Efeitos do P24 na Aminoacidemia Pós-prandial

Este estudo é um ensaio cruzado, randomizado, duplamente cego e controlado por placebo, concebido para avaliar os efeitos agudos de um suplemento de enzima protease ativa em ácido (P24) na disponibilidade de aminoácidos pós-prandial após o consumo de uma refeição padronizada de proteína mista em adultos saudáveis. Cada participante completará duas visitas de teste matinais separadas por um período de washout de aproximadamente 7 dias e receberá P24 durante uma visita e placebo durante a outra visita, por ordem randomizada. Cada participante servirá, portanto, como o seu próprio controlo.

O objetivo principal é comparar as respostas pós-prandiais de aminoácidos totais circulantes entre as condições P24 e placebo após a refeição de teste. Os objetivos secundários são avaliar aminoácidos essenciais, aminoácidos de cadeia ramificada, respostas pós-prandiais de glicose, respostas hormonais pós-prandiais incluindo GLP-1, GIP e insulina, perfis de peptídeos plasmáticos e respostas subjetivas como fome, saciedade e sintomas gastrointestinais.

As visitas serão realizadas de manhã após um jejum noturno. A padronização pré-visita incluirá restrições de exercício vigoroso, álcool, nicotina e cafeína antes de cada visita de teste, bem como instruções para manter uma ingestão alimentar semelhante antes de cada período de estudo. Na primeira visita, serão medidos a altura e o peso. Em cada visita, os participantes preencherão breves questionários relacionados com dieta e atividade recentes, sono, sintomas gastrointestinais e apetite subjetivo.

Será colocado um cateter intravenoso permanente numa veia do antebraço para recolha venosa repetida de sangue. Amostras de sangue venoso serão recolhidas em linha de base e em múltiplos pontos temporais pós-prandiais ao longo de 180 minutos após o consumo da refeição. A glicose no sangue capilar também será avaliada em pontos temporais correspondentes utilizando medições padronizadas de picada no dedo. Os participantes permanecerão no local durante o período de observação pós-prandial e serão monitorizados para eventos adversos e sintomas relacionados com o procedimento.

A refeição de teste será uma refeição padronizada de hambúrguer de proteína mista concebida para incluir fontes de proteína de origem animal e vegetal. A composição, preparação e procedimentos de serviço da refeição serão padronizados em todas as visitas. Os participantes consumirão a refeição com água dentro de uma janela de tempo definida. Em cada dia de estudo, os participantes receberão uma cápsula de P24 ou uma cápsula de placebo correspondente imediatamente antes da refeição, de acordo com o cronograma de randomização do estudo. Os produtos ativos e placebo serão idênticos na aparência para manter o cegamento.

A análise de aminoácidos direcionada será realizada utilizando LC-MS/MS para quantificar as concentrações de aminoácidos circulantes ao longo do período pós-prandial. O endpoint primário será a área incremental sob a curva para aminoácidos totais ao longo de 0 a 180 minutos. Os resultados secundários de aminoácidos incluirão aminoácidos essenciais, aminoácidos de cadeia ramificada e parâmetros cinéticos selecionados, incluindo a concentração máxima observada e o tempo até à concentração máxima. Os resultados hormonais incluirão GLP-1, GIP e insulina medidos em pontos temporais pré-especificados. Os resultados de glicose incluirão a área incremental sob a curva pós-prandial e medidas relacionadas de pico e variabilidade baseadas em amostragem capilar discreta.

A análise exploratória do perfil peptidómico plasmático será realizada num subconjunto de participantes utilizando alíquotas de amostras plasmáticas de rotina recolhidas durante as visitas de estudo, sem recolha adicional de sangue. A seleção do subconjunto será realizada utilizando critérios de equilíbrio pré-especificados e não será baseada na magnitude ou direção dos efeitos de tratamento observados.

Os dados serão analisados utilizando métodos estatísticos adequados para um desenho cruzado, incluindo abordagens emparelhadas ou de efeitos mistos, conforme apropriado para cada resultado. Procedimentos padronizados para a realização das visitas, manipulação de amostras, processamento laboratorial e revisão de dados serão utilizados para apoiar a qualidade dos dados e a consistência do protocolo.