamento de tosse crônica após COVID-19

1. Antecedentes 1.1 A síndrome pós-COVID-19, também conhecida como Long Covid, ainda está causando grandes problemas ao público, apesar de a China ter superado com sucesso a primeira onda de infecção causada pelo coronavírus 2 da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV-2) por mais de três anos, o que resultou em mais de 5 milhões de mortes em todo o mundo.

   Long Covid é uma doença de múltiplos sistemas que inclui uma variedade de sintomas graves que persistem após a infecção por COVID-19, como (1) sintomas relacionados ao coração: dor no peito, palpitações; (2) sintomas respiratórios: tosse, falta de ar, perda de paladar ou olfato; (3) sintomas pancreáticos: diabetes, lesão pancreática; (4) sistema imunológico: autoimunidade, síndrome de ativação de mastócitos MCAS; (5) sintomas neurológicos: comprometimento cognitivo (nevoeiro cerebral), fadiga, distúrbios do sono, perda de memória, zumbido; (6) sintomas vasculares: fadiga, distúrbios de coagulação, trombose venosa profunda, disfunção endotelial, doença microvascular, acidente vascular cerebral; (7) sintomas reprodutivos: disfunção erétil, distúrbios menstruais, etc., que afetam gravemente a vida diária do paciente. A Covid longa pode ocorrer em pessoas de todas as idades, e a probabilidade de desenvolvê-la está intimamente relacionada à gravidade da infecção aguda por COVID-19. Os principais fatores de alto risco que podem desencadear o Long Covid incluem (1) diabetes tipo II, (2) alta carga viral durante a infecção por COVID-19, (3) infecção anterior com o vírus EB e (4) excesso de autoanticorpos específicos. As estratégias de tratamento para COVID-19 envolvem principalmente o uso de medicamentos antivirais para bloquear o ciclo de replicação do vírus e vários métodos para suprimir a inflamação do hospedeiro para melhorar os sintomas. Atualmente, os métodos convencionais de imunoterapia usados ​​em clínicas envolvem principalmente o uso de hormônios, drogas de anticorpos monoclonais etc., mas são direcionados principalmente para reações inflamatórias mais graves e sofrem de baixa biodisponibilidade, alto custo e efeitos colaterais significativos, tornando-os inadequados para o tratamento de COVID longo. Portanto, desenvolver novos métodos de regulação imunológica com baixos efeitos colaterais e custos seria significativo para o tratamento de COVID longo.

   1.2 Células-tronco mesenquimais (MSCs) Demonstrou-se que as MSCs têm funções imune-reguladoras e regenerativas abrangentes e poderosas. As MSCs podem neutralizar a morte celular relacionada à patogênese da doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), fibrose pulmonar idiopática, asma, ARDS e hipertensão pulmonar e promover a regeneração celular. Os exossomos são um dos principais efetores parácrinos secretados pelas MSCs e são considerados candidatos poderosos para o tratamento alternativo de várias doenças porque seu material biológico é semelhante ao das células progenitoras e têm a capacidade de manter propriedades curativas. Sob condições fisiológicas e patológicas, os exossomos desempenham um papel crítico na comunicação intercelular, transportando várias biomoléculas (como miRNA e proteínas) para as células-alvo.

   1.3 o mecanismo dos exossomos derivados de MSC Os exossomos derivados de MSC herdam propriedades imunossupressoras de suas células de origem. MSC-EVs podem usar vários mecanismos para equilibrar a função do sistema imunológico. Um mecanismo chave é reprogramar e alterar o fenótipo de várias células imunes.

   Em vários modelos, os exossomos de MSC têm propriedades terapêuticas semelhantes às MSCs e são mais fáceis de preparar, armazenar e transportar para o leito, evitando algumas limitações da terapia celular, como o risco de embolia pulmonar e formação de tumor. Os exossomos secretados pelas MSCs podem regular a imunidade por meio de uma interação com células imunes e inibir reações inflamatórias por meio de citocinas. Numerosos estudos mostraram que exossomos secretados por MSCs podem ser usados ​​para tratar imunodeficiência, inflamação, ARDS e outras doenças pulmonares, portanto, exossomos secretados por MSCs também podem ser eficazes no tratamento de infecções por COVID-19 e pneumonia. O método convencional de terapia com células-tronco é uma injeção intravenosa, e os exossomos são um dos principais componentes ativos secretados pelas células-tronco com tamanho de 30-150 nm. Após a nebulização, os exossomos podem atingir diretamente os bronquíolos e alvéolos, o que é propício para maximizar a absorção do medicamento.

   1.4 Casos clínicos de terapia com exossomos derivados de MSC A China também lançou ativamente estudos clínicos relevantes. Um estudo clínico no Wuxi Fifth People's Hospital, na província de Jiangsu, confirmou que os exossomos derivados de células-tronco mesenquimais do cordão umbilical nebulizados são seguros e viáveis ​​para o tratamento da pneumonia por COVID-19. Pesquisadores do Hospital Ruijin e do Hospital Jin Yin-tan conduziram em conjunto a terapia de exossomos nebulizados para COVID-19 usando exossomos derivados de células-tronco mesenquimais adiposas alogênicas humanas (HAMSCs-Exos). Recentemente, o medicamento anti-COVID-19 inalado Exo-CD24, uma combinação de exossomos e proteína CD24, mostrou resultados promissores no ensaio clínico de fase I liderado pelo especialista do centro médico israelense Nadir Arber. Dos 30 voluntários gravemente doentes no estudo, 29 foram curados após cinco dias de tratamento. Embora o Exo-CD24 ainda não tenha passado nos testes de fase III, já demonstrou um enorme potencial para o futuro. O FDA dos EUA aprovou a Direct Biologics para iniciar um estudo de fase I/II para avaliar o ExoFlo™ no tratamento de COVID-19. Isso marca a primeira vez que as vesículas extracelulares (EVS) foram aprovadas pelo FDA dos EUA para o tratamento da doença.

2. Objetivo da pesquisa O objetivo deste estudo é avaliar a segurança e a eficácia da inalação de nebulização de exossomos de células-tronco mesenquimais do cordão umbilical para o tratamento da tosse crônica em pacientes após a infecção por COVID-19 por meio de um ensaio clínico controlado não randomizado.
3. Desenho do estudo O desenho do estudo é um estudo prospectivo, não randomizado, controlado concomitantemente. Com base no regime de tratamento de rotina para infecção por COVID-19 de acordo com as diretrizes clínicas, a inalação de nebulização de exossomos de células-tronco mesenquimais do cordão umbilical será usada no grupo experimental para tratar tosse crônica em pacientes após infecção por COVID-19. O grupo experimental (n=40) e o grupo controle (n=40) serão comparados com pacientes que não receberam terapia inalatória de nebulização de exossomos durante o mesmo período. A segurança e a eficácia da inalação de nebulização de células-tronco mesenquimais do cordão umbilical para o tratamento da tosse crônica em pacientes após infecção por COVID-19 serão avaliadas por meio de pesquisas de pontuação de gravidade da tosse, tempo de melhora dos sintomas e ocorrência de eventos adversos.

3.1 População do Estudo Um total de 80 participantes serão incluídos no estudo, com uma proporção de 1:1 para o grupo experimental (n=40) e o grupo controle (n=40). A população do estudo consistirá em pacientes infectados com COVID-19 que atendem aos critérios de seleção e são tratados no ambulatório de reabilitação COVID-19 no Hospital Shenzhen da Southern Medical University.

3.2 Agrupamento (1) Grupo experimental: Preparação de exossomas de células estaminais mesenquimais de cordão umbilical por inalação por nebulização; especificação: 5ml, concentração de exossomo na preparação é 1*10^9 partículas/ml.

(2) Grupo controle: Pacientes no mesmo período que não receberam tratamento com exossomos de células-tronco.