Effetti del P24 sull'Aminoacidemia Postprandiale

Questo studio è uno studio crossover randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo, progettato per valutare gli effetti acuti di un integratore enzimatico proteasico attivo in ambiente acido (P24) sulla disponibilità di aminoacidi postprandiale dopo il consumo di un pasto misto proteico standardizzato in adulti sani. Ogni partecipante completerà due visite di test al mattino separate da un periodo di washout di circa 7 giorni e riceverà P24 durante una visita e placebo durante l'altra visita in ordine randomizzato. Ciascun partecipante fungerà quindi da controllo di se stesso.

L'obiettivo primario è confrontare le risposte postprandiali degli aminoacidi totali circolanti tra le condizioni P24 e placebo dopo il pasto di test. Gli obiettivi secondari sono valutare gli aminoacidi essenziali, gli aminoacidi a catena ramificata, le risposte glicemiche postprandiali, le risposte ormonali postprandiali inclusi GLP-1, GIP e insulina, i profili peptidici plasmatici e le risposte soggettive come fame, sazietà e sintomi gastrointestinali.

Le visite saranno condotte al mattino dopo un digiuno notturno. La standardizzazione pre-visita includerà restrizioni sull'esercizio vigoroso, alcol, nicotina e caffeina prima di ogni visita di test, nonché istruzioni per mantenere un apporto dietetico simile prima di ciascun periodo di studio. Alla prima visita, verranno misurati altezza e peso. Ad ogni visita, i partecipanti compileranno brevi questionari relativi a dieta e attività recenti, sonno, sintomi gastrointestinali e appetito soggettivo.

Un catetere endovenoso a permanenza verrà posizionato in una vena dell'avambraccio per ripetuti prelievi venosi. Campioni di sangue venoso verranno raccolti al basale e a più punti temporali postprandiali per 180 minuti dopo il consumo del pasto. Anche la glicemia capillare verrà valutata in corrispondenza dei medesimi punti temporali utilizzando misurazioni standardizzate con puntura del dito. I partecipanti rimarranno in sede durante il periodo di osservazione postprandiale e saranno monitorati per eventi avversi e sintomi correlati alla procedura.

Il pasto di test sarà un pasto standardizzato misto proteico a base di hamburger progettato per includere sia fonti proteiche di origine animale che vegetale. La composizione del pasto, la preparazione e le procedure di somministrazione saranno standardizzate per tutte le visite. I partecipanti consumeranno il pasto con acqua entro una finestra temporale definita. In ciascuna giornata di studio, i partecipanti riceveranno una capsula di P24 o una capsula placebo corrispondente immediatamente prima del pasto secondo il programma di randomizzazione dello studio. I prodotti attivi e placebo saranno identici nell'aspetto per mantenere il cieco.

L'analisi mirata degli aminoacidi verrà eseguita utilizzando LC-MS/MS per quantificare le concentrazioni di aminoacidi circolanti durante il periodo postprandiale. L'endpoint primario sarà l'area incrementale sotto la curva per gli aminoacidi totali da 0 a 180 minuti. Gli esiti secondari sugli aminoacidi includeranno aminoacidi essenziali, aminoacidi a catena ramificata e parametri cinetici selezionati inclusi la concentrazione massima osservata e il tempo alla concentrazione massima. Gli esiti ormonali includeranno GLP-1, GIP e insulina misurati a punti temporali prestabiliti. Gli esiti glicemici includeranno l'area incrementale sotto la curva postprandiale e le relative misure di picco e variabilità basate sul campionamento capillare discreto.

Il profilo peptidomico plasmatico esplorativo verrà condotto in un sottogruppo di partecipanti utilizzando aliquote dei campioni di plasma di routine raccolti durante le visite di studio, senza ulteriori prelievi di sangue. La selezione del sottogruppo verrà eseguita utilizzando criteri di bilanciamento prestabiliti e non sarà basata sull'entità o la direzione degli effetti del trattamento osservati.

I dati verranno analizzati utilizzando metodi statistici appropriati per un disegno crossover, inclusi approcci appaiati o a effetti misti come appropriato per ciascun esito. Procedure standardizzate per la conduzione delle visite, la gestione dei campioni, l'elaborazione in laboratorio e la revisione dei dati verranno utilizzate per supportare la qualità dei dati e la coerenza del protocollo.