Wpływ P24 na poposiłkowe stężenie aminokwasów we krwi

To badanie jest randomizowanym, podwójnie zaślepionym, kontrolowanym placebo krzyżowym badaniem klinicznym, zaprojektowanym w celu oceny ostrych efektów suplementu enzymu proteazy aktywnej w kwaśnym środowisku (P24) na dostępność aminokwasów poposiłkowych po spożyciu standaryzowanego posiłku mieszanobiałkowego przez zdrowych dorosłych. Każdy uczestnik odbędzie dwie poranne wizyty testowe oddzielone okresem wypłukania wynoszącym około 7 dni i otrzyma P24 podczas jednej wizyty oraz placebo podczas drugiej wizyty w losowej kolejności. Każdy uczestnik będzie zatem służył jako własna kontrola.

Głównym celem jest porównanie odpowiedzi krążących całkowitych aminokwasów poposiłkowych pomiędzy warunkami P24 a placebo po posiłku testowym. Celami drugorzędnymi są ocena aminokwasów egzogennych, aminokwasów rozgałęzionych, odpowiedzi glukozy poposiłkowej, odpowiedzi hormonalnych poposiłkowych, w tym GLP-1, GIP i insuliny, profili peptydowych w osoczu oraz odpowiedzi subiektywnych, takich jak głód, sytość i objawy żołądkowo-jelitowe.

Wizyty będą przeprowadzane rano po nocnym poście. Standaryzacja przed wizytą będzie obejmować ograniczenia dotyczące intensywnego wysiłku fizycznego, alkoholu, nikotyny i kofeiny przed każdą wizytą testową, a także instrukcje dotyczące utrzymania podobnego spożycia żywności przed każdym okresem badania. Podczas pierwszej wizyty zmierzone zostaną wzrost i masa ciała. Podczas każdej wizyty uczestnicy wypełnią krótkie kwestionariusze dotyczące ostatniej diety i aktywności, snu, objawów żołądkowo-jelitowych oraz subiektywnego apetytu.

Do żyły przedramienia wprowadzony zostanie stały cewnik dożylny w celu powtarzanego pobierania krwi żylnej. Próbki krwi żylnej będą pobierane na początku oraz w wielu punktach czasowych po posiłku przez 180 minut po spożyciu posiłku. Glukoza we krwi włośniczkowej będzie również oceniana w odpowiadających punktach czasowych przy użyciu standaryzowanych pomiarów nakłucia palca. Uczestnicy pozostaną na miejscu podczas okresu obserwacji poposiłkowej i będą monitorowani pod kątem zdarzeń niepożądanych oraz objawów związanych z procedurą.

Posiłek testowy będzie standaryzowanym mieszanobiałkowym posiłkiem burgerowym, zaprojektowanym tak, aby obejmował zarówno źródła białka pochodzenia zwierzęcego, jak i roślinnego. Skład posiłku, przygotowanie i procedury podawania będą standaryzowane dla wszystkich wizyt. Uczestnicy spożyją posiłek z wodą w określonym przedziale czasowym. Każdego dnia badania uczestnicy otrzymają jedną kapsułkę P24 lub jedną identyczną kapsułkę placebo bezpośrednio przed posiłkiem zgodnie z harmonogramem randomizacji badania. Produkty aktywne i placebo będą identyczne pod względem wyglądu, aby utrzymać zaślepienie.

Ukierunkowana analiza aminokwasów zostanie przeprowadzona przy użyciu LC-MS/MS w celu ilościowego określenia stężeń krążących aminokwasów w okresie poposiłkowym. Punktem końcowym pierwszorzędowym będzie przyrostowa powierzchnia pod krzywą dla całkowitych aminokwasów w przedziale od 0 do 180 minut. Drugorzędowe wyniki dotyczące aminokwasów będą obejmować aminokwasy egzogenne, aminokwasy rozgałęzione oraz wybrane parametry kinetyczne, w tym maksymalne obserwowane stężenie i czas do osiągnięcia maksymalnego stężenia. Wyniki hormonalne będą obejmować GLP-1, GIP i insulinę mierzone w ustalonych z góry punktach czasowych. Wyniki dotyczące glukozy będą obejmować poposiłkową przyrostową powierzchnię pod krzywą oraz powiązane miary szczytu i zmienności oparte na dyskretnym pobieraniu krwi włośniczkowej.

Eksploracyjne profilowanie peptydomiki osocza zostanie przeprowadzone w podgrupie uczestników przy użyciu porcji z rutynowych próbek osocza pobranych podczas wizyt badawczych, bez dodatkowego pobierania krwi. Wybór podgrupy zostanie przeprowadzony przy użyciu ustalonych z góry kryteriów równoważenia i nie będzie oparty na wielkości lub kierunku obserwowanych efektów leczenia.

Dane zostaną przeanalizowane przy użyciu metod statystycznych odpowiednich dla projektu krzyżowego, w tym metod sparowanych lub modeli efektów mieszanych, odpowiednich dla każdego wyniku. Zastosowane zostaną standaryzowane procedury przeprowadzania wizyt, obchodzenia się z próbkami, przetwarzania laboratoryjnego i przeglądu danych w celu wsparcia jakości danych i spójności protokołu.