P24:n vaikutukset ruokailun jälkeiseen aminohappoaineen määrään veressä

Tämä tutkimus on satunnaistettu, kaksoissokko, lumelääkekontrolloitu ristiinasetelmakoe, joka on suunniteltu arvioimaan happoaktiivisen proteaasientsyymilisän (P24) akuutteja vaikutuksia ruokailun jälkeiseen aminohapon saatavuuteen terveillä aikuisilla kulutettuaan standardoitua sekaproteiiniruokaa. Jokainen osallistuja suorittaa kaksi aamukäyntiä, joiden välillä on noin 7 päivän peseytymisjakso, ja saa P24:n yhdellä käynnillä ja lumelääkkeen toisella käynnillä satunnaisessa järjestyksessä. Jokainen osallistuja toimii siten omana kontrollinaan.

Ensisijainen tavoite on vertailla ruokailun jälkeisiä kiertävien kokonaisaminohappojen vasteita P24- ja lumelääketilanteiden välillä testiruokailun jälkeen. Toissijaisia tavoitteita ovat välttämättömien aminohappojen, haaraketjuisten aminohappojen, ruokailun jälkeisten glukoosivasteiden, ruokailun jälkeisten hormonaalisten vasteiden (kuten GLP-1, GIP ja insuliini) plasman peptidiprofiilien sekä subjektiivisten vasteiden (kuten nälkä, kylläisyys ja ruoansulatuskanavan oireet) arviointi.

Käynnit suoritetaan aamulla yön yli paastottua. Ennakkostandardointiin kuuluu rajoitukset kovaan liikuntaan, alkoholiin, nikotiiniin ja kofeiiniin ennen jokaista testikäyntiä sekä ohjeet ylläpitää samanlaista ruokavaliota ennen jokaista tutkimusjaksoa. Ensimmäisellä käynnillä mitataan pituus ja paino. Jokaisella käynnillä osallistujat täyttävät lyhyet kyselylomakkeet viimeaikaisesta ruokavaliosta ja aktiivisuudesta, unesta, ruoansulatuskanavan oireista sekä subjektiivisesta ruokahalusta.

Käsivarteen asennetaan pysyvä laskimokatetri toistettua laskimon verinäytteenottoa varten. Laskimon verinäytteet kerätään lähtötasolla ja useissa ruokailun jälkeisissä aikapisteissä 180 minuutin ajan ruokailun jälkeen. Kapillaarisen veren glukoosia arvioidaan myös vastaavissa aikapisteissä standardoiduilla sormenpistomittauksilla. Osallistujat pysyvät paikalla ruokailun jälkeisen tarkkailujakson aikana, ja heitä valvotaan haittatapahtumien ja toimenpiteeseen liittyvien oireiden varalta.

Testiruoka on standardoitu sekaproteiinihampurilaisateria, joka on suunniteltu sisältämään sekä eläinperäisiä että kasviperäisiä proteiininlähteitä. Aterian koostumus, valmistus ja tarjoilumenettelyt standardoidaan kaikilla käynneillä. Osallistujat nauttivat aterian veden kanssa määritellyssä aikavälissä. Jokaisena tutkimuspäivänä osallistujat saavat joko yhden P24-kapselin tai yhden vastaavan lumelääkekapselin välittömästi ennen ateriaa tutkimuksen satunnaistusohjelman mukaisesti. Aktiiviset ja lumetuotteet ovat identtisiä ulkonäöltään sokkotilanteen ylläpitämiseksi.

Kohdennettua aminohappoanalyysiä suoritetaan käyttäen LC-MS/MS-menetelmää kiertävien aminohappopitoisuuksien määrittämiseksi ruokailun jälkeisenä aikana. Ensisijainen päätepiste on kokonaisaminohappojen inkrementaalinen käyrän alle jäävä pinta-ala välillä 0–180 minuuttia. Toissijaiset aminohappotulokset sisältävät välttämättömät aminohapot, haaraketjuiset aminohapot sekä valitut kinetiikkaparametrit, kuten havaittu maksimipitoisuus ja aika maksimipitoisuuteen. Hormonaaliset tulokset sisältävät GLP-1:n, GIP:n ja insuliinin mitattuna ennalta määritellyissä aikapisteissä. Glukoositulokset sisältävät ruokailun jälkeisen inkrementaalisen käyrän alle jäävän pinta-alan sekä liittyvät huippu- ja vaihtelumittaukset perustuen diskreetteihin kapillaarinäytteisiin.

Eksploratiivista plasman peptidomiprofiilointia suoritetaan osajoukossa osallistujista käyttäen alikvootteja rutiininomaisista plasmanäytteistä, jotka on kerätty tutkimuskäyntien aikana ilman lisäverenottoa. Osajoukon valinta suoritetaan käyttäen ennalta määriteltyjä tasapainotusperusteita, eikä se perustu havaittujen hoitovaikutusten suuruuteen tai suuntaan.

Dataa analysoidaan käyttäen ristiinasetelmalle sopivia tilastollisia menetelmiä, mukaan lukien parilliset tai sekavaikutusmallit kunkin tuloksen mukaan. Standardoidut menettelyt käyntien suorittamiseen, näytteenkäsittelyyn, laboratorioprosessointiin ja datan tarkastukseen käytetään datan laadun ja protokollan johdonmukaisuuden tukemiseksi.